食品安全快速检验技术培训.ppt
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1、食品安全快速检测技术,一、概 述,随着生活水平的提高,人们的食品安全意识越来越强。随着国家财力的增长,政府在保障百姓饮食安全上的投入越来越多。按说,社会进步了,食品应该越来越安全了,可我们看到和听到的却有许多不协调的现象与不和谐的音符,如二恶英、疯牛病、非典、苏丹红事件,农药中毒、鼠药中毒、甲醇中毒、亚硝酸盐中毒等等。也就是说,虽然社会进步了,新的问题又出现了,或原有的问题还没有得到很好的解决。世界卫生组织 一次次地向全球发出呼吁,许多国家也不断地对食品安全发出预警。在世界范围内,我国政府在此方面做出了较大的努力与贡献,不惜利用国外贷款来装备我国的监督监测队伍。各级政府也积极响应,投入大量资金
2、来加强食品安全工作。食品生产企业的自我保障意识与产品质量检测能力都在不断地加强。,(一)食品安全快速检测的必要性,食品安全快速检测的需求是多方面的,大体可从四个方面体现:1.食品在生产、储存、运输及销售等各个环节,都有可能受到污染。需要随时随地加以监控。2.在商品经济环境中,由于金钱利益的驱使以及极端思维的存在,不法分子人为的掺杂、使假以及投毒等,使食品安全存在着隐患。在当前情况下,尤其应该加强监控力度。3.当食物中毒发生时,在诸多的可疑样品中,需要快速筛选出是哪一种物质引起的中毒,加以确认后,赢得抢救伤者的时间。4.实验室的样品检测数量有限,检验周期较长,满足不了食品安全保障的需求,使用快速
3、检测方法显得尤为必要。,(二)食品安全快速检测的着重点与定义,食品安全快速检测,分为实验室快速检测与现场快速检测。实验室快速检测着重于:利用一切可以利用的仪器设备快速定性与定量。现场快速检测着重于:利用一切可以利用的手段快速定性与半定量。实验室快速检测方法定义:理化方法一般在两个小时内能够出结果的即可视为快速方法。微生物检验方法与常规方法相比,能够缩短1/2或1/3时间出据具有判断性意义结果的方法即可视为快速方法。现场快速检测方法定义:一般在30分钟内能够出结果的即可视为现场快速检测方法,如果能够在十几分钟内甚至几分钟内出具结果的即是较好的方法。,(三)实验室快速检测发展概况,朝着快速、简洁方
4、向发展:改进样品前处理方式:如气相、液相的一次性样品前处理柱,简化、加快了样品提纯方式。免去样品前处理方式:如牛乳中金属元素的测定,直接进样,原子吸收悬浮测定。探索新的样品消化方法:如液体奶蛋白质测定前的样品消解,将以往的6个小时消化缩短到30分钟等等。,(四)现场快速检测的国内外情况对比,国外食品安全现场快速检测的状况依其国力的不同而情况不同。发达国家的经济状况较好,分析仪器也较为先进,能够将实验室使用的大型仪器微型化,在突发事件发生时,将其安装在专用车中进行现场快速检测。由于仪器设备价格昂贵,耗材成本高,通常仅用于突发事件和特殊场合。常用的快速检测试剂盒、试纸、小型辅助设备等安放在专用检测
5、箱中,随时使用。我国一些单位也按此模式装备了一些车辆,起到了一定的作用。由于起步较晚,国内生产的仪器设备的完善还有一个过程。无论是国内还是国外,快速的、具有特异性的试剂、试纸的功能具有其独到之处和难以替代的作用。在此方面,我国许多科研院所做了许多的工作,而且取得了成效。,采样,阴性,阳性,进一步检测,快速检测,阴性,阳性,允许上市,禁止上市,美国、欧盟等发达国家在食品入市方面通行做法,召回处理,流通消费,注:进一步检测,是指采用标准方法或其它方法在实验室中进一步检测,二、检验技术基础知识,(一)基本原则,1.质量原则2安全原则3快速原则4可操作原则5经济原则,(二)检测技术操作的一般要求,检测
6、技术操作的一般要求规定如下。1检验方法中所采用的名词及单位制,均应该符合国家规定的标准要求2检验方法中所使用试剂均为分析纯,所使用水为纯度能满足分析要求的蒸馏水或软化水。3.检验中所用计量器具必须按国家规定及规程计量和校正.4.称取量取精度要求用数值的有效数位表示.,5.检验有关要求.(1)检验时必须做空白试验(2)检验时必须做平行试验6检验方法的选择 同一检验项目,如有两个或两个以上检验方法时,可根据不同条件选择使用但必须以国家标准(Gu)方法的第一法为仲裁方法。7采样必须注意样品的生产日期、批号、代表性和均匀性 采集的数量应能反映该食品的卫生质量和满足检验项目对样品量的需要。8一般样品在检
7、验结束后,应保留1个月,以备需要时复查,(三)样本采集与保存,需检验的批量食品,原始样本,平均样本,复检样本,试检样本,保留样本,采样基本程序,采样原则,1代表性原则2典型性原则3.适时性原则4适量性原则5.程序原则,样本保存,1要保持样本原来的状态2易变质的样本要冷藏3.特殊样本要在现场进行处理,样本制备和前处理,样本制备的一般方法 粮食、烟叶、茶叶等干燥产品:将样本全部磨碎,也可以四分法缩分,取部分样本磨碎全都通过20目筛,四分法再缩分肉食品类:切细,绞肉机反复绞三次混合均匀后缩分。蛋和蛋制品:鲜蛋去壳,蛋白和蛋黄充分混匀。皮蛋等再制蛋,去壳后,置捣碎机内捣碎成均匀的混合物,水果、蔬菜类:
8、如有泥抄,先用水洗去然后除去表面附着的水分,取食用部分,沿纵轴剖开,切成四等份,取相对的两块,切碎,混匀,取部分量于捣碎机内捣碎成均匀的混合物 花生仁、桃仁:样本用切片器切碎充分混匀,四分法缩分 中药材:根据不同品种,选择合适的粉碎方法,经粉碎后混匀。四分法缩分。,样本前处理,1.粉碎2.提取3.净化4.浓缩,三 食品安全现场快速检测,(一)食品安全现场快速检测项目分类,一、急性食物中毒物质的快速筛选和检测二、慢性伤害物质和劣质食品的快速检测三、食品加工、贮藏和运输安全度的快速测定四、微生物的快速检测,(二)急性中毒物质与慢性伤害物质的区别,急性中毒物质:是指毒性较强的物质,如毒鼠强、氟乙酰胺
9、、甲胺磷、砷、汞、氰化物、甲醇、亚硝酸盐等,当人体摄入后在几分钟或数小时即可出现中毒症状。当剂量未达到出现急性中毒症状、却长时间摄入时,会出现慢性中毒症状。慢性伤害物质:是指毒性弱一些的物质,当人体摄入达不到一定剂量时不会很快出现中毒症状,当毒性物质在人体中积累到一定程度时才显现出不良体征。,(三)急性食物中毒物质的快速检测,1 引发急性食物中毒的主要原因1.1 食物在加工、贮存或运输过程中被污染。1.2 食物在贮藏过程中腐败变质、分解产生有毒物质。1.3 食物中残留有毒物质或食物本身含有有毒物质。1.4 误食、误用有毒物质。1.5 自杀或投毒等。2 主要检测项目2.1 农药(有机磷类和氨基甲
10、酸酯类)2.2 鼠药(毒鼠强、氟乙酰胺、敌鼠钠盐、安妥、磷化锌等)2.3 亚硝酸盐2.4 甲醇2.5 砷2.6 汞2.7 氰化物2.8 酸败油脂2.9 生豆浆2.10 食用油中非食用油(桐油、大麻油、巴豆油、矿物油),(1)农药的快速测定,农药分类:按其化学结构大致可分为:有机磷类,氨基甲酸酯类,拟除虫菊酯类和有机氯类等。日常发生中毒较多的是有机磷类和氨基甲酸酯类,我国允许使用的有机磷类农药有30余种,允许使用的氨基甲酸酯类农药有10余种,一定剂量的农药可引起急性中毒,小剂量、长期摄入时引起慢性中毒。农药超标或中毒的原因:主要是农户不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用了不允许使
11、用的剧毒、高毒农药。检测方法:采用国家标准快速检验方法GB/T5009.199-2003。本方法除适合于蔬菜水果中农药残留的快速检测外,也适用于急性中毒残留物及胃内容物中残留农药的快速筛选检测。,速测卡法,提取:1份样品2份提取液震荡50次。测定:将速测卡插入仪器中,取提取液23滴于速测卡白色药片上,同时作一片空白实验,启动仪器自动运行预反应10分钟,盖上仪器盖,3分钟时仪器报警,打开仪器观察结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。白色药片略有浅蓝色为弱阳性,白色药片不变色为强阳性,。,快检方法编号:CDC/SB 101-1,(2)鼠药的快速测定,剧毒鼠药有:毒鼠强(三步倒)和
12、氟乙酰胺(一扫光)常用鼠药有:敌鼠钠盐、安妥、磷化锌等毒鼠强和氟乙酰胺的定性筛选检测常用专用试剂进行。定量检测可以采用气相或液相色谱仪实现。采用专用试剂时,可以一份样品一次性处理,检测三个项目(毒鼠强、敌鼠钠盐和安妥)从而缩短检测时间。,1.毒鼠强的快速检测,无色液体:样品不需处理。直接取2ml放入10ml比色管中,加入2滴毒鼠强显色剂,加入5ml(约115滴)毒鼠强试液,轻轻摇动后,将试管放入水浴中或放在一杯90以上的水杯中,加热35分钟取出,观察毒鼠强的颜色变化。有色液体(牛奶、饮料等)、固体(粮食、面粉、毒铒等)或半固体(呕吐物、胃内容物、剩余饭菜等):取13ml(g)放入具塞试管中,加
13、入5ml乙酸乙酯,上下振摇50次以上,静置分层或离心分层后,取1滴上清液留作敌鼠钠盐实验;取1滴上清液留作安妥实验;其余上清液置另一试管中,在855的水浴上将其蒸干,在蒸发残渣上滴2滴毒鼠强显色剂,加入5ml毒鼠强测定液,将试管放入水浴中或放在一杯90以上的水杯中,加热35分钟取出,观察毒鼠强的颜色变化。样品处理的同时作一份空白对照,即取一份已知不含毒物的样品进行同样的处理。,快检方法编号:CDC/SB 102,饮用水中较高浓度的毒鼠强左管阴性,右管阳性,牛乳中的毒鼠强左管阳性,右管阴性,2.敌鼠钠盐的快速检测,取1滴毒鼠强样品处理液于试纸上,待溶液稍干后,在滴加样品溶液处滴上1滴敌鼠钠盐显色
14、剂,如果出现砖红色斑点为敌鼠钠盐强阳性反应,如果出现红色环状为弱阳性反应。阴性为试剂本色。,左侧为阴性,右侧为阳性,快检方法编号:CDC/SB 103,3.氟乙酰胺鼠药的快速检测,样品处理:无色液体可直接测定。有颜液体,脱色、过滤后测定。样品测定:取待检液1ml左右于试管中,加1号试剂(氢氧化钠)10滴,加2号试剂(盐酸羟胺)5滴,置沸水中5分钟,取出放冷,加3号试剂(盐酸)910滴(调pH值35)后,加4号试剂(三氯化铁)310滴,阳性结果为粉红或紫红色,尤其在滴加后的液面上更为明显。,饮用水中的氟乙酰胺,牛乳中的氟乙酰胺,快检方法编号:CDC/SB 105,(3)亚硝酸盐的快速测定,意义:
15、亚硝酸盐主要指亚硝酸钠(钾),为白色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。外观及滋味都与食盐相似,并在工业、建筑业中广为使用,肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。亚硝酸盐具有较强的毒性,食入0.30.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡。急性中毒原因多为:将亚硝酸盐误作食盐、面碱等食用,以及掺杂、使假、投毒等。慢性中毒(包括癌变)原因多为饮用含亚硝酸盐量过高的井水、污水,以及长期食用含有超量亚硝酸盐的肉制品和被亚硝酸盐污染了的食品。因此,测定亚硝酸盐的含量是食品安全检测中非常重要的项目。测定:速测管中含有试剂。液体样品直接加入速测管中,固体样品取1g溶解到10ml,从中取1ml加入速测管中,比
16、色测定。,亚硝酸盐的水溶液,牛乳中的亚硝酸盐,快检方法编号:CDC/SB 106,(4)甲醇的快速测定,意义:甲醇和乙醇在色泽与味觉上没有差异,酒中微量甲醇可引起人体慢性损害,高剂量时可引起人体急性中毒。我国发生的多次酒类中毒,都是因为饮用了含有高剂量甲醇的工业酒精配制的酒或是饮用了直接用甲醇配制的酒而引起。甲醇中毒剂量的个体差异较大,有的78ml即可引起失明,30100ml可至死亡。我国发生的多次大范围酒类中毒,酒中甲醇含量在2.441.1g/100ml。国家卫生部2004年第5号公告中指出:“摄入甲醇510ml可引起中毒,30ml可致死。”如果按某一酒样甲醇含量5%计算,一次饮入100ml
17、(约二两酒),即可引起人体急性中毒。正规酒厂生产的市售酒中甲醇含量超标的情况较少,作坊式生产的酒样中甲醇含量超标的情况较多,尤其是以工业酒精配制的酒中常含有急性中毒剂量的甲醇。,1.酒醇速测仪快速检测甲醇,在环境温度20时操作方法:用玻璃浮计测定样品的酒精度数后,再用酒醇仪测定样品的酒精度,二者的差值极为甲醇浓度在环境温度非20时的操作方法:先用玻璃浮计测定样品的酒精度数,再用玻璃浮计选取一个与样品酒精度数相同的乙醇对照液,用酒醇仪分别测定二者的酒精度,如果有差值存在,其差值即为甲醇浓度。,快检方法编号:CDC/SB 107,2.甲醇速测盒快速检测甲醇,将试管插入速测盒盖上的插槽中,加入6滴样
18、品于试管中,分次加入试剂,显色后与比色卡对比定量。,快检方法编号:CDC/SB 108,0.00 0.02 0.04 0.12 0.32 甲醇含量 g/100ml,(5)砷、汞的快速测定,最常见的砷化物为三氧化二砷,俗称砒霜、白砒等。最常见的汞化物有氯化汞、氯化亚汞、硝酸汞及有机汞制剂。凡是可溶于水或稀酸的砷化物和汞化物皆系剧毒物质,混入食品中可对人体造成危害。砷和汞的中毒检验,一般采取经典的“雷因须氏法”即“铜片法”为基本定性实验,呈阳性反应时再分别加以确证。铜片法比古老的银针法要灵敏。,1.铜片法快速检测砷和汞,快检方法编号:CDC/SB 110,2.砷管法快速检测食品中的砷(以乳品中砷的
19、检测为例),意义:国家卫生标准规定,牛乳含砷量应0.05mg/Kg,乳粉含砷量应0.25mg/Kg。采用砷管法简单易行,可在现场使用,当发现超标或投毒剂量的砷时,可及时送往实验室精确定量。操作:取样品1ml(乳粉取1g)于反应瓶中,加入20ml水,振摇后浸泡10分钟,加入两平勺酒石酸,摇匀,加10滴消泡剂,摇匀。取检砷管一支,插入带孔的胶塞中。向反应瓶中加入一片产气片,立即将带有检砷管的胶塞插入反应瓶口中,待产气停止,观察并测量检砷管中氯化金硅胶柱变成紫红或灰紫色的长度,牛乳检测变色长度应1mm,乳粉应2.4 mm。,快检方法编号:CDC/SB 110-1,3.汞管法快速检测食品中的汞(以乳品
20、中汞的检测为例),意义:国家卫生标准规定,鲜乳含汞量应0.01mg/Kg,汞的检测通常需要在实验室中采用氢化物原子荧光光度法来检测。采用汞管法简单易行,可在现场使用,当发现可疑样品(超标或投毒剂量)时,可及时送往实验室精确定量。,操作:取乳粉5 g 或牛乳为10ml于反应瓶中,加入20ml水,加入一平勺酒石酸,加10滴消泡剂,摇匀。向反应瓶中加入一片产气片,立即将带有检汞管的胶塞插入反应瓶口中,待产气停止,观察测汞试纸变化情况。判定:试纸由白变为橘红色为汞阳性,试纸不变色为合格。,快检方法编号:CDC/SB 110-2,阳性,阴性,(6)氰化物的快速测定,检测意义:氰化物属于烈性毒物。在食品中
21、的来源有污染和人为投毒等。氢氰酸的致死量约60毫克,氰化钠或氰化钾的致死量在200300毫克。操作步骤:取1支检氰管,插入一片苦味酸试纸条,在试纸条上滴加12滴碳酸钠饱和溶液,将检氰管插入带孔胶塞中。称取5 ml样品于反应瓶中,加入20ml纯净水,加入1g酒石酸,立即塞上装有检氰管的胶塞,将反应放入7080水浴中加热30分钟,观察管内试纸变色情况,如试纸尖端变为橘红色,表示氰化物含量大于5mg/L,含量越高,试纸变色范围越大,颜色越深。,乳品中的氰化物,食品中的氰化物左侧为阴性,右侧阳性,快检方法编号:CDC/SB 112,(7)油脂酸价和的过氧化值快速测定,检测意义:过氧化值升高是油脂酸败的
22、早期指标,当油脂酸败到一定程度时过氧化物形成醛及酮、过氧化值又会降低,当过氧化值超出20meq/Kg(毫克当量/公斤)时即表示酸败。世界卫生组织(WHO)推荐过氧化值不应超过10meq/Kg,过高时,食后可发生头痛、头晕、腹泻、呕吐及腹痛等中毒症状。酸价表示油脂酸败的程度。检测材料:酸价纸片的测试范围在05.0 mg KOH/g,过氧化值的测试范围在050meq/Kg。操作方法:直接取植物油(动物油需加热使其融化)样品适量于清洁、干燥容器中,将试纸端插入油样中12秒,立即取出并开始计时。酸价测试纸的反应计时为905秒。过氧化值测试纸的反应计时视环境温度而定(见附表)。当计时到达后,将试纸颜色与
23、比色板进行比较定量。结果判定:试纸颜色与色卡相同或相近以色卡标示值报告结果。如试纸颜色在两色卡之间,则取两者的中间值。国家食品卫生标准BG2716-2005对食用植物油酸价和过氧化值有一个统一的最高限量标准,即植物原油酸价4mg KOH/g,食用植物油酸价3mg KOH/g;植物原油和食用植物油的过氧化值都要0.25g/100g(相当于19.7meq/Kg)。在国家其他标准中实行质量分级管理(详见附表)。,酸价快检方法编号:CDC/SB 113 过氧化值快检方法编号:CDC/SB 114,附表,(8)食用油中非食用油的快速测定1.桐油的快速测定,检测意义:桐油是从桐树果实中提出来的油,是一种快
24、干性油,工业中用作油漆及涂料。桐油应用广泛。其色、味与一般食用油相似,故常有误食而中毒者。,操作步骤(三氯化锑法):取油样1ml于小试管中,沿管壁小心加入“桐油鉴别试剂A”1ml,使试管中溶液分为两层,将试管置于3545温水中(温度不宜过高),加热约10分钟。如有桐油存在,在溶液分层的界面上,会出现紫红色至深咖啡色的环,加热时间延长,颜色会加深,更易观察,检出限0.5%。本法对菜油,花生油,茶子油中混杂桐油很灵敏(可达0.5%),但豆油,棉子油存在有干扰。,快检方法编号:CDC/SB 115,左侧阴性,右侧阳性,2.大麻油的快速测定,检测意义:大麻系一种有毒的大麻科植物,其果实含油在30%左右
25、。大麻油呈棕褐色略带淡绿色。由于大麻子中含有带麻醉性的有毒成分,如四氢大麻酚,大麻二酚,大麻酚等,故食用未经处理或处理不当的大麻油,会引起中毒。,方法1(盐酸蔗糖法,需自备盐酸):取油样1ml置试管中,加入浓盐酸35ml,加入一次量的“大麻油鉴别试剂A”,振摇1分钟,10分钟内观察,若酸层染上粉红色,静置后逐渐变成红色,示有大麻油存在。做阳性对照实验加以确正。芝麻香油对本方法有干扰。,方法2(磷酸法):取油样1ml置于试管中,加入2ml“大麻油鉴别试剂B”,振摇混匀,静置5分钟,10分钟内观察,酸层呈现绿色,示有大麻油存在。,快检方法编号:CDC/SB 116,方法1结果图,方法2结果图,3.
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