恶性淋巴瘤免疫组化.ppt
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1、恶性淋巴瘤的免疫组化,复旦大学肿瘤医院病理科,一、常用抗体,(一)白细胞1.CD45,CD45RB(LCA),出现于白细胞表面的四、五种高分子量糖蛋白家族(180,190,205,220kD)DAKO产抗体由二种单抗组成:2B11(180,190,205,220kD)-CD45抗体PD7/26(190,205,220kD)-CD45RB抗体,正常组织:标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强,胞浆内弱阳性也可见。巨噬细胞和组织细胞不同程度表达。多核白细胞弱阳性浆细胞阴性非造血细胞阴性,肿瘤:大部分淋巴瘤(B和T)阳性浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性毛细胞阳性粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性非造血组织肿瘤,如
2、癌,恶性黑色素瘤,尤文氏肉瘤阴性可用于脱钙骨髓活检组织,鉴别骨肿瘤,2.CD11A/18(LFA-1 和),表达于大部分淋巴瘤和白血病很多中等和高度恶性B细胞淋巴瘤LFA-1的和/或 链可缺失。,3.TdT,属核酶,参与T细胞受体产生和抗体分化过程。正常组织:见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸腺细胞。偶见于反应性淋巴结和脾髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达,肿瘤:表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。高TdT活性见于:淋巴母细胞性淋巴瘤慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象大部分急性淋巴母细胞性白血病,4.CD30,120kD跨膜糖蛋白CD30基因位于第1号染色体短臂36区,早先称为Ki-1,又名Ber
3、-H2冰冻切片:霍奇金细胞(单核)和R-S细胞(多核)结节型淋巴细胞为主型:弱阳性或阴性其它HL:强阳性,大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样丘疹强阳性一些外周多形T细胞淋巴瘤(HTLV-1+/-),包括血管免疫母细胞型,Lennert型和极少数B免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴性。正常淋巴组织中,小群位于B细胞滤泡和生发中心边缘的大细胞阳性,正常淋巴细胞经菜豆凝集素,HTLV-I/II或EB病毒刺激后,可与CD30抗体反应。淋巴组织外,胰腺腺泡细胞(+),胰腺癌偶(+)。胚胎型癌(+)。其他类型或其他部位的癌,恶性黑色素瘤,横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤,尤文氏肉瘤()石蜡切片:与冰冻切片不同,
4、浆细胞(+)余同冰冻切片,(二)B细胞,1.免疫球蛋白(Ig)(1)免疫球蛋白轻链(2)免疫球蛋白轻链,2.全B抗原(1)CD20(L26),33kD非糖基化蛋白外周血和淋巴组织中大多数B细胞阳性在淋巴组织,生发中心母细胞和B免疫母细胞强阳性。其他造血细胞阴性。,非淋巴组织阴性。大多数B细胞淋巴瘤阳性极少数T细胞淋巴瘤阳性结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞可阳性。,(2)CD19,95kD多肽B细胞阳性。表达于B细胞成熟早期,可能早于前B细胞期,持续见于整个B细胞成熟期,直至终末浆细胞期前不久消失。其他造血细胞和非造血细胞阴性。只能用于冰冻切片。,(3)CD22,B细胞分化早期表达于
5、胞浆,后与Ig几乎同时到达细胞表面B细胞淋巴瘤和白血病阳性大多数浆细胞肿瘤阴性,(4)CDW75(LN-1),表达于SIgB细胞正常细胞:淋巴结和脾白髓的生发中心B细胞强(+)套区B细胞,巨噬细胞,脾红髓红细胞阳性更弱滤泡外B细胞散在阳性浆细胞阴性外周血B淋巴细胞阳性,阳性上皮细胞:腺上皮(子宫内膜、前列腺、胃),乳腺导管上皮,肾远曲小管,胰腺导管,结肠表面上皮,支气管呼吸道纤毛柱状上皮肝细胞,甲状腺滤泡,平滑肌和唾腺腺泡细胞弱阳性。肿瘤细胞:B细胞性白血病(+):B细胞慢性淋巴细胞性白血病,毛细胞白血病,B细胞淋巴瘤:滤泡中心细胞淋巴瘤,特别是大裂和大无裂强(+)免疫母细胞型也(+)T细胞淋
6、巴瘤()上皮性肿瘤:乳腺、卵巢和结肠腺癌(+)喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶(+)膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱(+)间叶性肿瘤:粘液脂肪肉瘤(+)未分化肉瘤(+),(5)CD79(mb-1),与CD79(B29)共同组成B细胞抗原受体出现于B细胞成熟早期,从前B细胞期到浆细胞期,为细胞间成分。用于识别B细胞种系。前B细胞性急性白血病,B细胞株,B细胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。粒细胞或T细胞株以及T细胞瘤阴性。,(6)BLA36,36kD糖蛋白正常细胞:见于早期和活化B细胞,但静止和周围B细胞阴性。大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜强阳性。少数小裂细胞阳性,巨噬细胞阴性。,30%套区淋巴细胞膜弱阳性
7、。滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细胞膜强阳性。T细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性,但正常肝的枯否氏细胞不同程度阳性。肿瘤细胞:霍奇金淋巴瘤的R-S细胞和霍奇金细胞阳性。一些反应性和恶性B淋巴细胞阳性。,3.B细胞亚型抗原(1)CD10(CALLA,急性淋巴母细胞性白血病共同抗原),100kD糖蛋白主要用于儿童白血病和B细胞淋巴瘤:表达于淋巴母细胞性,Burkitt和滤泡型淋巴瘤及慢性粒细胞型白血病,也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮和正常纤维母细胞。,(2)CD21,C3d受体,145kD糖蛋白也具有Epstein-Barr病
8、毒受体的功能冰冻切片:B细胞中等()滤泡树突状细胞(FDC)强()石蜡切片:B细胞弱()()FDC强(),正常和增生淋巴结及扁桃体:生发中心可见FDC网状结构,致密,清晰。滤泡套区FDC 网状结构疏松,不清晰。非霍奇金淋巴瘤:滤泡型淋巴瘤(cb/cc淋巴瘤):FDC网状结构呈结节型,致密,清晰。一些弥漫型淋巴瘤(中心细胞性淋巴瘤):FDC网状结构大小不一,疏松,不清晰。前B细胞淋巴瘤(淋巴母 细胞性淋巴瘤),Burkitt淋巴瘤,浆细胞瘤和毛细胞白血病FDC。,T细胞淋巴瘤FDC限于外周T细胞淋巴瘤的血管免疫母细胞性淋巴结病(AILD)型和一些多形T细胞淋巴瘤。与B细胞淋巴瘤不同,T细胞淋巴瘤
9、和AILD的FDC网仅含少量B细胞。T淋巴母细胞性淋巴瘤、T-CLL和蕈样霉菌病FDC。霍奇金淋巴瘤:仅结节型淋巴细胞为主型FDC。FDC网状结构致密,清晰,几乎占据整个增大的滤泡。,(3)CD23,正常细胞:套区B细胞()滤泡树突状细胞亚型()肿瘤:小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病()套细胞淋巴瘤(),(4)CD35,C3b受体,单链糖蛋白,220kD正常组织:冰冻切片:人B细胞滤泡中大部分强阳性细胞为滤泡树突状细胞(FDC),套细胞阳性较弱。肾小球上皮细胞C3b受体强阳性巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性,石蜡切片(蛋白酶消化后):FDC强阳性,滤泡中心和套区的FDC网状结构明显,前者致密,清晰;后
10、者疏松,不清晰。肿瘤细胞:滤泡型淋巴瘤(cb/cc):FDC网状结构呈结节状,致密,清晰弥漫型淋巴瘤(多数为cc):FDC网状结构疏松,不清晰,前B细胞淋巴瘤(淋母),Burkitt淋巴瘤,浆细胞瘤和毛细胞性白血病FDC非霍奇金淋巴瘤,FDC主要限于血管免疫母细胞性淋巴结病型T细胞淋巴瘤,(5)CD38,45kD糖蛋白正常细胞:浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、和活化的T细胞()。肿瘤:浆细胞肿瘤()有些B和T细胞淋巴瘤(),特别前驱细胞来源者。,(6)VS38c(浆细胞单抗),64kD胞浆内抗原。表达于正常和肿瘤性浆细胞。上皮细胞(尤其鳞状上皮)弱阳性,(三)T细胞,1.全T抗原,(1)CD
11、2,正常细胞:T细胞()NK细胞()肿瘤:大多数T细胞淋巴瘤和白血病()少数粒细胞白血病(),(2)CD3,16-28kD,5条多肽链组成抗体与T细胞表达的CD3抗原的胞浆内部分反应。最早见于早期胸腺细胞在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆至髓质胸腺细胞出现于T细胞表面为高度特异T细胞标记,除T细胞外,仅表达于小脑蒲肯野细胞。,正常组织:表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的T细胞。肿瘤:表达于大多数T细胞肿瘤,但高度恶性T细胞淋巴瘤,如大细胞间变性淋巴瘤偶见()。部分恶性组织细胞增生症阳性有些霍奇金淋巴瘤阳性,(3)CD5,表达于多数T细胞淋巴瘤和白血病。也可表达于一些肿瘤性B细胞,如B-CLL,B-
12、小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。粒细胞和单核细胞阴性。,(4)CD7,正常细胞:大部分T细胞()NK细胞()肿瘤:很多T细胞淋巴瘤和白血病()一些粒细胞白血病()淋巴母细胞性肿瘤最佳T细胞标记之一胸腺后T细胞恶性肿瘤,尤其在MF中常缺失,(5)CD43(Leu22),T细胞和髓系细胞表达的膜/浆抗原正常和肿瘤性T细胞阳性正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区T细胞强阳性少数B细胞白血病和淋巴瘤也可表达通常为小细胞性,如中心细胞性淋巴瘤,(6)OPD4,200kD,表达于辅助/诱导T细胞强阳性:淋巴结T区淋巴细胞(膜)扁桃体*分布同CD4阳性细胞结节病和结核的类上皮细胞弱阳性抑制/细胞毒T细胞极少阳性,
13、阴性:非造血细胞B细胞单核细胞粒细胞肿瘤:见于50%T细胞淋巴瘤辅助/诱导表型的外周T细胞淋巴瘤少数B细胞淋巴瘤阳性,(7)CD45RO(UCHL-1),180kD,出现于T细胞分化早期。正常细胞:大多数胸腺细胞()成熟活化T细胞()少量静止T细胞(CD4/CD8亚型)()粒单核细胞系,如粒细胞和单核细胞()多数正常B细胞和NK细胞(),肿瘤细胞:T细胞淋巴瘤()极少B细胞淋巴瘤:部分中心母细胞性和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱()组织细胞性淋巴瘤弱()鉴别naive T细胞和记忆T细胞CD45RO:记忆T细胞CD45RA:naive T细胞,2.T细胞亚型抗原(1)CD1A,正常细胞:皮质胸腺细胞
14、()郎罕氏细胞()肿瘤:很多胸腺T淋巴瘤和白血病()郎罕氏细胞组织细胞增生症(),(2)CD4,55kD,出现于大部分T辅助/诱导细胞。胸腺皮质:胸腺细胞复合表达CD4,CD8,T6胸腺髓质:胸腺细胞丢失T6,分别表达CD4,CD8。也见于单核/巨噬细胞,表达T4抗原的肿瘤:多数皮肤T细胞淋巴瘤,包括蕈样霉菌病HTLV-I相关成人T细胞白血病/淋巴瘤部分T细胞急性淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤*在淋巴母细胞性淋巴瘤中,T8抗原也可存在于肿瘤细胞。,(3)CD8,33kD,表达于人抑制/细胞毒T细胞周围淋巴组织中CD8T细胞(滤泡间区域)仅占T细胞15-20%骨髓和胃肠道上皮80%T细胞是CD8大部
15、分皮质胸腺细胞和约30%髓质胸腺细胞CD8,(四)NK细胞1.CD56(NCAM-1),神经细胞粘附分子(NCAM)表达于:大部分神经外胚层源性细胞株,组织和肿瘤(视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质细胞瘤和神经母细胞瘤)中胚层源性肿瘤:横纹肌肉瘤NK细胞,2.CD57,110kD表达于7-35%正常外周血淋巴细胞:NK细胞CD8外周血抑制/细胞毒T细胞也表达于部分神经组织粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细胞阴性。,3.CD16(Leu-11),正常细胞:NK细胞粒细胞表达于许多NK细胞增生性疾病,(五)粒细胞和单核吞噬细胞 1.CD11c(Leu-M5),正常细胞:表达于粒单核细胞,肿瘤:毛细胞
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