一种葡萄白粉菌的离体接种方法.docx

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1、一种葡筠白粉菌的离体接种方法一种葡的白粉菌的离体接种方法，包括如下步骤：离体叶片的选择：采摘葡筠梢尖以下的第36片的叶片;菌种的选用:选用新鲜的葡萄白粉病菌饱子;药剂的配制：配制浓度为109Omg/1.的苯丙味哩溶液：叶片的处理：清理后在叶片的叶柄上缠绕无菌棉，加滴配制好的苯丙咪哩溶液：接种：直接接种到上述经笨丙味喋溶液处理的齿体叶片上培养。本发明采用米丙味嚏作为保绿剂使用，将箱药白粉菌接种在离体叶片上，苯丙咪昨对离体叶片发生白粉病无影响，解决了葡萄白酚菌的培养与保敏的问题，3种常用保绿剂（茶并味嘎、6BA和2.4D）安徽小麦白粉病菌生物学特性及不同生态区病菌的毒性分析赏设1摘要】t小麦白粉病

2、是由布氏白粉的小麦专化型（Bh1.meriaRraminiSf.sp.IriIiCi）引起的世界性小麦病古，近年来,由于各种因素的影响,小麦白酚物已成为全国小麦生产中发病面积大.危害损失受的常发性病害.选育抗病品种被认为是目前防治小麦病害最为经济、安全和彳!效的途径.因此.研究小麦白检菌生物学特性及不同生态区小麦白粉病菌的毒力结构具有重要软义.在实戕上对于曲种的保存.筛选和签定抗狒资源有石卜分取耍的指导作用。本文以安彼否IO个生态区的小麦臼粉病曲（B.graminisf.sp.I由ici）为研究时象,分别从保绿剂的暗选、小麦门扮菌保存、温度对小麦白粉病菌潜育期、产泡母及病斑的影响、小麦门豹病苗

3、期鉴定和齿体叶段抗性鉴定结果的比较、安徽省不同生态区小麦白粉病菌毒力的测定和安徽省不同生态区小麦白粉病网ISSR多态性7个方面进行了系统研究.主要研究结果如卜1.保绿剂的筛选本试蛤通过：因素G优设计,筛选出3种常川保绿剂（恭并味!坐、6BA和24D）的以隹用I七以各自最佳用；iiiS行比较,结果我明：6C条件下（臼粉病菌保存温度）.米并味畦效果M好,浓度为1.21.（-4sm1.时.保绿的时间长达37d.6-BA次之.浓度为1.4x1.-5gm1.时.保绿的时间为2511.2.4-D较差,浓度为5IO-5g111.时.保绿的时间仅有1加。在I81C条件下（白粉病菌侵染温度）,也是茶井味P上效果

4、炒好,浓度为1.2T04gm1.时,保绿的时间长达I4d6BA次之.浓度为1.5x1.-3g.m1.时,保绿的时间为I3d.2.4-D较空,保绿的时间仅有KM.2.小麦白粉菌的菌种保存试脸结果表明.在最适温度46T时,给予一定的光照.试管苗上的白检病菌可保存3O4Od左右：在离体培养基上.一般可保存15-20d左右。3.温度对小麦白粉病茶消育期、产抱球及显症的影响温度试验结果显示：温度为IOC时,显旋时间最长；20C时,显症时间最短：当温度越过25C时,显症时间逐渐延长,甚至几乎不显症.当温度趋于15C和20C之间时.产他fit最多,随着温度的升高产Jf1.t逐渐降低.低于151C时.虽然产胞

5、.但速度畿慢;在IO-C-25C的范用内,随着温度的升商.小麦白树病赭的胞子堆逐渐增大。25C时.胞子堆面枳达最大值。4.小麦门勃鹤苗期抗性鉴定和离体叶段抗性格定结果致性的比较从两种鉴定方法的结果可以看出,小麦品种鉴定抗性级别相同的占卷定总数的53%：鉴定级别和差一汲的占44%：鉴定级别相差二级的仅占22%.可以看出室内离体叶段鉴定与苗期鉴定结果基本一诙,此外,离体签定与苗期格定相比,具有受环境条件影响小、简便快捷等优点-5.安徵行不同生态区小麦白粉病菌的毒性分析本试验对安微省IO个不同生态区的小麦臼粉衡菌株的毒性版率进行了检测.结果表明：安徽省小麦白粉病菌的稼性基因V2y、V5(M1.i).

6、V12.V13.V16.VI8、V21和V35的毒性较低(30%).而V2、VS,V4+8、VKV3a.V3b.V3d,V3cxVMV3E、V4a,V4b,V5,V6、V6、V?、VI7、V19.VI+2+9,V23、V25和V34的毒性校岛(50%).由此可以说明.P2、PX,P4+8、PkP3a,P3b、P3d.P3c、P3d、P3E、P4a、P4b.P5.P6、P6.P7、P17,PI9、P1.+2+9、P23、P25和P34抗性基因已基本丧失抗性.不能单独使用：而P2+6P5(M1.i)、PI2、PI3、PI6、P1.8、P2I和P35抗性基因表现的抗性较覆,在安徽省小麦Ff种中,作为

7、白粉病的有效抗性基因仍然可以利用,从而力范困的角度分析：砺山、涡阳、合肥等生态区的小麦白粉画具有较宽的再讲,而且阳、颍上等生态区的小麦白粉菌毒诣相对较窄.但IO个地方的小麦白粉菌毒性柒率基本一致,差异不大.6.安做省不同生态区小麦白粉病菌ISSR的多态性分析为擢示安徽省小麦白粉的群体遗传结构、起源及进化关系,采用筒单史复序列(interSinIPIesequencerepeats.ISSR网安做省10个生态区和3个外省前株的小麦门粉菌菌系进行了群体遗传算样性分析.从50个的机引物中筛选出8个多态性高、清年度好的引物,对13个地方的菌株进行多态性分析.8个引物共扩增出85条条带.其中多态性条带42条,占49%,采用NTs”-20软件进行UPGMA聚类分析.结果表明.各菌株遗传亚国分布在0.470.83之间，不同来源的各画栋间以不同的相似系数聚于不同的类用1.说明13个生态区的小麦门粉倘存在-定的差异.