委陵菜叶斑病病原菌分离纯化.docx

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委陵菜叶斑病病原菌分离纯化对委陵菜病杏标本进行病原菌的分离纯化，初步认为采集病需标本为两种病害，分别为白菜软腐病和黑腐病，查阅文献病原菌分别为野油菜黄单胞杆菌野油菜黑腐病致病变种(XanthomonasCampestrisp.cane.stris)和欧氏杆的属细菌(ErwiniacamtovoraPV.Carotovoru),具体内容如卜.：1材料与方法1.1 材料委陵菜病叶，2016年来自1.2 分离方法采用组织分离法，选取病斑明显的叶片，在无菌操作条件卜.，以75%乙静浸泡30s后,用无蓄水冲洗3次后放入0.1%升汞中浸泡5min,再用无菌水冲洗4次。将经过表面消毒的叶片，用无菌戏纸吸干水分，在其病健交接位置切取05cmXO.5cm的组织块，将其接种于9On直径的马铃第菊翻糖琼脂培养基(PDA)平板上，于25C恒温培养箱中光照培养3-51.将分离得到的菌落接种于PDA上纯化,并将纯化得到的菌株置于P1.)A斜面中，4C低温保存.1.3 致病性制定采用伤口离体接种法，即刺伤接种部位再进行接种。