病毒鉴定的方法-科四第5组.ppt
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1、病毒鉴定的方法,12科四第五组:黄昭媛 万 敏 李晓塽 陈泽群,病毒的检测手段和方法在不断发展和改进,但无论是什么样的方法,病毒所共有的两个特性而发展起来的:一是病毒的侵染性。二是病毒作为核蛋白的特性,也就是病毒理化性质。,病毒鉴定的方法:,1、电子显微镜检测法2、电镜复染检测法3、免疫电镜检测法4、血清学检测法5、酶标免疫吸附法6、基因检测技术7、蛋白指纹图谱,1、电子显微镜检测法 电子显微镜技术是最直接,最准确的检测病毒的手段,它可以直接看到病毒的形态结构、存在与否,所以在进入了分子水平的今天它仍然有着不可替代的作用。原理:电子显微镜以电磁波为光源,将感病植物组织制成检测样本,利用短波电子
2、流,在电子显微镜下观察,可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种类。,返回,2、电镜负染检测法 电镜负染技术是20世纪60年代开始使用于英国试验室,其图像如同一张照相的底片,因此人们习惯地称为负染色,电镜负染技术也就由此而生。原理:一些重金属离子能绕核蛋白体四周沉淀下来,形成一个黑暗的背景,在核蛋白体内部不能沉积而形成一个清晰的亮区,由此辨别病毒。,返回,3、免疫电镜检测法 免疫电镜技术是将免疫学原理与电镜负染技术相结合的产物,在电镜制样过程中,于铜网上先铺展一层细胞色素A,稍后再添加一滴抗体,多余液滴用滤纸吸掉,最后点上一滴抗原和染液,由于细胞色素A的作用,减少了样品
3、即抗体、抗原的表面能力,能形成均匀的涂层。原理:在电镜制样过程中,病毒颗粒不能集中的沉积在有效的电镜视野内,而容易造成电镜观察时的疏漏,免疫电镜法利用了抗体、抗原的亲和性与吸附性的这一特点,使病毒能较集中地沉集在有效视野内,从而便于电镜下的观察,提高了检测几率。,返回,4、血清学检测法 动物受其致病细菌、病毒侵染后,动物体内血液中的球蛋白发生变化而产生抗体,引起动物产生抗体的物质简称为抗血清。由于不同病毒产生的抗血清都有各自的特性,因此可以用已知病毒的抗血清来鉴定病毒种类。原理:病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白是一种很好的抗原,血清中的抗体能与同系的抗原在体外特异的结合,使抗原失去活力。,返回
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