实验二DNA与RNA的化学显色反应.ppt
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1、实验三核酸(DNA和RNA)的细胞核定位观察 p220,作业:,1、说明DNA和RNA的亚细胞定位在哪里?为什么?2、解释一下本实验中设立对照组的必要性是什么,三氯乙酸和丙酮各起什么作用,实验原理,Unna染色法 主要成分:甲基绿-派洛宁混合染料(碱性染料)原理:核酸是酸性的,它们对于碱性染料具有亲和力,但是DNA和 RNA对甲基绿-派洛宁混合染料的亲和力不同,而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。DNA被甲基绿染成绿色,RNA被派洛宁染成红色,这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来,“样品的固定”王金发 书 p37,目的:迅速杀死细胞,稳定细胞的化学成分,以便在后面的处理、切片时不被破坏。固定
2、使得细胞大分子交联而保持在一定位置上,不至于在后面的染色等处理过程中移位或丢失而产生人工假象。常用的固定液:(醛类:甲醛、戊二醛),Unna染色法实验步骤,撕取洋葱内表皮 小离心管Carnoy固定剂 15 min95%酒精复水5 min 70%酒精复水5 min H2O 5min 小离心管 表面皿中实验组 对照组 5%三氯乙酸(TCA)90保温,15min H2O 5min Unna 染液 20min(室温)H2O漂洗几秒后 丙酮 分色6-10Sec H2O洗片刻 水压片分别镜检观察,Unna 法,背景知识,核酸是一种线形多聚核苷酸,它的基本单位是核苷酸。细胞核内存在有两种核酸:DNA和RNA
3、,它们具有类似的化学组成,即均由含氮碱基,戊糖和磷酸组成,可表示如下:磷酸 核糖(RNA)核酸 核苷酸 戊糖 脱氧核糖(DNA)核苷 A、G、C、U(RNA)碱基(嘌呤/嘧啶)A、G、C、T(DNA),DNA是染色体的主要成分,在细胞核内呈双螺旋结构。RNA是单链线形,主要有三种类型:核糖体RNA(rRNA)转运RNA(tRNA)信使RNA(mRNA)rRNA含量大,占细胞RNA总量的80左右,是核糖体的重要组成部分,而rRNA的合成、加工和核糖体亚单位的装配都是在核仁中进行的。tRNA约占全部RNA的15,它在蛋白质生物合成过程中具有转运氨基酸的作用。mRNA的含量最少,只占5左右,它是以D
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- 关 键 词:
- 实验 DNA RNA 化学 显色 反应
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