芳香酸及其酯类药物的分析.ppt

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1、第六章 芳酸及其酯类药物的分析,基本要求,一、掌握本类药物的鉴别反应。掌握本类药物特殊杂质检查方法。掌握本类药物含量测定方法。二、了解本类药物的结构特征和理化性质。了解本类药物体内分析方法。,结构分析,包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐,共同点：苯环、羧基,不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）,性质,（一）物理性质,（1）固体 具有一定的熔点,（2）溶解性 游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。,（二）化学性质,1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强度的酸或弱酸；,X、NO2、OH等吸电子取代基存在使酸性增强,CH3、NH2

2、等斥电子取代基存在使酸性减弱,邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强,2.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。,3.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。,4.UV,5.IR,6.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,7.色谱法制剂分析

3、,常见的芳酸及其酯类药物,水杨酸类,贝诺酯,1.酸性 SA(PKa2.95)、ASA(PKa3.49)、双水杨酯均有酸性。2.溶解性:均为固体，有一定溶点。除钠盐溶于水，其余不溶。3.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。4.芳伯氨基和酚羟基特性：5.水解特性：ASA、双水杨酯及其制剂应检查水杨酸,对氨基水 杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。,主要理化性质,苯甲酸类,氨甲苯酸,羟苯乙酯,丙磺舒（pKa3.4）,布美他尼,主要理化性质,1.溶解性:均为固体，有一定溶点。除钠盐溶于水，其余不溶。2.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。3.具有酚

4、羟基特性：4.分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸；丙磺舒分解为SO2 5.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基，可用 NaOH直接滴定测定其含量。,其他芳酸类药物,氯贝丁酯,酚磺乙胺,1.溶解性：水中不溶，有机溶剂溶解，氯贝丁酯为液 体；布洛芬为固体，有一定熔点。2.UV和IR特征吸收光谱：基于分子结构中具有苯环和 特征基团。,鉴别试验,一、FeCl3反应,具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物,直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、水杨酸二乙胺、酚磺乙胺、对乙酰氨基酚,水杨酸 ChP（2005）鉴别（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,间接：阿司匹林、贝诺酯,阿司匹林

5、ChP（2005）鉴别（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,水杨酸类药物与三氯化铁试液反应结果 药物 试验方法 结果水杨酸 本品水溶液，与三氯化铁试液反应 紫堇色水杨酸二乙胺本品水溶液，与三氯化铁试液反应 紫堇色阿司匹林 加热水解后，与三氯化铁试液反应 紫堇色对氨基水杨酸钠 加稀盐酸呈酸性后，与三氯化铁试液反应 紫红色贝诺酯 加氢氧化钠试液煮沸水解后，与三氯化铁试液反应 紫堇色双水杨酯 本品稀溶液，与三氯化铁试液反应 紫色,二、重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁

6、卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯,三、水解反应,+,OH,1.分解产物的反应,苯甲酸盐,四、特殊反应,2.与汞离子及茚三酮反应,3.氧化反应 含硫的药物,4.异羟肟酸铁反应,六、IR,五、UV,特殊杂质检查,一、阿司匹林中特殊杂质的检查,（一）合成工艺,特殊杂质检查,（二）检查,1.溶液澄清度,特殊杂质检查,2.水杨酸的检查,（1）杂质来源 原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）,（2）检查方法 对照法 反应原理 三氯化铁反应 限量 原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）,其他杂质：

7、乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）,二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查,1.杂质来源 原料残存、脱羧产生,2.检查方法 ChP（2005）含量测定法（双相滴定法）。,利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量。,USP（24）离子对HPLC法（内标法）,三、双水杨酯中有关物质的检查 BP（1998）TLC 水杨酸：杂质对照品法有关物质：高低浓度对比法,1.杂质对照品法,方法：,供试品供试品溶液,杂质对照品对照品溶液,判断：供试品中所含杂质斑点大小及颜色不得超过

8、相应的杂质对照斑点,优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强；,缺点：需要杂质对照品。,2.高低浓度对比法,方法：,判断：,供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）,控制杂质斑点个数，控制杂质种类,缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度差、直观性差。,优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；,四、羟苯乙酯中有关物质的检查BP（1998）反相TLC 高低浓度对比法,五、酚磺乙胺中氢醌的检查 ChP（2000）HPLC法,六、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查 GC,含量测定,一、中和法,1.直接滴定法 pKa36,

9、阿司匹林 ChP（2005）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,（1）测定方法及计算 Ka=3.2710-4 反应摩尔比为11,（2）讨论 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言,优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定,2.水解后剩余滴定法 酯的一般含量测定方法,阿司

10、匹林,USP（24）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O,剩余滴定：,水解：,反应摩尔比为11 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰,羟苯乙酯含量测定亦可用此法,3.两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯,如阿司匹林片的测定：,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量

11、（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,第一步 中和,第二步 水解后剩余滴定,水解：,2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O 反应摩尔比为21 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,剩余滴定：

12、,氯贝丁酯：消除供试品中共存的酸性杂质,片剂含量测定结果的计算,剩余滴定法,含量计算,ASA的标示量百分含量=,(V0-V)*C实际*18.02*10-3,0.05 Ws,*,W,标示量,*100%,讨论:1)加中性乙醇,助溶,防止水解.2)空白实验,因为碱液受热时易吸收二氧化碳,形成碳酸钠,碳酸钠对酚酞不显红色.,?,?,3.双相滴定法（芳酸碱金属盐）,如苯甲酸钠 ChP(2005),溶剂：水乙醚,取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤

13、，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。,乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。,优点：消除了反应产物的干扰,5.非水碱量法 芳酸碱金属盐 冰醋酸作溶剂 高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂 结晶紫作指示剂指示终点 或电位法指示终点,6.缩合后酸碱滴定法 氨甲苯酸 加入甲醛使与氨甲苯酸作用，生成Schiff碱后，用碱液滴定,氨甲苯酸 取本品

14、约0.3g，精密称定，加水30ml，加热使溶解，放冷，加甲醛与甲酚红指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显淡紫色，并将滴定结果用空白试液校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于15.12mg的C8H9NO2。,二、亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物,三、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法酚磺乙胺注射液 ChP（2005）,精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长

15、处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（）为159计算含量。,注射液含量测定结果的计算,紫外分光光度法 吸收系数法,2.过滤后的紫外分光光度法 丙磺舒片,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9100）4m1，置70水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。,紫外分光光度法

16、 吸收系数法,3.柱分配色谱紫外分光光度法USP（24）阿司匹林胶囊 可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3 SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3 AAS、SA保留冰醋酸洗脱，280nm测总量,4.离子交换后紫外分光光度法 氯贝丁酯 强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，对照法定量测定氯贝丁酯含量,原料药 对照法,四、HPLC 1.阿司匹林栓剂 ChP（2000）离子抑制色谱法 内标法定量,2.对氨基水杨酸钠 USP（24）离子对反相HPLC 内标法定量,3.丙磺舒 USP（24）离子抑制色谱法 外标法定量,4.酚磺乙胺

17、ChP（2000）正相HPLC 内标法定量,练 习 题1.两步滴定法测定阿司匹林片是因为：A.片剂中有其他酸性物质B.片剂中有其他碱性物质C.需用碱定量水解D.阿司匹林具有酸碱两性E.使滴定终点明显,2.某药与碳酸钠共热，酸化后有白色沉淀产生，加乙醇和硫酸，共热，有香气产生，此药可能是：A、对氨基水杨酸 B、对氨基苯甲酸 C、苯甲酸钠 D、乙酰水杨酸E、普鲁卡因,3.苯甲酸钠的含量测定，中国药典（2005年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为A.水乙醇 B.水冰醋酸C.水氯仿 D.水乙醚E.水丙酮,4.在本类药物的酸碱滴定中，要求采用中性乙醇做溶剂，所谓“中性”是指（B）A、PH=7 B、对

18、所用指示剂显中性C、除去酸性杂质的乙醇 D、对甲基橙显中性E、相对被测物而言,5.121125含量测定方法（中国药典1995年版）为A.直接中和滴定法 B.两步滴定法C.两者均可 D.两者均不可121阿司匹林片122阿司匹林原料药123.对氨基水杨酸钠124.阿司匹林栓剂125.阿司匹林肠溶剂,(B),(A),(D),(D),(B),6.126130A两步酸碱滴定法 B直接酸碱滴定法C两者皆是 D两者皆不是126.苯甲酸钠的测定127.氯贝丁酯的测定128.盐酸的测定129.酸碱滴定法130.阿司匹林片的测定,(D),(A),(B),(C),(A),6.对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是A.水杨酸B.间氨基酚C.氨基酚D.苯酚E.苯胺,7.能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有 A苯甲酸钠 B水杨酸 C对乙酰氨基酚 D氢化可的松 E丙酸睾酮,8.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是 A.防止反应产物的干扰 B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C.消除酸碱性杂质的干扰 D.防止样品水解 E.以上都不对,9.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是 A.测定阿司匹林含量 B.消除共存酸性物质的干扰 C.使阿司匹林反应完全 D.便于观测终点 E.有利于第二步滴定,