分析室系统化研究.ppt

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1、分析室系统化研究及申报资料的撰写,2,3,4,1.撰写调研报告,1.1.参加合成室（或制剂室）组织的开题报告会 项目名称 注册类别 研究现状 上市情况 可能的合成路线（或处方工艺）专利情况,5,1.2.查阅文献,6,1.3.设计研究方案 1.3.1.起始原料、中间体研究方案,7,1.3.2.原料药研究方案1.3.2.1.理化性质,8,1.3.2.原料药研究方案1.3.2.2.鉴别 选择专属性强，灵敏度高，重现性好，操作简便、快速的鉴别方法。,9,1.3.2.原料药研究方案1.3.2.3.检查,10,1.3.2.3.检查（续表）,11,1.3.2.原料药研究方案1.3.2.3.含量测定,12,1

2、.3.3.药物制剂研究方案1.3.3.1.性状 应具体描述药品的颜色和外型，片剂如为包衣片，应除去包衣后，就片心的颜色进行描述。胶囊剂应在说明为胶丸或硬胶囊后，对内容物的颜色形状均应记述。注射液一般应为澄明液体，颜色应根据药品颜色色号相应描述，以黄色标准比色液为基准，浅于1号稀释一倍的为“无色”，介于1、2号间的为“几乎无色”，介于2、4号间为“微黄色”，介于4、6号间为“淡黄色”，介于6、8号间为“黄色”。,13,1.3.3.药物制剂研究方案1.3.3.2.鉴别制剂的鉴别试验，在设计试验方案时除尽可能采用与原料药相同方法外，还应注意以下几点：（1）制剂中均加有辅料，不宜用物理常数作为鉴别；（

3、2）某些制剂的主药含量甚微必须采用灵敏度较高、专属性较强、操作较简便的方法。（3）由于制剂中共存药物（复方制剂）和辅料的干扰，应分离除去。（4）对于含量测定采用紫外分光光度法或HPLC、GC法测定的药品，可以最大吸收波长（或特定波长下吸光度吸光度比值）及保留时间的一致性作鉴别。（5）对异构体药物制剂应有专属性强的鉴别方法。,14,1.3.3.药物制剂研究方案1.3.3.3.检查,15,1.3.3.药物制剂研究方案1.3.3.3.检查（续表）,16,1.3.3.药物制剂研究方案1.3.3.4.含量测定,17,1.4.对照品、仪器、试剂计划对于项目研究中所涉及到对照品（包括杂质对照品、重要中间体）

4、、对照制剂（国内外已上市销售的制剂），要查清生产厂家（或供应公司）、价格，计算质量研究用量，并提前做购买计划。另外对研究中所用的特殊仪器和试剂，也需提前计划。自制对照品应当在质量研究前计算用量，同时需进行相应的结构确证和质量研究工作，并制订质量标准。,18,1.5.工作计划对起始原料、中间体、质量研究、稳定性考察等研究时间进行初步安排。1.6.撰写调研报告及开题报告撰写调研报告及开题报告内容应包括：文献综述、初步研究方案、工作计划、可能遇到的困难及需相关部门提供的资料、样品等，其中开题报告需采用PPT形式。,19,2.原辅料、中间体内控质量标准的制订,2.1.起始原料 2.1.1.质量要求 起

5、始原料应质量稳定、可控，应有来源、标准和供货商的检验报告，必要时应根据制备工艺的要求建立内控标准。对由起始原料引入的杂质、异构体，必要时应进行相关的研究并提供质量控制方法；对具有手性的起始原料，应制订作为杂质的对映异构体或非对映异构体的限度，同时应对该起始原料在制备过程中可能引入的杂质有一定的了解。,20,2.1.起始原料 2.1.2.质量研究 首先按照生产厂家提供的质量标准对样品进行检验，对标准的合理性进行验证。一般厂家的标准都比较简单，有时无含量测定项或无有关物质测定项，按照厂家提供的反应原料、中间体对含量或有关物质测定方法进行研究，含量测定方法最好采用容量法，以指示剂颜色变化确定终点，同

6、时以电位滴定法对方法的可行性进行验证，如容量法不可行，可采用HPLC法；有关物质测定方法可选用TLC法、HPLC法、GC法等，研究方法同成品，需进行流动相选择、波长选择、分离度、检测限测定、破坏性、溶液稳定性等试验，并根据实际测定结果和合成工艺的需要制订合理的范围。另外按照起始原料的需要及工艺要求，增加比旋度、折光率、馏程、对映体含量等的标准。,21,2.1.起始原料 2.1.3.内控标准 一般要求对产品质量有一定影响的起始原料、试剂应制订内控标准。内控标准应重点考虑以下几个方面：（1）对名称、化学结构、理化性质要有清楚的描述；（2）要有具体的来源，包括生产厂家和简单的制备工艺；（3）提供证明

7、其含量的数据，对所含杂质情况（包含有毒溶剂）进行定量或定性的描述；（4）如果需要采用起始原料或试剂进行特殊反应，对其质量应有特别的要求，如对于必须在干燥条件下进行的反应，需要对起始原料或试剂中的水分含量进行严格的要求和控制；若起始原料为手性化合物，需要对对映异构体或非对映异构体的限度有一定的要求。,22,2.1.起始原料 2.1.4.样品检测 起始原料的内控质量标准制订好以后，对样品进行检验并发检验报告，并按“原始记录撰写要求”记录起始原料、中间体的原始记录本上。对于不符合内控标准的起始原料或试剂，应对精制后的样品重新检测并发报告。,23,2.2.中间体2.2.1.新结构的中间体一般情况下应对

8、其结构进行确证，并对理化常数、质量控制（定性、定量）进行研究。结构研究：一般应进行红外、紫外、核磁共振（碳谱、氢谱，必要时进行二维相关谱）和质谱等研究，以确证该中间体的结构。理化常数研究一般包括：熔点、沸点、比旋度、溶解度等。质量研究一般包括：性状、异构体、有关物质、含量等。,24,2.2.中间体2.2.2.已知结构的关键中间体一般情况下应对其理化常数、质量（定性、定量）进行研究，根据结构确证研究的需要，提供相应的结构研究资料。理化常数测定一般应包括：熔点、沸点、比旋度、溶解度等，并与文献报道的有关数据比较。质量控制一般包括：性状、异构体、有关物质、含量等。结构研究：如果因终产品结构确证的需要

9、，应对其结构进行确证，并应与有关的文献资料进行比较。,25,2.2.中间体2.2.3.已知结构的关键中间体一般情况下应对其理化常数进行研究，并与文献资料进行比较，同时还应对其质量进行研究，并根据结构确证研究的需要，提供相应的结构研究资料。理化常数测定一般包括：熔点、沸点、比旋度、溶解度等。质量研究一般包括：采用 TLC、HPLC、GC 等方法，对其在反应过程中进行定量或定性控制。结构研究：如果由于终产品结构确证研究的需要，应对其结构进行确证，并应与有关的文献资料进行比较。,26,2.2.中间体2.2.4.质量研究及内控标准的制订（1）熔点：根据文献数据和实际测定结果制订熔点范围；（2）折光率：

10、对于液态中间体需要检测折光率；（3）含量：最好采用容量法，如果能购买到对照品，也可采用紫外分光光度法和色谱法（HPLC法、GC法），研究方法及原始记录的撰写依照成品进行；（4）有关物质：可采用TLC法、HPLC法、GC法等；（5）光学纯度：对于有手性中心的药物，可以通过测定比旋度进行初步的控制，然后采用HPLC法对手性中间体进行异构体分离，并按照工艺需要制订合适的限度。（6）干燥失重（水分测定）：对于合成工艺中对水含量要求较高的中间体需进行该项检查。（7）其他：按照工艺路线要求及中间体的特性需要增加的特殊检验项目。要求：对于每个中间体都需进行详细质量研究，研究方法同成品，根据研究结果制订内控质

11、量标准，对中间体进行检验并发报告。所有的研究过程及研究结果都要按“原始记录撰写要求”记录在起始原料、中间体的原始记录本上。,27,2.2.中间体2.2.4.质量研究及内控标准的制订（1）熔点：根据文献数据和实际测定结果制订熔点范围；（2）折光率：对于液态中间体需要检测折光率；（3）含量：最好采用容量法，如果能购买到对照品，也可采用紫外分光光度法和色谱法（HPLC法、GC法），研究方法及原始记录的撰写依照成品进行；（4）有关物质：可采用TLC法、HPLC法、GC法等；（5）光学纯度：对于有手性中心的药物，可以通过测定比旋度进行初步的控制，然后采用HPLC法对手性中间体进行异构体分离，并按照工艺需

12、要制订合适的限度。（6）干燥失重（水分测定）：对于合成工艺中对水含量要求较高的中间体需进行该项检查。（7）其他：按照工艺路线要求及中间体的特性需要增加的特殊检验项目。要求：对于每个中间体都需进行详细质量研究，研究方法同成品，根据研究结果制订内控质量标准，对中间体进行检验并发报告。所有的研究过程及研究结果都要按“原始记录撰写要求”记录在起始原料、中间体的原始记录本上。,28,2.3.制剂原辅料的检测（1）原料：对于购买其他厂家生产的制剂用原料，需要供应商提供质量标准、检验报告等，原料进厂后，需按质量标准对原料进行全检，并按制剂工艺的要求适当增订项目。（2）辅料：对于常用的且经过质保部检验的辅料，

13、将不再对其检验。对非常用的且未经质保部检验的辅料，需供应商提供质量标准、检验报告，并按质量标准对辅料进行检验，按制剂工艺的要求对质量标准进行修订。要求：对于原辅料的质量标准（及修订后的质量标准）、检验结果、检验白报告都要详细记录在原辅料的原始记录上。,29,2.4.初步质量研究 按照设计方案对主要项目（包括熔点、溶出度、含量、含量均匀度、有关物质、光学纯度等）进行初步质量研究。如有关物质采用TLC法时，需要选择展开剂、显色剂，同时进行分离度（包括中间体、副产物、降解产物、成品的分离）试验、破坏性试验、溶液稳定性试验；而采用HPLC法时，需要确定色谱柱、流动相（对多种流动相进行选择）、检测器（检

14、测波长）、流速、样品制备方法等，采用GC法时，需要确定色谱柱、载气、检测器、升温方式、样品制备方法等，均需对方法的可行性进行验证。如对溶出度初步研究时，需要确定溶出介质、转速、检测方法等。要求：对重点检测项目都要进行细致的研究，对方法的可行性进行初步的验证，研究过程和验证资料都要详细记录在原始记录中，为今后正式质量研究打下良好的基础。,30,3.质量研究、稳定性考察及申报资料的撰写,3.1.质量研究及申报资料的撰写 3.1.1.原料药质量研究及申报资料的撰写 3.1.1.1.原料及对照品来源原料：需写明原料的生产单位及批号。对照品（包括杂质对照品）：需注明对照品的生产厂家、批号、含量、杂质（若

15、为已知杂质需注明杂质名称及含量，另外需写明最大未知杂质的含量）、光学纯度等。3.1.1.2.含量限度 根据现行版中国药典的要求及三批样品（或多批样品）的测定结果（注明测定方法，如采用非水滴定法），制订含量测定限度。一般为按干燥品（或无水物）计算含量（应写明分子式）不得少于98.5%（或98.0%、99.0%），上限一般为101.0%，如上限为102.0%，则应写为含量应为98.5%（或98.0%、99.0%）102.0%。,31,3.1.1.原料药质量研究及申报资料的撰写 3.1.1.1.原料及对照品来源原料：需写明原料的生产单位及批号。对照品（包括杂质对照品）：需注明对照品的生产厂家、批号、

16、含量、杂质（若为已知杂质需注明杂质名称及含量，另外需写明最大未知杂质的含量）、光学纯度等。3.1.1.2.含量限度 根据现行版中国药典的要求及三批样品（或多批样品）的测定结果（注明测定方法，如采用非水滴定法），制订含量测定限度。一般为按干燥品（或无水物）计算含量（应写明分子式）不得少于98.5%（或98.0%、99.0%），上限一般为101.0%，如上限为102.0%，则应写为含量应为98.5%（或98.0%、99.0%）102.0%。,32,3.1.1.3.1.外观性状对于性状中描述为“结晶性”颗粒或粉未，需使用偏振光显微镜进行检测，而不能仅仅采用目测，在申报资料中需注明仪器型号、生产厂家。

17、对颜色范围的制订需通过多批样品的测定结果。对药物的遇光变色、易吸湿（需进行引湿性试验）、风化、挥发等情况应进行如实描述。3.1.1.3.2.熔点（1）仪器：写明仪器型号及生产厂家。（2）方法及结果：按照中国药典2005年版二部附录 C测定，传温液为硅油，升温速度为1.5/分，并将试验结果列表。在结论要将熔点制订的范围进行说明，如文献依据等。,33,3.1.1.原料药质量研究及申报资料的撰写 3.1.1.3.理化常数 3.1.1.3.3.溶解度（1）试剂（列出每种试剂的名称、生产厂家、级别、批号）（2）方法及结果：根据现行版中国药典二部凡例溶解度项下的有关规定，分别称取样品细粉适量，加入不同的溶

18、剂，在25每隔5分钟振摇30秒，观察30分钟内溶解情况，测定结果列表。对产品在上述溶剂中的溶解情况进行小结。（在质量研究时可对5种以上不同极性且比较常用的溶剂或酸液、碱液进行溶解度试验，但在制订质量标准时溶剂种类一般不要超过5种。）,34,3.1.1.3.4.比旋度（1）仪器及试剂：（需写明仪器的型号、生产厂家，试剂的名称、生产厂家、级别、批号）。（2）方法与结果：写明样品的配制方法，依法测定（中国药典2005年版二部附录 E），对检验结果列表并进行小结。注：需要对比旋度限度范围提供依据，多是根据文献数据；另外最好采用不同的溶剂（在申报资料中均要列出）考察其旋光性质，并测定旋光度或比旋度。不要

19、将旋光度和比旋度混淆，旋光度的单位为“”，英文为The optical rotation；而比旋度单位为“()mldm-1g-1”，但在国内习惯将“”作为其单位，英文为The specific optical rotation。）,35,3.1.1.3.5.折光率（1）仪器：（需写明仪器的型号、生产厂家）（2）方法与结果：取本品依法（中国药典2005年版二部附录 F）测定，结果列表。（采用钠光谱的D线，除另有规定外，供试品温度为20）结论：（在结论中也需说明限度范围的选择依据。）3.1.1.3.6.相对密度（1）采用方法：注明是比重瓶法还是韦氏比重秤法（适合于测定易挥发的液体），采用比重瓶法时

20、，需写明规格（常用5、10、25或50ml），而使用韦氏比重秤时需写明仪器型号及生产厂家。（2）结果：将测得结果列表，并需说明限度范围的选择依据。注：相对密度可反映物质的纯度。纯物质的相对密度在特定条件下为不变的常数。若纯度不够，其相对密度的测定值会随着纯度的变化而改变。液体原料药应考察其相对密度。,36,3.1.1.3.7.凝点和馏程（1）方法：均要写明参照现行版药典方法。将试验过程中出现的异常现象及注意事项在资料中注明。（2）结果：将测得结果列表，并将结论放在表后。注：凝点系指一种物质由液体凝结为固体时，在短时间内停留不变的最高温度。物质的纯度变更，凝点亦随之改变。液体原料药应考察其是否具

21、有一定的凝点。某些液体药物具有一定的馏程，测定馏程可以区别或检查药物的纯杂程度。,37,3.1.1.3.8.酸值（碘值、皂化值、羟值）（1）试剂：需写明名称、生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：取本品依法（中国药典2005年版二部附录 H）测定，结果见表。（对于有特殊要求的药物需要写在资料中注明。）结论：（在结论中需说明限度范围的制订依据。）注：碘值、酸值、皂化值、羟值等是脂肪与脂肪油类药物的重要理化性质指标，在此类药物的质量研究中应进行研究。,38,3.1.1.4.鉴别3.1.1.4.1.化学鉴别（1）试剂：需写明试剂名称、生产厂家、级别、批号。（2）反应机理：对反应机理进行描述，说明由

22、于药品结构中存在的何种基团而引起的颜色、沉淀、产生气体等反应。（3）方法及结果：详细写明试验方法，必要时需进行空白试验，并将试验结果列表。在表后写上结论。,39,3.1.1.4.2.紫外鉴别（1）仪器及试剂：（需写明紫外仪器的型号、生产厂家，所使用试剂的名称、生产厂家、级别、批号），若紫外鉴别采用含量测定项下方法，此项则不用写。（2）方法与结果：写明样品的制备及检测方法，将检测结果列表，并进行小结。（3）在资料后需附上紫外扫描图。注：紫外分光光度法应规定在指定溶剂中的最大吸收波长，必要时，规定最小吸收波长；或规定几个最大吸收波长处的吸光度比值或特定波长处的吸光度，以提高鉴别的专属性。,40,3

23、.1.1.4.3.HPLC鉴别（1）仪器及试剂：（需写明HPLC仪器、色谱柱的型号、生产厂家，所使用试剂的名称、生产厂家、级别、批号）。（2）方法与结果：写明样品的制备及检测方法（包括色谱条件），将检测结果列表，并进行小结。（3）在资料后需附上HPLC鉴别图。如HPLC鉴别采用含量测定项或有关物质测定项下的方法，则仪器及试剂、色谱条件则不用重述。,41,3.1.1.4.4.TLC鉴别（1）仪器及试剂：需写明所用仪器（包括紫外灯、烘箱等）的型号、生产厂家及使用试剂（包括固定相）的名称、生产厂家、级别、批号，另外还需写明对照品的生产厂家、批号及显色剂（现行版中国药典未登录）的制备方法。对于薄层板需

24、要特殊处理的在资料中要详细说明。（2）方法与结果：写明样品、对照品的制备及检测方法（注明展开剂的比例、烘箱的温度、紫外灯的波长等），将检测结果列表，并进行小结。（3）在资料后需附上TLC鉴别图。,42,3.1.1.4.5.红外鉴别（1）仪器及试剂：（需写明红外仪器的型号、生产厂家，所使用溴化钾（或氯化钾）等试剂的名称、生产厂家、级别、批号）。（2）方法与结果：（写明样品的处理方法及测定结果，并进行小结）。如称取溴化钾约200mg于研钵中，研成细粉，加入供试品约2mg，充分混合并研成均匀的细粉，参照中国药典2005年版二部附录 C方法进行测定。注：对于通过加入溶剂或重结晶改变晶型或者通过其他方式

25、处理样品，需在申报资料中详细说明。,43,3.1.1.5.检查检查项目通常应考虑安全性、有效性和纯度三个方面的内容。药物按既定的工艺生产和正常贮藏过程中可能产生需要控制的杂质，包括工艺杂质、降解产物、异构体和残留溶剂等，因此要进行质量研究，并结合实际制订出能真实反映产品质量的杂质控制项目，以保证药品的安全有效。3.1.1.5.1.溶液的澄清度及颜色（1）试剂：需写明名称、生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：如取本品约0.5g，加甲醇25ml溶解，溶液应澄清无色；如显浑浊，与2号浊度标准液（中国药典2005年版二部附录 B）比较，不得更浓；如显色，与黄色1号标准比色液（中国药典2005年版二

26、部附录 A）比较，不得更深。将检测结果列表并进行小结。注：检查该项的溶剂应首选水，对选择其他溶剂需要在资料中进行说明依据。,44,3.1.1.5.2.pH值测定（1）仪器及试剂：（需写明酸度计的型号、生产厂家，若使用水以外的其他溶剂需注明名称、生产厂家、级别、批号）。（2）方法与结果：说明样品溶液的配制方法，并将测定结果列表。在表后进行小结，对pH值制订范围进行说明。（3）需注明测定过程中的注意事项。,45,3.1.1.5.3.干燥失重（1）仪器：需写明烘箱的型号、生产厂家。（2）方法与结果：写明烘箱（或恒温减压）干燥温度、干燥时间，对检验数据进行列表。注：如果在干燥失重过程中出现样品升华、熔

27、化或不能恒重需在资料中说明。3.1.1.5.4.水分测定（1）仪器及试剂：写明水分测定仪的的型号、生产厂家，费休氏液及溶剂（一般使用甲醇）生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：写明试验方法，对检验数据进行列表。注：如果选择甲醇以外的其他溶剂需要说明，并注明试验过程中的注意事项（如湿度等），对于含结晶水的药物通常应测定水分，再结合其他试验研究确定所含结晶水的数目，质量研究中一般应同时进行干燥失重和水分测定，并对二者结果进行比较。,46,3.1.1.5.5.炽灼残渣（1）仪器及试剂：写明马沸炉的的型号、生产厂家，硫酸的生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：写明试验方法，对检验数据进行列表。一般

28、取样品1.0g进行试验，对于氟化物需选择铂坩埚。注：应注明试验过程中的注意事项，一般化药炽灼残渣的范围不得过0.1%，若超过该限度则需进行说明。3.1.1.5.6.重金属（1）试剂：写明试剂的生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：写明试验方法（现行药典中有3种方法），对检验数据进行列表。如：取炽灼残渣项下的残渣，按照中国药典2005年版二部附录 H重金属检查第二法，依法检查。对测定结果列表。注：一般注射剂、皮肤制剂所用原料重金属的限度一般不得超过百万分之十。,47,3.1.1.5.7.异构体测定3.1.1.5.7.1.异构体名称及结构式3.1.1.5.7.2.文献资料：列出所研究项目手性分离

29、的文献，并对文献内容进行小结，按照文献初步选择试验方法。（若无文献，一般首先采用HPLC法进行试验，一方面采用手性柱直接分离，并对正相法和反相法进行比较；另一方面，可先将被测药物衍生化，再用普通色谱柱。另外还可采用毛细管电泳法等。）3.1.1.5.7.3.仪器及试剂（1）仪器：将所用重要仪器均要列出，包括HPLC仪器、天平等的型号及生产厂家。（2）试剂：将所用试剂名称、生产厂家、级别、批号均要列出。（3）对照品：写明对照品的来源、批号、含量、有关物质、光学纯度等。3.1.1.5.7.4.方法初步选择 按照文献方法及设计的方法进行逐一试验，从中初步选择一种简单、方便、分离度高的检验方法。方法一：

30、方法二：每种方法均要写明色谱条件、试验方法、试验结果。然后选择一种较好的方法进行验证。,48,3.1.1.5.7.异构体测定（续）3.1.1.5.7.5.方法验证（1）流动相选择：对三种以上的流动相进行选择；（2）检测限测定：对两种对映体检测限均要进行测定；（3）溶液稳定性试验：溶液稳定性试验需做12小时以上。（4）线性范围测定：（5）加样回收率试验：（6）检测方法：根据上述研究结果确定对映体检测方法，根据文献资料、对映体的毒副作用、实际测定结果确定限度。3.1.1.5.7.6.样品测定3.1.1.5.7.7.小结,49,3.1.1.5.8.有关物质测定 包括TLC、HPLC、GC、毛细管电泳

31、等方法，现以HPLC法为例。3.1.1.5.8.1.合成路线 将药品的合成工艺路线（包括起始原料合成路线）列出，从路线中确定起始原料（需注明生产厂家、批号）、中间体、副产物及试剂。3.1.1.5.8.2.文献资料：列出所查阅文献内容，并对文献资料进行小结，通过文献获知主要的降解产物，按照文献初步选择试验方法。（若查不到文献，则需根据药品结构设计有关物质的研究方法。）3.1.1.5.8.3.仪器及试剂（1）仪器：将所用重要仪器均要列出，包括HPLC仪器、天平等的型号及生产厂家。（2）试剂：将所用试剂名称、生产厂家、级别、批号均要列出。,50,3.1.1.5.8.有关物质测定（续二）3.1.1.5

32、.8.4.方法初步选择按照文献方法及设计的方法（需包括正相系统和反相系统）进行逐一试验，从中初步选择一种简单，方便，能使起始原料（包括起始原料合成时所用的原料、中间体）、中间体、副产物、降解产物、聚合物和成品有效分离的检测方法。波长的初选：取起始原料（包括起始原料合成路线中的反应原料、中间体）、中间体、副产物、降解产物、聚合物和成品适量，加甲醇溶解并稀释至含2050g/ml的溶液，在190600nm波长范围内扫描，综合考虑选择初始波长。然后以此波长进行下列试验：方法一：方法二：每种方法均要写明色谱条件、试验方法、试验结果。然后选择一种较好的方法进行验证。,51,3.1.1.5.8.有关物质测定

33、（续三）3.1.1.5.8.5.方法验证（1）流动相选择：按初步确定的方法对三种以上流动相选择，对的流动相进行选择（波长为初选波长），对选择结果进行列表，表中数据包括保留时间、分离度、理论板数、拖尾因子等。（2）波长选择：取起始原料（包括起始原料合成路线中的反应原料、中间体）、中间体、副产物、降解产物、聚合物和成品的混合溶液注入液相色谱仪，采用DAD检测器，通过等紫外吸收图选择各成分都有较强吸收的波长；取破坏性试验项下的溶液进行DAD检测，通过等紫外吸收图选择降解产物均有较强吸收的波长；（3）破坏性试验：取成品分别进行酸、碱、氧化、高温破坏，破坏后主成分应保留80%以上，通过外标法计算物料平衡

34、（若样品不能完全溶解，可通过将溶剂蒸干，再选择合适的溶剂溶解）。（4）溶剂干扰试验：一般采用流动相作溶剂，有时因溶解需要选用甲醇、乙腈等有机溶剂，在方法研究时需进行溶剂干扰试验。（5）检测限测定：对起始原料（包括起始原料合成路线中的反应原料、中间体）、中间体、副产物、降解产物、聚合物和成品检测限均要进行测定；,52,3.1.1.5.8.有关物质测定（续四）（6）溶液稳定性试验：溶液稳定性试验需做12小时以上。（7）耐用性：考察流动相组成、不同厂家及不同批次色谱柱、流速、柱温等的微小变化对有关物质测定的影响。（8）线性范围：对于采用对照品测定杂质时需进行线性范围测定，考察范围应为拟规定限度的20

35、%。（9）准确度（相当于回收率）：在样品中加入已知量的杂质进行测定，一般需考虑在规定的范围内，制备3个不同浓度的试样，各测定3次，共测定9次，计算已加入量回收率。（10）检测方法：根据上述研究结果确定有关物质测定的检测方法。根据文献资料、杂质的毒副作用、实际测定结果、及杂质测定技术指导原则确定限度。对于已知杂质可采用对照品法或校正因子法（已知杂质对主成分的相对响应因子在范围内时，可以用主成分的自身对照法计算含量，超出范围时，宜用杂质对照品法计算含量）。对含量较低的未知杂质可采用自身对照法。理想的有关物质测定方法为已知杂质对照品法和未知杂质不加校正因子的自身对照法。,53,3.1.1.5.8.有

36、关物质测定（续五）原料药杂质限度（技术指导原则）由于各种分析方法均具有一定的局限性，因此在进行杂质分析时，应注意不同原理的分析方法间的相互补充与验证，如 HPLC 与 TLC 及 HPLC 与 CE 的互相补充，反相 HPLC系统与正相 HPLC 系统的相互补充，HPLC 不同检测器检测结果的相互补充等。3.1.1.5.8.6.样品测定：对超过质控限度的杂质需进行详细说明，并对样品稳定性进行重点考察。3.1.1.5.8.7.小结,54,3.1.1.5.9.有机残留溶剂测定 采用气相色谱法，对“有关物质测定”项下合成路线中所使用溶剂、反应溶剂、反应副产物的检测方法进行研究。根据文献内容选择气相色

37、谱柱及了解各种溶剂的出峰顺序，溶解样品的溶剂一般选择DMF、DMAc、DMSO、水等。3.1.1.5.9.1.仪器及试剂（1）仪器：气相色谱仪、色谱柱、天平等的型号及生产厂家。（2）试剂：将所用试剂名称、生产厂家、级别、批号均要列出。3.1.1.5.9.2.方法初步选择按照文献方法及设计的方法进行逐一试验，从中初步选择一种简单，方便，分离度高的检测方法。方法一：方法二：每种方法均要写明色谱条件（特别是程序升温）、试验方法、试验结果。然后选择一种较好的方法进行验证。,55,3.1.1.5.9.有机残留溶剂测定（续）3.1.1.5.9.5.方法验证（1）分离度试验：对分离结果进行列表（内容包括：保

38、留时间、分离度、理论板数）。（2）线性范围测定：对各种溶剂均需进行线性范围测定。（3）检测限测定：信噪比3:1（4）定量限测定：信噪比10:1（5）准确度（回收率）：一般采用定量加入法来验证方法的稳定性。（6）耐用性：载气及流速、不同厂牌及批号色谱柱、担体、柱温、进样口和检测器温度等。（7）检测方法：根据上述研究结果确定残留溶剂的检测方法。按照现行版药典要求制订每种溶剂的限度。3.1.1.5.9.6.样品测定3.1.1.5.9.7.小结,56,3.1.1.6.含量测定 一般采用容量法（如非水滴定法）、UV法、HPLC法、GC法等。3.1.1.6.1.非水滴定法采用非水溶液滴定法测定样品的含量时

39、，一般采用比较简单、方便的指示剂法，以电位法确定测定终点时颜色的变化，指示剂终点颜色以电位滴定时的突跃点为准。3.1.1.6.1.1.仪器与试剂写明电位滴定计、电极等的型号及生产厂家，高氯酸、冰醋酸等试剂生产厂家、批号、级别。3.1.1.6.1.2.试验方法及结果 精密称取供试品适量，加冰醋酸（或冰醋酸-醋酐混合液）溶解，（如果是盐酸盐、溴化物等，需加入适量的醋酸汞试液），再加入萘酚苯甲醇（或结晶紫）指示液12滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L），依法进行电位滴定，观察指示剂颜色变化并记录电位变化和滴定液体积。绘制(E/V)-V和(2E/2 V)-V曲线，(2E/2 V)-V曲线过零时的滴定

40、液体积为滴定终点体积，指示剂颜色的变化为滴定终点到达时颜色的变化，同时做空白试验。滴定结果见下表，滴定曲线需附图。（需列出三个平行样的数据）,57,3.1.1.6.1.非水滴定法（续二）供试品含量测定结果(20080107-1#)含量%=99.92%,58,3.1.1.6.1.非水滴定法（续三）3.1.1.6.1.3.电位滴定法和指示剂法测定结果的比较 每种测定法各检测3个数据，对测定结果列表并进行小结。3.1.1.6.1.4.指示剂法测定含量重复性试验 取样品适量，共6份，按照含量测定方法进行滴定，根据滴定结果计算RSD%。结果列表（见表3-3）并进行小结。3.1.1.6.1.5.样品含量测

41、定 写出检测方法，并对检测结果列表。3.1.1.6.1.6.小结,59,3.1.1.6.2.UV法 根据药品的性质选择合适溶剂，一般首选水，其次可选0.1mol/L盐酸、乙醇等。3.1.1.6.2.1.仪器及试剂（1）仪器：写明UV分光光度计等仪器的型号及生产厂家。（2）试剂：写明所用试剂名称、生产厂家、级别、批号。3.1.1.6.2.2.波长选择取供试品，加适当溶剂溶解并稀释至含1050g/ml的溶液，在190600nm波长范围内扫描，一般选择最大吸收波长作为含量测定波长。3.1.1.6.2.3.检测方法3.1.1.6.2.4.方法验证（1）线性范围测定：试验方法、试验结果及结论（2）重复性

42、试验：指在同样的操作条件下，在较短时间间隔内，由同一分析人员测定所得结果的精密度。可在规定的范围内，至少用9个测定结果进行评价，如3种浓度，各测3 次，另外将试验结果列表，并进行小结。（3）中间精密度：系指在同一实验室内，由于实验条件的改变，如分析人员、时间、设备、仪器改变所测结果的精密度。将试验结果列表并进行小结。（4）重现性：指在不同实验室由不同人员所测得结果的精密度。将试验结果列表并进行小结。（5）溶液稳定性试验：试验方法、试验结果及结论3.1.1.6.2.5.样品测定3.1.1.6.2.6.小结,60,3.1.1.6.3.HPLC法 一般采用有关物质测定的色谱条件进行含量测定方法研究。

43、验证法和UV法相同，但需进行耐用性试验。,61,3.1.1.制剂质量研究及申报资料的撰写 3.1.2.1.样品及对照品来源 需提供样品的生产单位及批号。需提供对照品（包括杂质对照品）及对照制剂的生产单位及批号，另外对照品需提供含量、杂质（包括最大杂质和已知杂质）含量。3.1.2.2.含量限度 根据制剂品种剂型特点、规格及现行版药典要求制订含量限度，一般为90%110%，有时也订为93%107%、95%105%等。3.1.2.3.性状 应对制剂的外观、颜色进行描述，对胶囊等产品需对内容物的形状、颜色进行描述。如片剂应描述是什么颜色的压制片或包衣片（包薄膜衣或糖衣），除去包衣后片芯的颜色，以及片子

44、的形状，如异形片（长条形，椭圆形，三角形等）；片面有无印字或刻痕或有商标记号等也应描述。注射液一般为澄明液体（水溶液），但也有混悬液或粘稠性溶液，需注意对颜色的描述，还应考察贮藏过程中性状是否有变化。,62,3.1.2.4.鉴别 参照原料药鉴别方法进行试验，并需同时进行空白辅料及复方制剂中其他成分的干扰试验。鉴别试验一般至少采用二种以上不同类的方法，如化学法和 HPLC 法等。必要时对异构体药物应有专属性强的鉴别试验。（同原料药一样，需写明所用试剂的名称、生产厂家、批号、级别。）3.1.2.5.检查 各种制剂需进行的检查项目，除应符合相应的制剂通则中的共性规定（具体内容请参照现行版中华人民共和

45、国药典附录中制剂通则）外，还应根据其特性、工艺及稳定性考察结果，制订其他的检查项目。如口服片剂、胶囊剂除按制剂通则检查外，一般还应进行溶出度、杂质（或已知杂质）等检查；缓控释制剂、肠溶制剂、透皮吸收制剂等应进行释放度检查；小剂量制剂（主药含量低）应进行含量均匀度检查；注射剂应进行 pH 值、颜色（或溶液的颜色）、杂质（或已知杂质）检查，注射用粉末或冻干品还应检查干燥失重或水分，大体积注射液检查重金属与不溶性微粒等。,63,3.1.2.5.1.溶液的澄清度及颜色一般注射剂（粉针剂）、溶液剂需检查该项。在申报资料中需写明方法及结果，并将检测结果列表。3.1.2.5.2.pH值测定（1）仪器：需写明

46、酸度计的型号、生产厂家，若使用水以外的其他溶剂需注明名称、生产厂家、级别、批号。（2）方法与结果：说明样品溶液的检测方法，并将测定结果列表。在表后进行小结，对pH值制订范围进行说明。（3）需注明测定过程中的注意事项。,64,3.1.2.5.3.异构体 按照原料的方法进行试验，需排除空白辅料及复方制剂中其他成分的干扰。3.1.2.5.4.有关物质首先按照原料的有关物质测定方法进行试验，如果辅料对测定结果有干扰，需重新进行方法学研究，研究过程及资料撰写同原料。制剂的杂质限度：,65,3.1.2.5.5.含量均匀度 一般采用含量项下的测定方法，主要包括UV法、HPLC法等。若采用的方法和含量测定方法

47、不同，则需进行系统研究，如选择UV法测定时，则要对检测波长进行选择，然后进行方法学验证（包括线性、重复性、中间精密度、溶液稳定性等试验），对各种试验结果列表并小结。3.1.2.5.6.崩解时限（1）仪器：写明所用崩解仪的型号、生产厂家；（2）方法及结果：写明检测方法，对试验结果列表，表中数据应包括：样品的崩解时间、平均值及标准偏差。并对结果进行小结，说明试验中的异常现象和需注意的事项。3.1.2.5.7.重量差异（或装量差异）（1）仪器：写明所用天平的型号、生产厂家；（2）方法及结果：写明检测方法，对试验数据列表，并对结果小结。,66,3.1.2.5.8.溶出度（或释放度）3.1.2.5.8.

48、1.仪器及试剂（1）仪器：将所用溶出仪等仪器的型号、生产厂家列出。（2）试剂：将所用试剂名称、生产厂家、级别、批号均要列出。3.1.2.5.8.2.检测方法3.1.2.5.8.3.方法的建立（1）溶出介质选择：一般需采用水、0.1mol/L盐酸溶液、磷酸盐缓冲液（pH38）三种介质进行选择，若药品在这三种介质中溶出度均较小时，可采用加入少量的助溶剂如乙醇、吐温-80等。选择介质时一般转蓝法的转速为100转/分、浆法的转速为50转/分。将选择结果列表并进行小结。（肠溶制剂不做此项考察。）（2）转速的选择：转蓝法一般应考察在100转/分、75转/分和50转/分时的溶出情况，而浆法的转速一般应考察在

49、75转/分和50转/分时的溶出情况。对选择结果列表并小结。,67,3.1.2.5.8.溶出度（或释放度）（续）3.1.2.5.8.3.溶出度含量测定方法的建立 可以选用UV法、HPLC法、容量法等。以UV法为例：（1）紫外波长的选择（2）空白辅料的干扰试验：胶囊剂还需进行空胶囊壳试验。（3）线性范围测定（4）回收率试验：需做60%、80%、100%、120%四种浓度的回收率试验。（5）重复性试验（6）中间精密度试验（7）溶液稳定性试验3.1.2.5.8.4.溶出均一性试验需做同批样品和批间样品的溶出均一性试验，将检测数据列表并附上溶出曲线图。3.1.2.5.8.5.样品测定结果按最终确定方法测

50、定样品，将检测结果列表。3.1.2.5.8.6.小结,68,3.1.2.5.9.可见异物检查（1）仪器：列出检测仪的型号、生产厂家。（2）方法及结果：按药典方法进行检查，将检测结果列表，并进行小结。3.1.2.5.10.热原检查 在申报资料要注明溶液的制备方法，所用稀释液（如生理盐水、葡萄糖注射液等）的生产厂家、批号等也需注明，对在试验过程中家兔出现的异常情况要详细说明。,69,3.1.2.5.11.细菌内毒素检查法建立 3.1.2.5.11.1.实验材料：（1）供试品：提供样品的生产单位及批号（2）所用试剂：提供细菌内毒素工作标准品的批号、效价、厂家及稀释方法；两批鲎试剂的批号、灵敏度、厂家