实验六VC含量测定.ppt

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1、实验报告实验报告的格式应为：实验目的；实验原理；仪器、材料和试剂；实验步骤；结果讨论（含数理据处）；注意事项。注意：实验结果的讨论要充分，尽可能多查阅一些有关的文献和教科书，充分运用己学过的知识和生物化学原理，进行深入的探讨，勇于提出自己独到的分析和见解，并欢迎对实验提出改进意见。,实验六 Vc含量测定-2，6-二氯酚靛酚法,学习定量测定维生素C的原理和方法掌握滴定管基本操作过程,实验目的,Vc是人类营养中重要的维生素之一，绿色蔬菜和水果中含量很丰富。Vc有强的还原性，在碱性、加热并有氧化剂存在时Vc易被氧化破坏。2,6-二氯酚靛酚在碱性溶液中为蓝色，在酸性溶液中为红色，被还原后变为无色。因此

2、可用2,6-二氯酚靛酚测样品中的Vc含量，Vc可将染料还原为无色同时Vc被氧化成脱氢Vc，Vc全部被氧化后，滴入的染料使溶液呈淡粉红色。根据消耗染料的量可计算出样品中Vc的含量。,实验原理,实验仪器、试剂和材料,仪器：（1）天平（7）量筒（2）研钵（8）漏斗（3）5ml微量滴定管（9）滤布（4）50ml容量瓶(10)吸量管（5）10ml胖肚吸管（6）100ml锥形瓶,试剂：（1）1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000ml；（2）2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000ml；（3）Vc标准液：准确称10 mg Vc溶于100 ml 1%草酸中，即Vc的浓度为 0.1 mg/ml；（4）0

3、.05%的2，6-二氯酚靛酚溶液：称取2，6-二氯酚靛酚500mg，溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至1000ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内。,材料：柚子,操作步骤,1、提取Vc：称取柚子10g15g，加入15ml 2%草酸溶液，用研钵磨成匀浆。两层滤布过滤取得滤液，用少量 2%草酸溶液洗研钵几次，倒入滤渣中，合并滤液，定容至50ml。（注意：切勿过量）,2、标准液滴定：取Vc标准液4ml于100ml锥形瓶中，加6ml 1%草酸溶液，用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色。记录所染料溶液的量，计算出1ml染料溶液所能氧化Vc的量。,抗坏血酸浓度*消耗抗坏血酸体积 消

4、耗染料体积,1毫升染料氧化Vc的质量=,3、空白滴定：取10ml 1%草酸溶液放入锥形瓶中，滴定，方法同2中的操作，作为空白对照。4、样品滴定：另吸取两份10ml 样品，放入两个锥形瓶中，分别滴定，方法同2中的操作。记录染料溶液所用的体积。,结果、分析讨论,取两份10ml 样品所用染料溶液体积的平均值，代入下面公式计算100g样品中还原型Vc的含量：（V1-V2）V总M100,V3W,Vc含量(mg/100g)=,V1：为滴定样品所消耗染料溶液的平均体积V2：为滴定空白对照所消耗染料溶液体积V总：样品提取液的总体积V3：滴定时所取的样品提取液的体积M：1ml染料溶液所能氧化Vc的量（mg）W：样品的重量（g）,注意事项,1、样品提取过程避免与铜、铁接触，滴定过程要迅速，习题不超过2min，样品滴定消耗染料15ml为宜，如超出此范围，应增加或减少样品用量。2、如果样品泡沫过多，可加几滴辛醇消泡。3、样品中含有色素会干扰对终点的判断。4、本法只能测定还原型Vc，不能测出具有相同生理功能的氧化型Vc和结合型Vc。5、用2%草酸溶液制备提取液可有效抑制Vc氧化酶，而1%草酸溶液无此作用。,维生素C主要生理功能有哪些？,思考题,