科研与实践及传写论.ppt

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1、检验、科研与实践,一、科研与实践若干问题,（一）科研经费申请的途径（二）科研中应注意的几个问题（三）关于检验（实验）防护问题（四）发现问题注意寻找原因（有时实验中还需要设计一些小实验）（五）如何看科研成果,（一）科研经费申请的途径,1、卫生局2、市科委3、省卫生厅4、省科委（自然基金、其它）5、卫生部6、国家自然科学基金7、863计划8、973计划9、其它（人事部、人事厅、教委、药品等）,（二）科研中应注意的几个问题,尊重科研结果（如阳性、阴性，阴性不一定没有意义，目前这方面问题较大，即使中华杂志也有。）目标一旦确定，要“疯狂”追求下去，“疯狂”追求但决不搞僵化。实例如下：要善于抓住偶发现象（

2、例1、2）,DNA双螺旋结构模型的建立,1953年4月5日自然杂志同时刊出两篇关于DNA研究的重要论文：,实例,沃森、克里克关于DNA螺旋结构 的研究 维尔金斯、富兰克琳关于DNA结晶的 X-射线衍射研究,当时几个人决定对DNA结构采用两种路线进行互补研究,维尔金斯等用X-射线衍射法求取DNA 单晶结构，以客观检测为主要手段。沃森等另辟其径，采用建立数理模型的方法对概念系统做抽象把握。,善于迂回、拼而不僵,当时提出14股学说，但错误地排除了2股和4股学说，开始建立了3股模型；3股失败，一度灰心，沃森经鲍林鼓舞后又确定了单股模型，结果又失败；关键时刻富兰克琳提供照片后受到启发，建立了双螺旋结构，

3、结果成功。,研究背景,1、沃森 25岁 克里克 37岁 维尔金斯 37岁 富兰克琳 33岁 2、项目仅仅用了18个月（1.5年）3、1958年富兰克琳去世，1962年3位幸存 者共同获奖。,（三）关于检验（实验）防护问题（四）发现问题注意寻找原因（有时实验中还需要设计一些小实验）（五）如何看科研成果,二、科研立项,1、立项的着手点：（1）灵感（2）论文中的问题（3）系列研究中所得出的问题（4）创新性课题 经过一系列研究，提出新的观点 首次创新,2、项目的类型（1）临床病例性研究（个例、大样本）（2）实验性研究 低难度项目，例如用ELISA法检 测一个指标，目前意义不大。中、高难度项目（3）方式

4、：回顾性研究；前瞻性研究。,3、如何评价一个科研项目的水平,实验难度实验意义 实验前景,意义更大,ESR-TNF：（1）血清TNF水平与ESR的相关性（2）不同计量TNF对ESR的体外调控研究（3）rTNFR及抗TNF对TNF的阻断,4、有时实验并不需要太高级的仪器设备,0pg TNF 50pg TNF 100pg TNF 500pgTNF 1000pg TNF,皮内注射,组胺+西咪替丁+苯海拉明,组胺+西咪替丁,组胺+苯海拉明,组胺,盐水对照,免疫组化,染色阴性 胞核染色阳性 胞浆染色阳性,弱阳性（+）阳性（+）强阳性（+）,5、关于系列性项目,（1）一般系列如限于高血压（意义不大）（2）经

5、典系列如对表皮细胞角蛋白研究、T细胞活化机理研究。（意义非常大）（3）横向系列如对角蛋白基因研究，有 可能涉及几十个遗传性疾病。（4）纵向系列例如我们正在进行的实验。,6、查阅资料,目前检索资料的特点,7、实验设计及构思过程（讲座重点）,实例（近年来我们对银屑病的一些研究观点、过程及展望）综合结果 提出问题（一个课题切入点可能有多个，我们着手点是因果关系，跨度大。）,（1）1990-1998年：对银屑病进行一些探讨性研究，主要为细胞因子测定，意义不大。（2）1998-2000年：将今后课题明确定为“T细胞在银屑病发病中的作用研究”，重点研究T细胞活化部位与TNF-及IL-8等的关系。从该期开始

6、，我们的课题虽也有微观研究，但重点在因果关系的研究（跨度大），通过上述研究初步证实两方面的问题：T细胞活化的部位；与TNF-及IL-8等的关系.,（3）2001-2003年：因先期T细胞作用已显得非常重要，结合国外T细胞在SCID 鼠的研究，即银屑病T细胞小鼠皮下注射诱发银屑病，2001-2003年，在上述研究基础上，我们又提出如下设想：如果将银屑病患者T细胞与正常人皮肤共培养，结果会如何？我们通过共培养后，进行了三方面的观察：A、表皮增殖调控基因 B、表皮通过时间 C、T细胞活化的特异性,通过上述研究，相应明确了：A、银屑病患者T细胞可导致正常人皮 肤调控基因表达异常 B、银屑病患者T细胞可

7、导致正常人表 皮通过时间延长 C、银屑病患者T细胞活性与超抗原刺 激后的正常人T细胞活性不同,由于上述研究是将T细胞与表皮细胞共培养，定量较差，同时T细胞又分几个亚型，所以之后又进一步设想，如果将T细胞分类后进行研究，从而观察究竟是哪种T细胞的作用，即：A、CD3+T细胞与KC共培养 B、CD4+T细胞与KC共培养 C、CD8+T细胞与KC共培养（观察Ki67等变化）通过系列研究，初步明确所有T细胞均可导致增殖调控基因异常，但作用程度不同，CD4+T细胞作用最强，其次为CD8+T细胞。,经过2001-2003年的一系列研究，我们认为表皮增殖过快，可能是由于T细胞到达皮肤后通过复杂的细胞因子网络

8、的作用，首先引起表皮增殖调控基因表达异常，之后可能才发生表皮通过时间缩短。即：T细胞可能是KC增殖过快的主要介质。通过这一阶段的研究，接下来的研究将有两个途径：1、进一步弄清T细胞与表皮之间的关系。2、另一个途径：揭示银屑病患者T细胞活性异常的根源。,（4）2003年以后 在我们的研究基础上，结合国外研究成果，拟对银屑病概念进行更新，2003年底我们首次系统地提出了银屑病发病的全新观点：骨髓银屑病的发病中枢。中华皮肤科杂志（专论）中国皮肤病性病学杂志（2004年第8期）Journal of Investigative Dermatology.为了证实这一观点，从2003年开始，我们又进行了新的研究，构建两个创新性研究平台，即：A、骨髓移植构建银屑病动物模型 B、银屑病患者骨髓CD34+细胞体外定向分化 的T细胞功能研究,实例：具体路线图,三、如何撰写论文,1、命题及注意事项2、目的3、材料与方法4、结果5、讨论6、参考文献,