革兰阳性球菌.ppt
《革兰阳性球菌.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《革兰阳性球菌.ppt(79页珍藏版)》请在三一办公上搜索。
1、第六章 革兰阳性球菌,革兰阳性球菌,是指革兰染色为阳性的一群球菌,与医学 有关的兼性厌氧球菌有9属通常引起化脓性感染,故又称化脓性球菌(pyogenic cocci)本章主要介绍葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。,第一节 葡萄球菌属,葡萄球菌属(Staphylococcus)在自然界广泛分布。存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株可致多种化脓性感染疖、痈、脓肿、菌血症等烫伤样皮肤综合症毒性休克综合症,一、分类,葡萄球菌属目前有35个种、17个亚种凝固酶凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌(Coagulase negative staphylococcus,CoNS)
2、噬菌体分型可将金黄色葡萄球菌分成45群26型质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌DNA的RFLP或PFGE分型,用来研究细菌的致病性、耐 药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系,分类,引起人类疾病的重要菌种有金黄色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌(S.epidermidis)头状葡萄球菌(S.capitis)人葡萄球菌(S.hominis)腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)其余尚有一些能在人体中分离到溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌
3、等。,二、临床意义,凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌可引起社区和医院感染感染常以急性、化脓性为特征,如果未经有效治疗,感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官常见的感染疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染,临床意义,致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关肠毒素引起食物中毒,表现为急性胃肠炎噬菌体II群产生的剥脱毒素(或称表皮溶解素)可引起人类烫伤样皮肤综合征多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成,继以表皮上层大量脱落由噬菌体群产生的毒性休克综合征毒素-I(Toxic shock syn
4、drome toxin I,TSST-1)属超抗原家族,刺激T细胞诱发TNF和IL-1可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征(TSS),临床意义,CoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一是医院感染的主要病原菌表皮葡萄球菌人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等腐生葡萄球菌女性尿路感染的重要病原菌其他凝固酶阴性葡萄球菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌产生荚膜多糖或糖萼有关增强细菌与外来物质(生物性瓣膜、导管等)表面的粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作用。,三、生物学特性,直径0.51.5m、革兰阳性球菌呈单个、成双、短链(液体培
5、养基或脓汁中)或成簇排列呈葡萄串样,无鞭毛和芽胞,某些菌株能形成荚膜在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A蛋白,具有抗原性大多为兼性厌氧菌,对营养要求不高,最适生长条件3537,pH7.47.6。普通培养基上形成直径23mm不透明的圆形凸起菌落产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。,生物学特性,金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透 明溶血环。能在含10%15%NaCl琼脂中生长该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强,耐干燥近年来耐药性增强,对多种抗菌药物不敏感生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质,触酶阳性该属细菌DNA G+C mol%为3039,酶和毒素,葡萄球菌属产生多种酶和毒素产生
6、2种血浆凝固酶结合凝固酶或聚集因子是结合在菌体表面的凝固酶,能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集游离凝固酶是细菌分泌到菌体外的凝固酶,能被血浆中的协同因子(cofactor)激活形成复合物,再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白,而使血浆凝固,酶和毒素,耐热核酸酶葡萄球菌溶素有、等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等肠毒素是一组对热稳定的可溶性蛋白质,耐热100 30min,分子量为2630kDa,能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用根据抗原性和等电点的不同可分为A、B、C1、C2、C3、D、E、G和H等9个血清型,以A、D 型多见编码肠毒素基因大多位于染色体上(D型由质粒编码),酶和毒素,毒性休克综
7、合征毒素透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞 素和表皮剥脱毒素等携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒,通过转导进行质粒的转移部分菌株通过获得外源性的macA基因而 产生青霉素结合蛋白2a(PBP2a),导致对所有内酰胺类抗生素耐药,四、微生物检验(一)检验程序,(二)标本采集,根据感染的部位,采集不同的标本。该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜,采取时避免病灶周围正常菌群污染。,(三)标本直接检查,无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂 片、革兰染色后直接显微镜检查,查见细菌 具有重要临床价值。其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接 显微镜检查结果也具有参考价值。涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌
8、,则可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性 球菌”,并进一步进行分离和鉴定予以证实。,(四)分离培养与鉴定,脓液、分泌物等接种于血琼脂平板有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上,如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板血液标本则用肉汤增菌培养基,葡萄球菌属内各菌种鉴定方法,1.菌落性状,金黄色葡萄球菌直径68mn,金黄色或橙色,菌落周围出现或不出现透明溶血环表皮葡萄球菌直径为56mm,某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面,无色或白色溶血葡萄球菌直径59mm,不透明,无色素或奶油色、黄色里昂葡萄球菌直径47mm,边缘整齐稍扁,奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似腐生葡萄球菌直径58mm,白色或柠檬色菌
9、落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色,2凝固酶试验,有玻片法和试管法两种玻片凝固酶试验-测定结合型凝固酶试验时挑取少数菌落培养物(不能用生 长高盐琼脂上的菌落)加入1滴血浆,10 秒内观察细菌聚集和凝块形成金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现 阳性反应,2凝固酶试验,试管凝固酶试验-测定分泌型凝固酶以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在37水浴中孵育4h,观察凝块形成。如试验结果为阴性者再置室温1824h,因某些菌种(中间葡萄球菌、猪葡萄球菌)的凝集出现所需时间长于4h必须注意某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解使之产生假阴性若使用的不是无
10、菌血浆可产生假阳性或假阴性结果;细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性,3耐热核酸酶试验,大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。,4磷酸酶试验,大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的pH5.66.8 MH琼脂上,孵育1824h,菌落周围出现黄色为阳性。,5吡咯烷酮芳基酰胺酶试验,溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为阳性。将孵育24h斜面培养物接种在含吡咯烷酮-萘基酰胺(PYR)肉汤中,使细菌浓度调整为2号
11、麦氏管浊度,35孵育2h,加入PYR试剂后2分钟内呈现深紫红色为阳性。,6其他鉴定试验,常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、-半乳糖苷酶、3-羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘菌素B耐药试验、糖产酸试验,(五)肠毒素检测,动物学试验经典的方法是采用幼猫腹腔注射(肉汤培养物或呕吐物),4h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者,提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在 琼脂扩散试验或ELISA法测定用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散,观察有无沉淀线产生将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心ELISA法检测样本中的肠毒素,第二
12、节 链球菌属,链球菌属(Streptococcus)细菌种类多,分布广其中某些菌种为毒力强的致病菌另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌,一、分类,链球菌属的分类较为复杂传统分类以血平板上溶血现象Lancefield抗原血清分型种系分类法链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化,传统分类,根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象甲型()溶血性链球菌乙型()溶血性链球菌不出现溶血的丙型()链球菌根据Lancefield抗原血清分型分为A、B、C、D、等20群血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主要是A群,种系分类法,根据种系分类法的
13、研究结果原来归属为D群链球菌的肠球菌和N群链球菌已分别独立为肠球菌属(Enterococcus)和乳球菌属(lactococcus)遗传学和血清学分型不能统一在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性毫无相关的菌种可出现同一抗原。根据伯杰鉴定细菌手册第9版,链球菌目前分为40个种和亚种,传统的分类方法,溶血性链球菌A、C、G群抗原菌落直径大于0.5mm A群的化脓性链球菌(S.pyogenes)、C群、G群的马链球菌(S.equi)和似马链球菌(S.equismilis)菌落直径小于0.5mm具A、C、G群抗原,统称米勒链球菌(S.milleri)咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌还有溶血
14、和不溶血的细菌B群抗原无乳链球菌(S.agalactiae),传统的分类方法,溶血性链球菌包括肺炎链球菌(S.pneumoniae)草绿色链球菌群(Viridans streptococci)不溶血D群链球菌牛链球菌(S.bovis),二、临床意义,化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌能产生多种毒素链球菌溶素O和S红疹毒素M蛋白、脂磷壁酸酶(链激酶、链道酶、透明质酸酶等)可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等产毒株还可引起猩红热可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等近年来报道引起毒素休克综合征,临床意义,无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌该
15、菌定居于妇女生殖道能导致新生儿感染早发型新生儿感染多发病于出生后24h,以肺炎为主晚发型为产后7天至3月内,以脑膜炎和菌血症为主B群链球菌对成人侵袭力较弱主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下者易受B群链球菌感染,临床意义,C、G群溶血性链球菌与化脓性链球菌有相似的毒力因子,引起上述相似的感染米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌,但大都是手术和创伤引起的内源性感染,临床意义,肺炎链球菌大叶性肺炎、支气管炎中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用肺炎链球菌的溶血素、
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 阳性 球菌
链接地址:https://www.31ppt.com/p-6213464.html