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1、霉菌毒素的危害及解决措施,一、霉菌知识简介,霉菌是“丝状真菌”的统称。凡是在基质上长成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状丝体的真菌,称为霉菌。,(一)饲料常见的霉菌,饲料中常见的霉菌包括曲霉属、青霉属、镰刀菌属等十几个种属。,曲霉属,黄曲霉,黑曲霉,灰绿曲霉,米曲霉,土曲霉,烟曲霉,曲霉属,杂色曲霉,棒曲霉,曲霉属,青霉属,柑桔青霉污染,圆弧青霉,镰刀菌属,粉红镰刀菌,玉米中的霉菌(白色为镰刀菌),常见霉菌的显微结构,曲霉的显微结构,镰刀菌的显微结构,青霉的显微结构,常见霉菌的显微结构,电子显微镜下的青霉,电子显微镜下的黄曲霉,(二)霉菌生长的四个基本条件,适宜的温度 总的来说,大多数霉菌属于中温性微生
2、物。一般危害谷物的霉菌孢子在7即可发芽生长,低温时生长缓慢,在2432时生长最快。适宜的水分和湿度 大多数霉菌的发芽需要约75的相对湿度,在85 以上的相对湿度时生长迅速。氧气 氮和能源,(三)饲料霉变的危害,1.适口性降低;2.饲料营养价值降低;3.动物霉菌毒素中毒;4.动物霉菌感染;5.影响畜产品安全,二、霉菌毒素危害(一)霉菌毒素危害的特点,1.群发性和无传染性2.无免疫性3.地域性和季节性 4.引起损害的多样性5.中毒症状复杂多样,(二)相应的霉菌毒素,霉菌毒素是霉菌在基质生长繁殖过程中产生的有毒代谢产物。霉菌毒素联合作用往往造成危害增强。,(三)饲料霉变与霉菌毒素污染间的关系,1.自
3、然界中只有很少一部分霉菌可以产毒;2.霉菌毒素与其产毒菌株间无严格对应关系;3.饲料霉变霉菌毒素污染;4.饲料中霉菌总数不超标饲料安全,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,1 黄曲霉毒素1.1 概述 黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。主要存在于花生粕、玉米、棉菜粕等。,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,1.2 危害1.2.1 靶器官 肝脏。1.2.2 危害特点 猪:临床表现为精神沉郁厌食,生长受阻,体重减轻,被毛粗糙,进一步发展为黄疸,贫血及出血性腹泻,并出现以低凝血酶原血为特征的凝血病。肝脏损伤,各种酶含量升高,包括丙氨酸转氨酶,碱性磷酸酶等。当猪出现急性黄疸、出血或凝血病不能以其他原因解释时,应
4、考虑为黄曲霉素素中毒;出现生长缓慢、营养不良等慢性征兆以及持续发生轻度传染病时,也应提示黄曲霉毒素中毒;当出现特征性肝损伤和临床化学变化时,应明确提示为黄曲霉毒素中毒。,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,鸡:临床表现为食欲不振,生长缓慢,产蛋率下降,皮下出血,死亡率提高。剖检可见肝肾肿大苍白,心包积水,胆囊扩张,卡他性肠炎。显微镜检可见肝脏脂肪变性,胆管增生,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,1.3 国家相关限量标准 黄曲霉毒素B1允许量(GB 13078-2001)玉米花生饼(粕)、棉籽饼(粕)、菜籽饼(粕)50g/kg 豆粕 30g/kg 仔猪配合饲料及浓缩饲料 10g/kg 生长肥育猪、种猪
5、配合饲料及浓缩饲料 20g/kg 肉用仔鸡前期、雏鸡配合饲料及浓缩饲料 10g/kg 肉用仔鸡后期、生长鸡、产蛋鸡配合饲料及浓缩饲料 20g/kg 肉用仔鸭前期、雏鸭配合饲料及浓缩饲料 10g/kg 肉用仔鸭后期、生长鸭、产蛋鸭配合饲料及浓缩饲料 15g/kg 鹌鹑配合饲料及浓缩饲料 20g/kg 奶牛精料补充料 10g/kg 肉牛精料补充料 50g/kg,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,2 玉米赤霉烯酮(F-2毒素)2.1 概述 是结构相似的一类化合物,种类多.主要存在于玉米、大麦、小麦及谷物加工副产品等。,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,2.2 危害2.2.1 靶器官 生殖系统。2.2.2
6、 危害特点 玉米赤霉烯酮主要表现为雌激素样作用,动物表现为雌激素亢进证。急性中毒时,母猪和去势母猪乳腺增生,阴户红肿,子宫肥大和卵巢萎缩;公猪,包皮长,阴茎肿大,乳腺肿胀。亚急性中毒时母猪不育,流产,死胎,木乃伊,产仔数减少及仔猪体弱,存活的小猪出现睾丸萎缩,乳腺增大等雌性化征象。母牛症状与猪相似。鸡可见泄殖腔外翻,输卵管扩张,产蛋率下降等。2.2.3 不同动物对玉米赤霉烯酮的敏感性 猪禽反刍动物。,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,3、T-2 毒素(单端孢霉烯族化合物)、呕吐毒素(DON)3.1 危害特点谷物及其加工副产品特别是霉玉米是此类毒素主要来源。靶器官是肝脏和肾脏,属于组织刺激因子和致
7、炎物质,可直接损伤消化道黏膜。具有使动物呕吐的作用。动物接触此类毒素或产毒菌株的培养物,可引起局部皮肤刺激、炎症甚至坏死。,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,4.2 相关国家标准4.2.1 呕吐毒素的允许量(GB 13078.3-2007)猪、犊牛、泌乳期动物配合饲料:1 mg/kg 家禽、牛配合饲料:5 mg/kg 4.2.2 T-2毒素的允许量(GB 21693-2008)猪、禽配合饲料:1 mg/kg,(四)饲料中常见霉菌毒素的危害,4、赭曲霉素主要由青霉菌、曲霉菌产生易感动物:猪、家禽靶器官:肾脏主要毒性作用:抑制蛋白质合成危害:增重减少、生产性能下降;其他症状:腹泻、饮水量增加、多尿、
8、脱水等产蛋下降,破蛋增多;肾脏肿大,尿酸盐分泌增多;腺胃肌胃受影响,黄曲霉毒素、赭曲霉毒素和T2毒素 的致病作用及对免疫作用影响的比较,三、霉菌毒素的解决措施(一)霉菌毒素的预防,1.控制水分 控制饲料绝对水分(一般要求玉米、高粱、稻谷等的含水量应不超过14%;大豆及其饼粕、麦类、糠麸类、甘薯干、木薯干等的含水量应不超过13%;棉籽饼粕、菜籽饼粕、向日葵饼粕、亚麻仁饼粕、花生仁饼粕、鱼粉、骨粉及肉骨粉等的含水量应不超过12%)饲料存储环境的湿度 防止寄生虫、昆虫污染,(一)饲料防霉,2.使用防霉剂 目前普遍使用的防霉剂为有机酸(丙酸,山梨酸,苯丙酸,胆氢醋酸,富马酸等)及其盐类。3、抗霉育种目
9、前国外在花生抗霉育种方面已取得一定进展4、其它 辐射处理 低温储藏 低氧储藏,霉菌数量与产生毒素量的关系,霉菌毒素污染现状,FAO国际粮农组织报道:全球25%的谷物受到污染。中国饲料检测中心报道:1、我国玉米、麸皮、饲料霉菌毒素检出率100%;2、玉米、麸皮、饲料霉菌毒素超标率90%;3、主要检出的霉菌毒素是:玉米赤霉烯酮、T-2/DAS毒素(单端孢霉烯族)、黄曲霉毒素、呕吐毒素、赭曲霉毒素、烟曲霉毒素。,霉菌毒素检测方法,饲料中霉菌及霉菌毒素的检测方法主要有目测法、薄层色谱法(T LC)、高效液相色谱法(HP LC)、酶联免疫法(E LISA)、放射免疫法(KIA)及气相色谱法等。快速试纸检
10、测法,(二)霉菌毒素脱毒处理,常用的脱毒方法 1、物理脱毒 2、化学脱毒法 3、吸附剂法 4、生物转化脱毒剂,1、物理脱毒法,物理脱毒主要包括挑选霉粒、水洗法、晾晒法、辐射法等。这些方法耗时耗力,且水洗法对于难溶解于水的黄曲霉素、玉米赤霉烯酮、杂交曲霉毒素等效果不理想,需反复搓洗或粉碎水洗除毒。因此,这些方法主要针对农户和小规模养殖场应用。目前此法已普遍使用,2、化学脱毒法,化学脱毒主要包括:氨水去毒法、碱煮去毒法。化学脱毒法效果较好,但有一定的腐蚀性,也不适用于大批量的饲料原料。,3、吸附剂法,为了减少损失,很多学者采用一些物质作为霉菌毒素的吸附剂来处理霉变饲料,即在饲料中添加可以吸附霉菌毒
11、素物质,使毒素在经过动物肠道时不被动物所吸收,直接排出体外。这是目前应用较广,较为成熟、经济可行的一种毒素脱毒方法。,3、吸附剂法,1)无机吸附剂活性碳硅铝酸盐:是以蒙脱石、沸石、膨润土为主的一大类天然矿物质吸附材料,吸附质离子由于静电引力作用聚集到吸附剂表面上硅酸盐进入胃肠后,还可在消化道黏膜上形成一层保护性覆盖膜,并与黏液糖蛋白结合,改善消化道黏膜的修复能力,提高黏膜屏障对攻击因子的防御功能,阻止有害毒素、细菌、病毒进入血液,并连同所固定的攻击因子随消化道自身蠕动排除体外。霉可脱、脱霉霸、驱霉素,3、吸附剂法,2)有机吸附剂目前主要是酵母细胞壁、甘露聚糖、葡甘聚糖及其衍生物等。,有机吸附剂
12、对不同霉菌毒素的吸附率,霉菌毒素 吸附效率(%)总的黄曲霉毒素(B1+B2+G1+G2)85.23玉米赤霉烯酮 Zeralenone 66.66脱氧血腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)DON 12.58赭曲霉毒素 Ochratoxin 12.49桔霉素 Citrinin 18.41T-2 毒素 33.39二乙酸藨草镰刀菌烯醇 DAS 12.72镰刀菌毒素 Fusariotoxin X 7.87伏马菌素 Fumonisin 67.00,3、吸附剂法,3)吸附剂法的局限性任何一种单一的吸附剂都不能将所有霉菌毒素都吸附。它们表现出了对维生素及矿物质的非选择性吸附能力,一旦把它们加入谷物或饲料中,某些营养成份也
13、可被它们吸附,而这些营养成份的含量远高于毒素,结果吸附剂被营养成份饱和吸附而不能吸附毒素。一般来说它们在饲料中的添加量要比较大,有的甚至要添加1%以上才有比较明显的效果,这一方面会降低饲料的适口性,缩小饲料的配方空间,另一方面也会造成对营养物质特别是矿物质、氨基酸、维生素和药物的损失。,4、生物转化脱毒剂,采用某些特殊的酶或者由某些微生物产生这些酶,将霉菌毒素进行生物降解或者生物转化而脱毒对于单端孢菌霉烯族毒素,其12,13-环氧基是其毒性中心,采用脱环氧基酶将这个环氧基消除被命名为BBSH 797(Heidler和Schatzmayr,2003)的优杆菌,可以在动物胃肠道内定植并繁殖,并产生
14、脱环氧基酶,4、生物转化脱毒剂,Schatzmayr等(2006)从白蚁肠道分离出一种毛霉菌,命名为Trichosporon mycotoxinivorans(MTV),可以产生将玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A进行生物转化脱毒所需要的酶。,4、生物转化脱毒剂,这种技术的先进性在于:这种方法能将毒素彻底分解而不会有毒性物质残留。采用吸附法脱毒时毒素虽然与吸附剂结合而被排出动物体外,不会对动物造成损害,但是因为毒素分子非常稳定而不会被破坏,它们会在畜舍内或者土壤中蓄积,并且在一定的温度湿度和酸碱条件下会从吸附剂中解离出来而变成游离的毒素分子,人或者动物接触或食入这些毒素后又会产生危害。而生物转化法则将
15、毒素分子转化成无毒的产物,无残留,不会对环境造成有害影响;这种脱毒方法特异性高只针对霉菌毒素起作用而不会破坏饲料和原料中的其它成分,不会降低饲料的营养价值。生物转化是通过酶的催化而进行的,酶的催化作用具有高度的专一性,一种酶只能催化一个或者一类反应的发生;,4、生物转化脱毒剂,其局限性:但实际应用中,一是酶不耐热,在饲料的制作过 程,尤其在颗粒饲料压制的高温过程中易于失活;二是酶脱毒法成本较高,难以接受。微生物还有通过微生物的发酵来去除霉菌毒素,但这种生物转化过程往往存在缓慢及不完全的缺点,5、营养解毒法,抗氧化物质的添加 饲料中添加一些抗氧化剂,如维生素A、维生素C、维生素E和硒、色素等会缓解霉菌毒素对细胞的作用蛋氨酸的添加肝脏解毒的基础是谷胱甘肽,蛋氨酸和胱氨酸是谷胱甘肽的组成部分。,小结:,中国的养殖业,霉菌和霉菌毒素是一个大问题。霉菌毒素即使单项不超标,多种不超标毒素的存在仍然会导致危害霉菌、霉菌毒素的危害总是导致群体的共同临床表现,甚至共用饲料的群体有共同临床表现。主要是生长不良,体重不达标,饲料报酬率低。,小结:,多种不明原因的消化道症状(饲料便、拉稀、胃肠出血、腺胃肿、肌胃溃疡)采食变化(采食少、时间延长)精神异常表现(不活泼,喜卧)腿病(跛行增多、腿软、关节肿、雏鸡软骨)肌肉淤斑、出血难凝,甚至血管瘤多,都需考虑更换饲料或通过更换饲料加以改善和验证。,
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