离体蛙类心脏灌注及药物的影响.ppt

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1、1,第六次实验,离体蛙类心脏灌注及药物的影响,1,实验原理,注意事项,实验后处理,实验步骤,实验目的,主要内容,1,制备离体蛙心,取蛙，破坏脑和脊髓 剪开胸腔和心包膜，辨认蛙心结构 结扎右主动脉，结扎静脉（避开静脉窦）左主动脉处结扎、切口、插管、固定、剪断，蛙心离体,实验步骤：,1,连接实验装置,实验装置参数设置,给予处理因素,1,离子影响：0.65%NaCl；2%CaCl2；1%KCl递质影响：1:10000NA；1:100000Ach；1:2000阿托品+1:100000Ach药物影响：0.025%毒毛旋花子甙K温度影响：4林格液酸碱影响：2.5%NaHCO3；3%乳酸+2.5%NaHCO

2、3,1,记录正常收缩曲线幅 度：心脏收缩的强弱疏密度：心搏频率规律性：心搏的节律性基 线：心室舒张的程度,记录,1,制备离体蛙心标本不要伤及静脉窦；插管 插入左心室后要及时将血液吸出，以防堵塞。,2.保持蛙心的活性，注意滴加林格液。,3.每次换液时蛙心内的液面应保持大致相 同的高度(负荷相同)。,4.吸管要分开使用。,注意事项：,1,5.加药时先加1滴，出现效应后应及时更换 为林格液。,6.每次施加处理因素前应先记录一端正常曲 线，做好标记，要有恢复曲线。,7.注意保护换能器，不要过度牵拉，液体不 要滴在上面。,1,1.截取各种处理因素具有代表性的蛙心收缩 曲线，制成单页图打印出来。,2.分析

3、各处理因素对蛙心收缩曲线影响及其 原理，写出实验报告。,实验结果处理,1,1,0.65%NaCl渗透压与林格液相同但缺K+,Ca2+Ca2+减少，收缩力减弱 K+减少，膜对K+通透性降低，静息电位绝 对值减少 K+外流减少，Na+内流增加，4期If增强,1.等量 0.65%NaCl,收缩力减弱，心率加快,1,胞外Ca2+浓度升高，内流增多，心肌收缩力增加，幅度增大；但胞内Ca2+过多，肌钙蛋白与Ca2+结合不能解离发生，导致心肌舒张不完全，严重者可发生钙僵，图中表现为收缩曲线上移。Ca2+浓度升高，抑制Na+内流,2.2%CaCl2,收缩力增加，心率减慢,1,胞外K+浓度升高，Ca2+内流减少

4、（竞争）胞外K+浓度升高，静息电位绝对值减少，低于-55-60mV时，快Na通透失活，兴奋性下降，心率减慢，甚至停止在舒张期,3.1%KCl，,收缩力减弱，心率减慢,1,NA与心肌受体结合后，激活AC,Ca2+通道开放增加，正性变力、变时、变传导,4.NA,收缩力增加，心率加快,1,Ach与心肌细胞膜上M-R结合，抑制AC，抑制钙通道，同时激活GK蛋白，K+外流增加，负性变力、变时、变传导,5.Ach,收缩力减弱，心率减慢,1,阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用；再加入Ach，由于阿托品已将M胆碱受体阻断，故Ach无作用。,6.阿托品+Ach，

5、,无明显变化,1,抑制Na+-K+ATP酶使细胞内Na+量升高，K+下降，胞内Na+升高，可促进细胞内外Na+-Ca2+交换,使细胞内Ca2+增多，从而加强心肌细胞收缩力。（毒K的作用有赖于胞外 Ca2+的存在）,7.毒K,收缩力增加,1,温度过低时，肌凝蛋白头部ATP酶活性降低酶活性降低，代谢水平降低，各离子通道蛋白活性降低，心脏收缩活动减弱，心率减慢。,8.4冷林格液,收缩力减弱，心率减慢,1,NaHCO3可使细胞内H+外逸，与胞外K+进行H+-K+交换，K+外流减少，细胞的膜电位减小甚至兴奋性完全丧失。另外，NaHCO3也使林格液中游离的Ca2+浓度降低（如形成CaCO3沉淀），内流Ca

6、2+减少，心肌收缩力降低。,9.2.5%NaHCO3,收缩力减弱,1,H+可竞争性抑制Ca2+与肌钙蛋白结合亚单位的结合，使肌凝球蛋白ATP酶活性降低;H+使钙从肌浆网释放量减少,抑制Ca2+释放;胞外H+升高还能降低钙通道的活性，使Ca2+内流降低，心脏的收缩活动减弱。加入 NaHCO3后中和酸，心脏活性逐渐恢复。,10.乳酸,收缩力降低，再加入NaHCO3,逐渐恢复,1,下次内容,家兔呼吸运动的调节,呼吸节律的形成,呼吸运动的调节方式,实验步骤、注意事项,实验结果的处理、打印、分析,1,心室,左心房,右心房,动脉圆锥,左主动脉 弓,右主动脉 弓,1,背 面,静脉窦,后腔静脉,右前腔静 脉,左前腔静 脉,1,心室,左心房,右心房,动脉圆锥,左主动脉 弓,右主动脉 弓,1,1,表：Medlab系统实验配置参数,