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1、病毒的基本形状,2016-4-1,2023/10/16,1,什么是病毒?病毒是一类体积微小、结构简单、只含有一种类型的核酸、严格细胞内寄生的、对抗生素不敏感,而对干扰素敏感的非细胞型微生物。病毒体:具有一定形态结构和感染性的完整病毒颗粒。,2023/10/16,2,3000BC,埃及孟非思壁画中长老患小儿麻痹症。,2023/10/16,3,1、1892年,俄国学者伊凡诺夫斯基发现烟草花叶病原体能 通过细菌滤器,并定名为滤过性病原。2、1898年,荷兰学者Beijerinck命名此种病原体为病毒。3、1898年,德国学者Loeffler和Frosch发现了口蹄疫病 毒,揭开动物病毒学新篇章。4、
2、十年后,相继发现了鸡瘟病毒(1900年)、黄热病毒(1901年)、鸡痘病毒(1902年)、狂犬病病毒(1903 年)、鸡白细胞增生病病毒(1908年)、细菌病毒-噬 菌体(1915、1917年)等。,病毒的发现,2023/10/16,4,病毒与其他微生物的比较,2023/10/16,5,病毒性疾病的现状及特点,传播性广,占传染病的80。病死率高持续感染与肿瘤发病有关,2023/10/16,6,葡萄球菌(1000nm),牛痘病毒300250nm,A,B,C,D,E,F,G,立克次体450nm,衣原体390nm,A、大肠杆菌噬菌体(65 95nm),B、腺病毒(70nm),C、脊髓灰质炎病毒(30
3、nm),D、乙脑病毒(40nm),E、蛋白分子(10nm),F、流感病毒(100nm),G、烟草花叶病毒,病毒的大小20300nm左右,2023/10/16,7,形态:球形、杆状或丝状、砖形、子弹形、蝌蚪形等,2023/10/16,8,2023/10/16,9,2023/10/16,10,研究病毒大小形态学的方法,电子显微镜检查法 超过滤法 超速离心法 X线晶体衍射法,2023/10/16,11,病毒的结构和化学组成基本结构:nucleocapsid 辅助结构:viral envelope,2023/10/16,12,病毒体结构模式图,壳粒,衣壳,核心(核样物),核衣壳,包膜,包膜病毒,包膜子
4、粒/棘突,2023/10/16,13,化学组成病毒核酸,是病毒中心结构一种类型核酸存在:或差别显著:3b400b形状:线性/环状 単链/双链/分阶段 功能:病毒增殖、遗传变异 决定病毒的特性 部分具有感染性,2023/10/16,14,化学组成病毒蛋白质(70%)结构蛋白:衣壳capsid,胞膜envelope protein 非结构蛋白:DNA聚合酶 逆转录酶等 酶:与病毒复制有关的酶;与致病有关的酶;调控蛋白:HIV Tat,rev etc,2023/10/16,15,2023/10/16,16,化学组成病毒脂类和糖类,糖类 糖蛋白 包膜,脂类,磷脂胆固醇 包膜 中性脂肪,病毒衣壳病毒20
5、面体立体对称模式图,病毒衣壳病毒的壳粒数目和排列不同。根据壳粒的排列方式包括:20面体立体对称/螺旋对称/复合对称,(12个顶角30个棱边),2023/10/16,17,2023/10/16,18,20面体Icosahedral symmetry,腺V 触须样纤维,2023/10/16,19,病毒衣壳螺旋对称模式图,流感V,2023/10/16,20,病毒衣壳复合对称模式图,2023/10/16,21,病毒衣壳电镜照片,2023/10/16,22,衣壳的主要功能:保护病毒核酸 参与感染过程 具有抗原性,2023/10/16,23,病毒包膜:包绕在病毒衣壳外面双层膜。蛋白质/多糖/脂类;有些病毒
6、胞膜表面有突起,称为棘突如HA/NA,赋予病毒特殊功能。有胞膜病毒对脂溶剂敏感。,2023/10/16,24,包膜的主要功能:维护病毒体结构的完整性 与病毒入侵感染有关 具有抗原性,2023/10/16,25,病毒的增殖,吸附(Adsorption)穿入(Penetration)脱壳(Uncoating)生物合成(Biosynthesis)装配与释放(Assembly and Release),virus replication circle:,2023/10/16,26,2023/10/16,27,病毒复制周期,吸附Adsorption(几分至几十分钟),2023/10/16,28,静电:非
7、特异可逆,与Na+Mg2+Ca2+受体:特异不可逆,2023/10/16,29,几种常见病毒配体与宿主细胞的受体,穿入Penetration,融合-有包膜病毒胞饮-无包膜病毒核酸直接穿入-噬菌体,在溶酶体酶作用下脱壳。病毒产生脱壳酶流感V在壳内转录,脱壳Uncoating,2023/10/16,30,生物合成Biosynthesis(隐蔽期电镜血清学方法查不到V),6大类型:双链DNA病毒 单链DNA病毒 单正链RNA病毒 单负链RNA病毒 双链RNA病毒 逆转录病毒,2023/10/16,31,dsDNA病毒复制示意图,亲代DNA mRNA 早期蛋白(DNA多聚酶)子代DNA 子代mRNA
8、晚期蛋白(结构蛋白)核合成DNA 子代病毒胞质合成蛋白,痘病毒除外半保留复制,2023/10/16,32,RNA聚合酶,単链DNA病毒(ssDNA)DNA聚合酶亲代DNA 中间体(dsDNA)解链 新合成互补链复制子代 ssDNA,2023/10/16,33,单正链RNA=mRNA 非结构蛋白(RNA聚合酶)中间复制体 RNA 正链翻译晚期蛋白 负链复制子代核酸单负链RNA 正链 RNA 中间复制体(依赖RNA的RNA多聚酶),正链复制子代核酸,蛋白,RNA病毒复制示意图,2023/10/16,34,dsRNA病毒复制 RNA聚合酶dsRNA 转录mRNA 早期蛋-sRNA+RNA-RNA仅由
9、负链复制+RNA,再由+RNA复制出新的-RNA,子代RNA全部新合成,2023/10/16,35,逆转录病毒复制示意图,RNA:DNA,RNA酶H,DNA聚合酶,双链,+dsRNA,2023/10/16,36,RNA,2023/10/16,37,释放裂解(Disintegration):naked virus cause the host cell lysis出芽(Budding):enveloped viruses,装配区域:DNA病毒 核内(除痘病毒)RNA病毒 胞质(除流感病毒),组装,2023/10/16,38,缺陷病毒:因病毒基因组不完整或基因发生改变,而不能进行正常增殖所产生的子
10、代病毒。辅助病毒:可以辅助缺陷病毒完成正常增殖的病毒。顿挫感染:病毒进入宿主细胞后,如细胞不能为病毒增 殖提供所需要的酶、能量及必要的成分则病 毒在细胞中不能合成本身的成分,称为顿 挫感染。非容纳细胞/容纳细胞。干扰现象:两种病毒感染同一种细胞,常发生一种病毒 抑制另一种病毒复制的现象,称干扰现象。机制:IFN、受体、缺陷干扰颗粒(DIP)。,与病毒增殖有关的异常现象,2023/10/16,39,病毒遗传变异,基因突变条件致死性突变株:如温度敏感突变株ts,2835可增殖,而3740不能增殖,具有减低毒力而保持免疫原性的特点。脊髓灰质炎病毒疫苗 宿主范围突变株:病毒基因组改变影响了对宿主细胞的
11、感染范围,可感染野生型病毒所不能感染的细胞。狂犬病疫苗;流感病毒基因分析缺陷型干扰突变株:碱基缺失引起突变,核酸较正常病毒少或结构重排。耐药突变株:靶酶基因改变 对药物产生耐药,2023/10/16,40,基因重组与重配,基因重组:两病毒的基因组发生互换,产生具有两个亲代病毒特性的子代病毒,并能继续增殖。活V+活V活V+死V 交叉复活死V+死V+多重复活,基因重组,基因重配,2023/10/16,41,基因整合,病毒基因DNA插入到宿主细胞DNA中 病毒基因变异 DNA 宿主细胞癌变,2023/10/16,42,互补作用 当两株病毒感染同一细胞时,有其中一个病毒株提供另一个病毒增殖所必须而不能
12、生成的基因产物,使后者能增殖。表型混合 一种病毒的衣壳或包膜可以包在另一种病毒体的核酸外面,称为表型混合。多倍体 有些病毒的不同株同时感染同一细胞,许多基因组的子代病毒常是多倍体。,基因产物的相互作用,2023/10/16,43,表型混合和核壳转移,2023/10/16,44,灭活 inactivation保存病毒,1.温度:5660 C30min 灭活2.pH:59 稳定3.射线:X,UV 灭活,物理因素,理化因素对病毒影响,目的,2023/10/16,45,1.脂溶剂和去污剂(乙醚实验)2.酚类、醛类和醇类(甲醛灭活制疫苗)3.氧化剂、卤素及其他化合物4.抗生素和干扰素,化 学 因 素,理
13、化因素对病毒影响,2023/10/16,46,理化因素对病毒影响,核心,衣壳,包膜,刺突,酸、碱、醛、酚、醇、温度,脂溶剂、去污剂、冻融,射线,2023/10/16,47,有些病毒(脊髓灰质炎病毒)经紫外灭活后,遇可见光可复活,不能用紫外线来制备灭活疫苗。通常用甲醛制备灭活疫苗!,2023/10/16,48,临床上用于病毒分离培养的标本:可加抗生素,避免细菌污染尽量立即接种运送:4C为宜长期保存:保护剂(50%甘油、二甲基亚砜)和70 C,2023/10/16,49,病毒分类,国际病毒分类委员会ICTV2004第八次报告:73科/289属/4000种分类依据:核酸类型结构 形状大小 衣壳对称壳粒数目 有无包膜 理化因素 抗原性 生物特性,2023/10/16,50,病毒分类73科/289属/4000种,DNA病毒,2023/10/16,51,RNA病毒,2023/10/16,52,亚病毒:一类比病毒还小的、结构更简单的微生物。包括:类病毒(植物病毒)卫星病毒(植物病毒)Prion,2023/10/16,53,最小观察要电镜,油镜可见包涵体衣壳包膜和核心,核酸类型仅单一胞内生长为复制,生物合成隐蔽期温度敏感突变株,病毒遗传与变异酸碱醛酚醇温度,耐冷怕热要注意,2023/10/16,54,谢谢!,2023/10/16,55,
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