艾滋病实验室质量管理.ppt

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1、艾滋病检测实验室质量管理,依据,中华人民共和国计量法中华人民共和国主席令第28号,颁布时间：1985-9-6；发文单位：国家计量局,目的：保障国家计量单位制的统一和量值的准确可靠；在中华人民共和国境内，建立计量基准器具，计量标准器具，进行计量检定；国家采用国际单位制，国务院计量行政部门对全国计量工作实施统一监督管理；县级以上地方人民政府计量行政部门对本行政区域内的计量工作实施监督管理。（第二章、第九条、县级以上人民政府计量行政部门对社会公用计量标准器具，部门和企业、事业单位使用的最高计量标准器具，以及用于贸易结算、安全防护、医疗卫生、环境监测方面的列入强制检定目录的工作计量器具，实行强制检定。

2、未按照规定申请检定或者检定不合格的，不得使用。实行强制检定的工作计量器具的目录和管理办法，由国务院制定。）艾滋病防治条例中华人民共和国国务院令第 457 号，自2006年3月1日起施行第六章 法律责任：造成艾滋病传播、流行或者其他严重后果的，对负有责任的主管人员依法给予行政处分；构成犯罪的，依法追究刑事责任。临床用血检测、拒绝病人救治，未执行操作规程和消毒管理制度，发生艾滋病医院感染或者医源性感染的，全国艾滋病检测工作管理办法2006年6月12日，卫生部以卫疾控发2006218号印发全国艾滋病检测工作管理办法。该办法分总则、艾滋病检测实验室的设置、艾滋病检测实验室的验收、艾滋病检测工作要求、艾

3、滋病检测工作中的生物安全、实验室质量管理、监督管理、附则8章35条，自发布之日起施行。全国艾滋病检测技术规范(2009修订版）检测和校准实验室能力的通用要求(ISO/IEC17025:2005),建立质量管理体系的目的,通过建立与运行质量管理体系，使实验室的检验活动保质、保量、安全、迅速、准确、有效、科学、公正，使实验室建设符合规范和指南的要求,为HIV感染者和AIDS患者提供准确的诊断依据,HIV抗体血清学检验的 质量保证与质量控制,建立运行良好的质量管理体系是保证高质量艾滋病检测实验室工作的重要因素。主要内容包括HIV实验室检测的质量保证(quality assurance，QA)，质量控

4、制(quality control，QC)和质量评价(external quality assessment，EQA)。质量保证、质量控制和质量评价是HIV测定的重要部分。,一质量保证(QA),(一)定义 质量保证是指从接收检验标本起，到实验室发出报告止，为确保实验室最终报告结果的正确性所进行的全过程，包括采取的各种行政和技术上的措施和方法。,质量保证是确保实验结果质量的基本条件，其实施程度直接影响试验结果和最后报告的每个参数。质量保证取决于良好的质量控制程序，并经良好的质量评价程序加艾滋病检测质量管理工作指南以鉴定。因此，要求所有的实验室工作人员有责任时刻注意解决影响实验结果的每个环节上可能

5、出现的问题。,(二)实验室质量保证,1.行政支持应将艾滋病检测实验室的建设、发展和质量管理纳入地方卫生行政规划，保证实验室负责人和主要技术人员队伍的稳定，保证实验室建筑和设备需要，给予充足的经费支持，并进行经常性监督检查。2.人员培训检测技术人员需经过上岗培训和在岗持续培训。上岗培训内容至少应包括：艾滋病检测相关基础知识，艾滋病相关检测技术及管理要求，实验操作，质量保证与质量控制，生物安全。要求掌握相关专业知识和技能，能独立熟练地操作，并经考核合格，持证上岗。在岗持续培训指在工作中要根据需要接受复培训，确证实验室技术人员每年至少1次，筛查实验室技术人员至少每2年1次，除接受检测基本培训内容外，

6、要求了解相关技术、质控及安全要求的新进展。,(二)实验室质量保证,至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。实验室在使用新方法前，须对技术人员进行培训，获得资格后方可开展相应工作。检测人员应分为检验人、复核人、签发人。复核人、签发人应具备对检测过程进行分析和解决问题的能力。3.环境条件艾滋病确证实验室及筛查实验室的设置及其建筑、设施、设备必须符合全国艾滋病检测工作管理办法的要求。实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BS

7、L-2）要求。,(二)实验室质量保证,4.样品的采集、运送和处理用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、血浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定。艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。常用的血液样品的采集和处理方法如下：(1)、血清样品采集和处理,(二)实验室质量保证,用一次性注射器（或真空采血管）抽取5ml静脉血，室温下自然放置12h，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清放在螺旋管备用。塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性,最好使用真空采血管。有时

8、为了争取时间快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果,(二)实验室质量保证,溶血血清中含有过氧化酶物质（红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素），在洗涤过程中往往难以完全洗脱，会释放出原生态氧(O)，从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，产生假阳性。样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。,(二)实验室质量保

9、证,(2)、抗凝血样品采集和处理CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集静脉血，将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管（有条件者最好用真空试管）。采血后立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固。用K3EDTA抗凝，收集样品应在30h以内，尽早（8h以内）处理。核酸定性/定量检测用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞吸出血浆放在螺旋管备用。,(二)实验室质量保证,加抗凝剂的标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。采集样品时应注意安全，建议采用真

10、空采血管及蝶形针具，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病（AIDS）病人血液/体液的操作,应戴双层手套。,(二)实验室质量保证,(3)、样品的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8。用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过48h则不可检测。,(二)实验室质量保证,(4)、样品的运送 应符合生物安全要求；要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。实验室间传递的样品应为血清或血浆，除

11、特殊情况外一般不运送全血。应采用WHO提出的三级包装系统A、第一层容器：装样品，要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。,(二)实验室质量保证,B、第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理。C、第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。,(二)实验室质量保证,血清和血浆样品应在28条件下由专人运送。用于C

12、D4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下1823运送。每一包装的体积以不超过50ml为宜。运送感染性材料必须有记录。5.样品的接收含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。,(二)实验室质量保证,核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处

13、理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。接收样品时应填写样品接收单。,(二)实验室质量保证,6.检验方法和试剂盒的选择应使用经国家食品药品监督管理局注册批准的试剂。应选择敏感性高、特异性好的试剂。各实验室更换试剂批号时，应进行平行试验，即新批号试剂在测定质控品（已知结果）时能够获得与原试剂相同的结果。所有试剂盒须严格按要求条件保存。试剂盒拆封时，要记录拆封时间，所有试剂严格控制在有效期内使用。,(二)实验室质量保证,7.试剂质量评估一、被评估试剂 HIV抗体酶联诊断试剂，如：为吉比爱，1个产品、1个批号。二、血清盘构成 酶联试剂评估血清

14、盘：由20份已知弱阳性、20份已知阴性结果的样品构成。三、检测结果 本次试剂评估共获得有效检测数据40个。四、评估结果 评估结果的分析及统计处理测试后的检测结果可按下列指标统计处理：敏感性：真阳性/（真阳性+假阴性）100%特异性：真阴性/（真阴性+假阳性）100%假阳性率：假阳性/（真阴性+假阳性）100%假阴性率：假阴性/（真阳性+假阴性）100%,(二)实验室质量保证,8.设备维护与校准配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。实验室应设立常用仪器的维护及

15、校准制度，以保证检测工作正常运转。必须经国家法定部门定期（每年至少1次）校准的仪器至少包括：酶标仪，加样器，温度计，高压灭菌器。其他精密仪器及出具实验结果的仪器，如洗板机、生物安全柜，全自动蛋白印迹仪，CD4细胞测定仪、病毒载量测定仪、耐药检测仪、离心机等也必须定期（每年1次）校准，可请生产厂家校准。,（1）、ELISA洗板机与酶标仪是检测HIV的最常用和最重要的仪器，应该设立预防性的维护制度，以保证仪器的正常工作。推荐方法如下：每个工作日：核对酶标仪滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。每周：清洗仪器表面，保护光学零件，不沾灰尘。,(二)实验室质量保证,每月：洗涤时检查各孔是否

16、与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。这是保证各孔洗涤均衡一致的前提。每年：检查、清洗滤光片，如果出现破裂或霉点须更换；根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的精密度进行校准并保留记录。对滤光片的所用波长吸光度的精密度进行校验，测定20次，计算精密度。精密度应该控制在厂家说明书中所规定的范围(计量技术监督局强检)。,(二)实验室质量保证,（2）、移液器(包括单头和多头移液器)是实验室中重要的基本器具，应定期（每年至少1次）校准，发现异常情况应随时进行校准。标定方法包括有色溶液光谱分析法、称量校准法、同位素计数法以及使用配套校准盒等。校准多道移液器时，必须保证每一个加样头都能够连

17、续、准确地加样。移液器的精密度应在厂家说明书规定的范围内。,(二)实验室质量保证,(二)实验室质量保证,范例 用蒸馏水称量法标定移液器：在室温22无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待校准的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入烧瓶底部，称重并计算蒸馏水重量，连续称重10次。加蒸馏水的量根据待校准移液器的规格而不同（见表），10次校准称量均在要求的重量范围内为合格，贴上合格标签，注明校准日期，不合格移液器要请生产厂家进行校准。填写和保存校准记录。,称重法校准移液器方案 移液器规格 蒸馏水量 要求重量范围 0.55l 2l 1.75 2.25mg 110l 10l 9.8 10.2

18、mg 40200l 70l 69.4 70.6mg 2001000l 300l 298.0 302.0 mg 15ml 2000l 1990.0 2010.0 mg 210ml 3500l 3485.0 3515.0 mg,(二)实验室质量保证,(二)实验室质量保证,（3）、每天检查和记录冰箱温度，每个工作日检查记录孵育箱温度，并做好记录。使用经过计量部门校准合格的温度计测量冰箱和孵育箱的实际温度（比对），根据不同规格冰箱和冻存样品性质对温度要求不同，用于冷冻核酸和抗原检测的血浆、淋巴细胞和病毒上清适宜在-70冰箱，要求冰箱温度低于-65；保存抗体检测样品及考核盘适宜在-20冰箱，要求冰箱温度

19、低于-15；放置要求4保存的试剂盒的冰箱温度应在28；用于培养的孵育箱温度误差应小于1。,(二)实验室质量保证,（4）、定期检查其他相关的仪器设备如CDT淋巴细胞测定仪，病毒载量测定仪，离心机，全自动蛋白印迹仪，生物安全柜，高压灭菌器等，每次使用前检查仪器是否处于正常运转状态，并做好记录。使用过程中或使用后检查发现问题，应及时报告，并请专业公司进行维修，直至运转正常。,(二)实验室质量保证,9.实验耗材 实验室需选购质量优良的耗材，以保证检测工作安全和结果的可靠性，并定期（每批次）或在更换产品时对耗材进行质量评价。,(二)实验室质量保证,10.文件和文件管理各级艾滋病实验室要建立覆盖主要工作内

20、容的SOP文件。SOP是书面质量体系中的一个很重要的部分。SOP是指导完成检测工作的一整套书面操作指南，因而任何实验室应就本实验室所有重要工作制定相应的SOP。,(二)实验室质量保证,筛查及确证实验室SOP文件至少应包括：（1）样品的接收、登记、处理、保存和运输；（2）检测方法和步骤；（3）试剂使用和保存；（4）仪器的使用维护和校准；（5）质量控制要求及程序；（6）结果解释与报告；（7）保密程序；（8）实验室数据、相关文件记录与保存；（9）不确定样品追踪和处理；（10）实验室安全防护及实验室的清理和消毒。,SOP正规编写通常包括以下内容：（1）标题和编号；（2）编写和修订日期；（3）编写和修订

21、人员姓名；（4）方法、目的和应用范围；（5）检测设备；（6）试剂及有效期；（7）安全防护相关步骤；（8）结果的解释和报告；（9）附录，包括相关的附加文件如标准表格、设备和试剂盒说明书等。,(二)实验室质量保证,SOP编写及修订 由各岗位工作人员起草，实验室主任审定，每年修订一次。修订应该在实验室主管人员（技术负责人）的领导下进行。所有工作人员要在所从事工作的SOP文件上签名表示已经阅读并掌握了有关内容。实验过程中应严格执行标准操作程序（SOP），不得擅自修改。,(二)实验室质量保证,建立实验原始记录表,建立实验原始记录表 应按实验要求，设计试验操作原始记录表，标明空白对照、阳性对照、阴性对照、

22、外部对照以及待检样品的位置，便于指导实验人员加样。要注明试剂盒厂家、测定方法、批号、效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期。结果报告 分析结果及发出检测报告前，应注意须在试剂盒及外部质控品结果满足要求的前提下，对样品进行分析。试剂盒及外部质控品不合格，样品需要重新检测；复核人对检测结果进行仔细复核并对结果提出结论、签发人对试验结论进行审核、分析、总结、签字。,(二)实验室质量保证,样品登记和保存 收到样品后，建立唯一编码，及时登记有关信息，括受检者姓名或代号、试管编号、性别、年龄、职业、送检单位、人群类别、检验结果、送检日期、报告日期、备注（必要时记录通信地址）等。HIV阳性样品的保存记录应包

23、括HIV阳性样品的类型、贮存量、贮存温度、贮存起始时间以及样品保管人姓名。文件存档 实验原始记录表、打印数据、免疫印迹试验的膜反应条带或其照片、检测记录表、样品登记、样品保存记录以及仪器设备维修和校准记录、人员培训记录等都应该妥善存档保存10年以上。最好同时使用计算机保存各种文件和记录。,(二)实验室质量保证,二.质量控制(QC),(一)定义 质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。质量控制也是实施实验室质量保证的一部分，它表明每一步操作产生可信的结果。在全面质量管理体系中，实验室内质量控制是一个重要的环节，是保证高质量操作必不可少的措施HIV检测的室间质量评

24、价又是使全面质量保证体系标准化、法制化的一个途径,质量控制具体内容是指将控制品(内部对照或外部对照)和检测标本一起实验操作，从控制值了解分析过程的质量情况。为便于观测和概括，又使用了一些统计学方法进行归纳和分析。质量控制的最终结果可以了解本次实验是否有效，所有试验条件是否正常，以及所有试验结果是否可靠。检测HIV抗体后能提供准确的检验报告，是每一个从事HIV抗体检验的实验室的最高宗旨。,二.质量控制(QC),二.质量控制(QC),(二)实验室质量控制的基本要求必须使用经卫生部批准或注册，经过中国药品生物制品检定所批批检定合格的国产或进口HIV抗体初筛和确认检测试剂。初筛用的HIV检测试剂必须是

25、HIV一1/2混合型。必须使用在有效期内且保存条件符合要求的诊断试剂。必须按照SOP中规定的要求进行操作，包括进行检测的实验条件如阳性对照和阴性对照的设置、试剂、标本加样量、孵育时间、反应温度、洗涤程序和次数等。在实验前必须检查所有待检标本的质量，如有脂血、溶血或污染的标本原则上不能使用，必须重新采集标本。若无法重新采集标本，必须在室主管批准下使用，在检测结果中应该注明该份标本的情况。冰冻的标本待全部融化后必须充分摇匀。,二.质量控制(QC),(三)质量控制 1.试剂盒内部对照 试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性，但不能作为室内质控

26、品使用。每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。内部对照结果无效，必须重新试验。2.室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的23倍为宜。外部质控品的作用是，判断该批临床样品检测的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。室内质控品可以是商品或实验室自行制备。,室内质控品的使用和质量要求 每一次实验必须使用室内质控品，以便监控实验的重复性。同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异。室内质控品的管间或瓶间变异必

27、须小于监测系统预期的变异(cv20%)，并且质控品应稳定、无菌，且不含有影响试剂反应的防腐剂。,二.质量控制(QC),二.质量控制(QC),HIV抗体检测质控图的建立及应用最常用的质控图是Levey-Jennings质控图，该图使用累计和技术或趋势分析技术的图形提供系统偏移和漂移的状况。建立质控图参数（1）算术平均值（）：代表一组质控血清测定的S/CO值的均值。为了统计学上有显著性意义，应该采用至少20次（天）所测得的外部对照质控血清S/CO值结果计算出平均值。,（2）标准差（s）：是描述样品与均数之间离散程度的一个指标，是与质控血清S/CO值均值有关的预期范围。一组S/CO值的标准差以s表示

28、。（3）变异系数（cv）：是反映各次S/CO值相对于均值离散程度的一个指标，可以用来衡量检测的重复性或精密度。（4）控制限：由实验室根据对外部质控品检测结果的均值和标准差来确定。例如12S质控规则的控制限为外部质控品S/CO均值加减2个标准差；13S质控规则的控制限为外部质控品S/CO均值加减3个标准差。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),二.质量控制(QC),绘制质控图 质控图是把检测数据与计算出的“控制限”进行比较的图，包含一条中心横线和其上、下两条平行的控制线，并按时间顺序点入本实验室每批次试验质控血清的测定值

29、。质控图绘制步骤包括：,HIV抗体检测质控图的建立及应用,（1）在常规条件下，对同一批血清连续测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值，求均数（-）和标准差（s）,超出2s或3s的数据不应删除。（2）将均值（-）和标准差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次试验作横座标（x轴），绘制质控图。（3）从第21次起，将每次质控血清的检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),质控规则及其使用 实验室在报告实验结果之前必须评价质控数据，可通过图形记录的检查或由计算机审核结果来决定。目前有许多质控规则，常

30、用的是12S和13S规则。（1）告警（12S）：当外部质控品的S/CO值超出x2s范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),（2）失控（13S）：当外部质控品的S/CO值超出x3s范围时，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部质控品 稳定性下降所致。（3）漂移：连续几次（35次）外部质控品的S/CO值都落在均值的一侧则称为漂移，提示实验条件发生了较大的变化。（4）趋势：连续几次（57次）外部质控品的S/CO值几乎按一个方

31、向分布时称为趋势，通常由参数的缓慢改变引起。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，即具有高的检出分析误差的能力，同时应具有较低的假失控概率。考察试验系统的可靠性应采用多规则质控方案，多规则质控方法能提高误差检出，并具有低的假失控概率。其要点为：出现一次2s范围的变化时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),二.质量控制(QC),出现下列情况时，应暂停检测查找原因：（1）出现一次超出3s范围的变化；（2）连续两次出现同一方向超出2s范围的变化；（3）连续四次

32、出现同一方向的超出1s范围的变化；（4）连续10次结果都在1s范围内，但落在均值线的同一侧。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),质控图的分析及失控处理实验室应建立质控图分析及失控情况处理程序。当质控已有计划并恰当地执行时，要求可靠的均值和标准差用于计算质控限，将假失控概率降到最低。当出现失控时，对原有外部质控品重复测定或更换新的外部质控品进行测定不是最有效的方法，必须找出问题发生的原因，找出解除问题的方法，并消除原因，防止将来出现同样的问题。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,绘制和分析质控图的要点:（1）分析数据时，超出2s或3s的数据不应删除。（2）由专人负责建立质控

33、图，每月定期召开质控分析会，讨论本月的质量控制情况。（3）建议长期和稳定地使用一种质量好的试剂，更换不同厂家的试剂后，须重新绘制质控图。改用新批号试剂如外部质控品测定出现较大变化也应重新制作质控图。使用新批号或不同厂家的试剂,必须在质控图上注明使用日期。（4）发现质控结果失控，应填写报告单，上交质量负责人，分析原因并决定是否发出检测报告。（5）使用新批次的外部质控品时，如测定值出现较大变化，须重新绘制质控图。变异系数（cv）小于20，表示外部质控品处于稳定状态。,HIV抗体检测质控图的建立及应用,二.质量控制(QC),“即刻法”质控方法是在对同一批外部质控血清连续测定3次后，即可对第3次检验结

34、果进行质控。具体计算方法如下：,质控其他方式“即刻法”质控,二.质量控制(QC),“即刻法”质控,4、将SI上限、SI下限与SI值表中的数字比较。,“即刻法”质控,（1）当SI上限和SI下限 n3s值时说明该值已在3s范围之外，属“失控”。“即刻法”只能在前20次内使用，超出即可采用L-J质控图方法。,“即刻法”质控,二.质量控制(QC),快速检测质控试剂内对照在质控窗口内出现质控带，该质控带是试剂自带的内部过程质控，说明实验操作全部完成并且实验所用材料处于工作状态。清洁的检测区背景是内部阴性过程质控。如实验完成后未呈现红色质控带，说明试剂盒内质控无效，该试验结果无效，样品须重检。外部质控品对

35、照外部对照质控品，可采用商用质控品或自制质控品。质控品应包含抗体阳性样品和阴性样品。自制质控品可使用本室保留的阳性样品。不能使用酶联试验的外部质控品。下列情况需做质量控制：更换试剂批号；更换检测人员；更换包装；每个检测日；更换试剂厂家。,二.质量控制(QC),出现以下问题，提示存在质量隐患，应引起重视：运输包装、内盒或试剂盒的物理损伤；在单包装内存在混杂物质；标签出现错误、缺失或字迹模糊（特别是产品名称或出产厂家名称，批号和货号，失效期或/和生产日期）；缺失目录；泄漏或污染；不适宜的存放条件；保护包装纸破损或污染；未达到质量控制标准（阳性/阴性控制结果以及质控条带出现与否等标志）。除上述情况以

36、外，建议：每个检测日检测一次阳性和阴性质控品；如果日检测量大于50份样品，至少应作2次质控。,三、质量评价（一）定义内部质量评价内部质量评价指由本实验室组织的质量评价，实验室应定期组织内部质量评价，应包括样品接收、检测、保存至发出检测报告的各个环节。外部质量评价外部质量评价由本实验室之外的机构或单位组织，包括对质量保证和质量控制工作的评价，职能工作考核主要是评价实验室质量保证工作，能力验证（PT）或室间质量评价主要是评价实验室质量控制工作，是检验实验室对未知样品获得正确结果的能力。所有艾滋病检测实验室必须参加外部质量评价，确证中心实验室应参加国家级职能工作考核和PT，确证实验室应参加省级职能工

37、作考核和国家级PT，筛查实验室应参加省级职能工作考核和PT。开展快速检测的确证实验室须参加中国CDC组织的检测能力验证，开展快速检测的筛查实验室及检测点须参加省级或地市级CDC组织的实验室能力验证。,(二)目的 质量评价用于评价质量保证体系的效果，其目的在于帮助发现其质控与质保系统有无问题。各实验室可根据上一级提供的质评检验报告的结果，检查其质量控制状况。(三)频度：每年对实验室进行一次考核。(四)方式：考核采取问卷调查和盲样相结合的方式进行。,（1）问卷调查1）考核至少应包括以下内容：人员培训及能力，环境条件，仪器设备使用及校准，管理性文件及试验纪录，检测报告，试剂使用情况，样品接受及保存情况，质量保证和质量控制。2）考核结果判定：接到调查问卷后，根据评分标准对各实验室的问卷进行汇总、统计、分析和评估。并进行评分和评价：90分以上为优秀，8090分为良好，6080分为合格，60分以下为不合格。,（2）质量评价参比标本（盲样）1.质量评价参比标本由经确认试剂确证的HIV抗体阳性、弱阳性和阴性三种血清/血浆所组成。2.质量评价参比标本血清/血浆应清亮、不溶血、无菌和无过多的脂质。3.质量评价参比标本经加热灭活并加防腐剂处理。4.质量评价参比标本等量分装后在-20或-70冷冻储存，专人保管和记录使用情况。,Thanks!,