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1、病原生物学与免疫学实验,医学院微免教研室,课程说明,主要内容:独立设置的专业选修课,由原来的病原微生物学、人体寄生虫学、医学免疫学三门课程整合优化而成,共有14个实验项目,实验类型有演示验证性项目、综合设计性项目。学时安排:32学时,实验28学时,复习考核4学时。,考核形式:考查课,分理论考核和操作考核。成绩评定:平时成绩(60%)和期末考核成绩(40%)。平时成绩中实验态度占10%,实验操作25%,实验报告25%.期末考核成绩中理论考核占15%,操作考核占25%。,实验目的与要求,病原生物学与免疫学实验是理论与实验研究的技术基础。通过实验,加深、巩固对理论内容的理解与记忆;学习、掌握有关病原
2、微生物学的基本操作技术,树立无菌观念;通过寄生虫标本的观察,熟悉常见人体寄生虫的辨认,掌握具有诊断价值的寄生虫形态特征和常见寄生虫的病原学检查方法;,学习、掌握免疫学诊断有关技术,并能应用于病原生物体的病原学诊断;更重要的是通过实验要养成实事求是的科学态度和独立分析问题与解决问题的能力。为对有关疾病的诊断与防治,为病原生物与免疫学的科学研究工作所必要的实验方法与技术打下一定的基础。,(一)实验前要做好实验预习,进实验室只带必要的文具、讲义,并穿工作服。(二)实验室内应保持清洁、安静,实验时要认真严肃,禁止抽烟、饮食、开玩笑以及玩弄手机等。,一、实 验 室 规 则,(三)爱护实验器材,注意节约实
3、验材料,实验室内任何物品不得带出室外。,(四)注意安全,若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口,应立即报告教师进行处理。,(五)实验中待培养的材料应放在培养区;实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区,不得放在桌上或冲洗于水槽内。,(六)实验完毕,桌面应整理清洁,洗手后方可离室。值日同学负责打扫实验室,并关好水、电、门窗。,实验报告基本格式,湖州师范学院病原生物学与免疫学实验 实验报告实验项目名称:*一、实验目的要求:二、实验原理:三、实验材料:四、实验方法和操作步骤:五、实验结果:六、实验结果分析和总结:,实验一,一、显微镜油镜的使用和保养二、细菌的基本形态和特殊
4、结构的观察,一、显微镜油镜的使用和保养,(一)显微镜基本知识,显微镜的构造 1.光学部分 2.机械部分,显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数=接物镜放大倍数接目镜放大倍数 2.显微镜的分辨率:是表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用公式表示为:D=0.61/nsin(/2)式中D:物镜分辨出物体两点间的最短距离。:可见光的波长(平均0.55m)n:物镜和被检标本间介质的折射率。:镜口角(即入射角)。,(一)油镜的使用和保养1、油镜头的识别 油镜头的下缘,一般刻有一白色圈,标有油 90、100、oel、oil等字样。显微镜的接物镜有低倍镜头,高倍镜头和油镜头,其中油镜头的放大倍数最
5、大。,2、油镜的原理:,当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油(其折射率1.515与玻片1.52的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。,3、油镜的使用方法1)将显微镜直立于桌上,不要扳动倾斜关节,使载物台保持水平。2)对光:用低倍镜对光,检查染色标本时光线宜强。要抬高集光器,放大光圈。3)滴加香柏油一小滴于染色标本片上,将标本置于载物台上,移置待检部分于接物镜下。,4)换用油镜,眼睛从侧面看着物镜,转动粗调节器,使镜筒下降至油镜头浸入镜油并几乎接触标本片。5)左眼看接目
6、镜,一面观察,一面缓慢转动粗调节器,使镜筒上升,直到观察到模糊的物像时(物象突然一闪),再适当转动细调节器,使物像完全清晰,即可正式观察。,1)标本观察完毕,向上转动粗调节器将镜筒提起,取下标本,用擦镜纸将镜头上的油擦净。若油已干,可用擦镜纸沾少许二甲苯擦去油迹,随即用擦镜纸擦去二甲苯。2)将物镜转成“八字形,以免损坏油镜。降低集光器,竖起反光镜,将显微镜放入镜箱。,4、油镜的保养方法,细菌的基本形态可分为球菌、杆菌、螺形菌(包括弧菌)三类。,二、细菌基本形态的观察,1球菌:如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状,常堆集成葡萄串状,呈紫色。,葡萄球菌,葡萄球菌,葡萄球菌电镜照片,肺炎球菌,肺炎球菌,链
7、 球 菌,链 球 菌,链球菌电镜照片,2杆菌:如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状,两端钝圆,散在排列。,大肠杆菌,大肠杆菌,大肠杆菌电镜照片,3螺形菌:如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形,菌体微弯,如逗点状,或呈眉毛状,散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。,弧菌,霍乱弧菌,幽门螺杆菌,幽门螺杆菌电镜照片,三、细菌特殊结构的观察:1、鞭毛 2、荚膜 3、芽胞 4、菌毛,1、鞭毛,变形杆菌(鞭毛),大肠杆菌(鞭毛),产气荚膜杆菌,肺炎链球菌,2、荚膜,肺炎链球菌(荚膜),肺炎链球菌荧光染色(荚膜),淋病奈瑟菌(荚膜),3、芽胞,破伤风杆菌(芽胞),肉毒芽胞梭菌(芽胞),炭疽芽胞梭菌(芽胞),产气荚膜芽胞梭菌(芽胞),4、菌毛,报告:1、显微镜油镜的使用和保养方法以及使用过程中的注意事项。2、请画图示意细菌的基本形态(球菌、杆菌、螺形菌)和特殊结构(鞭毛、荚膜、芽胞)。(标明:细菌名称、染色法、放 大倍数),实验报告基本格式,湖州师范学院病原生物学与免疫学实验 实验报告实验项目名称:*一、实验目的要求:二、实验原理:三、实验材料:四、实验方法和操作步骤:五、实验结果:六、实验结果分析和总结:,
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