PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响【临床医学毕业论文范文doc格式下载】.docx
《PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响【临床医学毕业论文范文doc格式下载】.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响【临床医学毕业论文范文doc格式下载】.docx(11页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响【临床医学毕业论文范文doc格式下载】.DOC临床医学论文-PBOo对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响作者:王永权,方强,路扬,李龙坤,宋波【摘要】目的探讨豚鼠膀胱流出道梗阻(PBOO)对膀胱K哈尔间质细胞(IeC)形态结构的影响。方法建立雌性豚鼠PBOO模型,芥依据尿动力学检测结果将模型分为PBOO后遇尿肌不稳定(DO)组和PBOO后退尿肌稔定(DS)组,以假手术组作为比照,饲养4周后取膀胱组织,制成全层组织铺片和冰冻组织切片,Ckit免疫荧光染色分别视察各组膀胱肌层和黏膜FICC的形态和分布状况。结果PBOo4周后,DO组豚鼠膀胱出现排尿频
2、率、排尿压力的增加(n=12,PO.05),并且视察到明显的储尿期膀胱不稳定收缩。比照组、DS组和DO组豚鼠膀胱均视察到ckit染色阳性且呈典型长枚形有突起的ICC.主要分布于平滑肌肌束间和黏膜下层:在DO组豚鼠的膀胱中Ckit染色阳性的ICC分支突起增加且相互连接呈网络状,而在比照组和DS组中ICC呈散在分布,细胞之间联系较松散。结论在PBOO所致DO豚鼠膀胱中ICC发生形态和结构的变更,相互之间连接呈网络状,ICC的形态和结构的变更可能是逼尿肌不稳定的重要发病基础。【关键词】卡哈尔间质细胞;逼尿肌不稳定:膀胱流出道梗阻;膝胱Abstract:ObjectiveToinvestigateth
3、ealteredmorphologycharactersofinterstitialcellsofCajalcells(ICC)inguineapigbladderafterpartialbladderoutletobstruction(PBOO).MethodsPartialbladderoutletobstruction(PBOO)animalmodelswereproducedinfemaleguineapigsandwerevalidatedwithUrodynamicexamination.AnimalswithunstablebladderpressureafterPBOOwere
4、setasDOgroup.AnimalswithstablebladderpressureafterPBOOweresetasdetrusorstable(DS)groupandcontrolgroupwascomposedbyshamoperatedanimals.ImmunohistochemistrystudiesforCkitasaspecificmarkforICCwereperformedonguineapigbladdersineachgroup.ResultsFourweeksaftersurgery,animalsinDOgroupshowedanincreasedvoidi
5、ngfrequency,highervoidingpressureandirrcgularnonvoidingcontractions(n=12,PO.05).WefoundincreasingmutualconnectionandmultilayerconstructioninsuburotheliumandintermuscularlayersofDObutnotDSandcontrolbladders.ConclusionThosefindingsdemonstratedthemorphologicalandstructuredifferencesofICCinguineapigblad
6、derafterPBOO,whichsuggestICCbeinvolvedintheetiopathogenesisofDO.Keywords:cajalinterstitialcells:detrusoroveractivity;partialbladderoutletobstruction;bladder膀胱逼尿肌的兴奋和收缩可受神经、体液等多种因素的调控和影响。目前的探讨表明,膝胱平滑肌的兴奋调控可能与一种特别的间质细胞,卡哈尔间质细胞(interstitialcellsofCajal,ICC)有关1。ICC首先在胃肠道组织中发觉,其细胞膜上带有特异性的ckit受体酪宏酸激的的表面标记
7、。ICC对胃肠道基本电节却的形成、神经传导的调控、信号整合等多种生理功能起到r重要的作用20目前,在胃肠道组织以外的多种平滑肌组织(如输尿管、膀胱、子宫、胆囊等)接连发觉rICC的存在34,但是胃肠道外ICC的功能学探讨尚处于起步阶段。逼尿肌不稳定(DetrusorOveractivityDO)是常见的膀胱功能障碍,临床上常表现为一种以尿急症状为特征的征候群,常伴有尿频和夜尿症状,可伴或不伴有急迫性尿失禁;尿动力学上可表现为膀胱储尿期的膀胱不稳定收缩。依据2002年国际尿控协会的定义,DO在尿动力学的描述中为充盈期出现无意识的逼尿肌自发或经诱发的收缩5。DO常伴发于膀胱流出道梗阻的患者。然而相
8、当一部分患者在机械梗阻病因解除后排尿功能障碍并未得到有效缓解,提示逼尿肌不稳定的发病机制还有待进一步探讨。既往的很多探讨中关于神经调控异样和逼尿肌自身的结构变更等假说也不能满足的说明DO的发病缘由6,而ICC在膀胱中的发觉和初步探讨表明,膀胱ICC在调整膀胱的局部收缩和逼尿肌自发性兴奋中可发挥重要的作用,因此,基于膝胱ICC的相关探讨可能是对DO等膀胱功能障碍性疾病发病机制的重要补充。本探讨建立脐胱流出道部分梗阻(Patialbladderoutletobstruction,PBOO)致Do模型,通过免疫荧光标记的方法,比较ICC在PBOO膀胱中形态结构的差异,为进一步相识DO的发病机制打下肯
9、定基础。1材料与方法1.1主要材料与试剂健康雌性豚鼠,体重320460g,34月龄,购H第三军医高校动物试验中心。激光共聚焦显微镜(1.eica公司),RM6240多通道生理检测仪(成都仪器厂.),微晶输液泵(3M公司),羊抗豚鼠Ckit多克隆抗体(SantaCrUZ公司),大鼠抗豚鼠平滑肌肌动蛋白(SMM)单克隆抗体(Sigma公司),驴抗羊AF488荧光二抗、驴抗大鼠F594荧光二抗(MOIeCUIarProbeS公司),DAPI细胞核染料(碧云天公司)。1.2试验方法1.2.1豚鼠膀胱流出道部分梗阻模型建立参照KUbota7等人的试验方法构建豚鼠Dl模型。简述如下:1与戊巴比妥钠(50m
10、gkg)腹腔注射麻醉,将直径为1mm的硬膜外导管经尿道外口插入膀胱,以此作为尿道支撑。取下腹部正中切口,长约1.52cm,切开皮肤及皮下组织,剪开腹直肌前鞘腱膜,分别腹宜肌,找到膀胱,细致游离膀胱-尿道交界处,近端尿道稍作分别,于此处穿过2-0丝线,结扎近端尿道,结扎丝线的松紧标准以牵拉探子时四周组织可随之移动,而探子乂可轻易拔除为度,然后拔除探子,逐层健合关闭切口。假手术组动物依据上述手术方法行开腹及近端尿道钝性分别,但不行结扎梗阻试验,作为比照。术后每只豚鼠单笼喂养,保持动物笼清洁干燥。全部试验动物术后适后运用抗生素:庆大霉素05mgkg,腹腔注射,1次d,共3d01.2.2 豚鼠膀胱尿动
11、力学检测PBOO手术4周后行尿动力学检测。25%乌拉坦溶液按1g/kg体重腹腔内注射麻醉。豚鼠取仰卧位,四肢固定,乙醇消毒尿道外口及会阴部,将外直径为1mm的硬膜外导管经尿道外口插入膀胱(见尿液流出);若为PBOO后模型豚鼠,可打开腹腔解除梗阻后再行插入。轻压豚鼠腹部,排尽尿液,导管接5号针头,经三通管与尿动力检测仪及微址灌注泵相连。设置测压参数:压力模式,扫描速度10sdiv,灵敏度12.5cmH20,时间常数直流,采集频率400Hz,滤波频率30Hz:标定零点。用微M灌注泵以0.2rnl/min速率灌注,膀胱灌注液采纳生理盐水,同步记录随容积增加膀胱压力波形、膀胱容拈以及排尿间隔时间。1.
12、2.3 豚鼠膀胱组织铺片和冰冻切片免疫荧光染色在标本制作中运用组织冰冻切片和组织全层铺片两种方法,前者主要视察拈膜下ICC;而后者主要用于视察肌层的ICCo组织铺片的制作方法为:断颈处死动物,下腹部正中切口暴露膀胱,结扎双侧输尿管,将4%多聚甲醛臼尿道注入膀胱内,维持充盈状态并固定10min。将充盈的膀胱剪下置入4%多聚甲醛中接者固定68h后,沿腹侧面纵行剪开,在解剖显微镜下,当心剔除黏膜层。将肌层组织制成含12层肌细胞厚度约100-200m的组织铺片。冰冻切片的制作方法为:动物处死和标本采集同上,膀胱组织4%多聚甲醛固定68h,10f30%蔗糖溶液梯度脱水过夜,-20C下OCT冰冻包埋液包埋
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 临床医学毕业论文范文doc格式下载 PBOO 豚鼠 膀胱 卡哈尔 间质 细胞 形态 结构 影响 临床医学 毕业论文 范文 doc 格式 下载
链接地址:https://www.31ppt.com/p-7186153.html