生化实验课件酶切实验-7年制.ppt

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DNA限制性内切酶双酶切分析,原 理,限制性内切酶是一类具有严格识别位点，并在识别位点内或者附近切割双链DNA的脱氧核糖核酸酶。,BamH,+,Hind,+,平端切口,粘端切口,Xba I:TCTAGA AGATCT,Sal I:GTCGAC CAGCTG,实验步骤,10Cutsmart Buffer 2 l质粒DNA 1 lXba 1 lSal 1 lH2O 15 l,20 l,37水浴酶切2小时。1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。,NE buffer(pH 7.9)150 mM NaCl10 mM Tris-HCl10 mM MgCl21 mM DTT 二硫苏糖醇,基因组DNA加样TE溶解液 10ul6 x loading buffer 2ulDNA染料 1ul,质粒酶切体系加样酶切体系 20ul6 x loading buffer 4ul,