动物生理学实验教学课件.ppt
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1、2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,青岛农业大学动物生理学实验教学课件,EXPERIMENT OF ANIMAL PHYSIOLOGY,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目录 INDEX,EXP1.肠系膜血流显微观察EXP2.坐骨神经-腓肠肌标本制备EXP3.蛙心收缩记录和心肌特性EXP4.骨骼肌收缩特性EXP5.离体肠段运动描记EXP6.离体蛙心灌流EXP7.神经动作电位、肌电和肌张力同步记录EXP8.动脉血压的间接测定EXP9.红细胞显微计数EXP10.血红蛋白测定EXP11.红细胞的凝集与ABO血型鉴定EXP12.人体心电图描记EXP13.动脉血压的直接
2、测定及影响因素动物生理学试验实验设计,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,肠系膜血流显微观察,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,观察蛙肠系膜血管内血液的流动,了解外周血管的血流特点及其影响因素,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,肠系膜薄而透明,可观察血流情况及神经递质对内脏血管舒缩的作用。动脉血管内血液由主干流向分支;静脉血管内血液由分支流向主干;毛细血管内血细胞往往单排流动。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,仪器材料,蟾蜍蛙类手术器械、显微镜、任氏液、
3、0.01%去甲肾上腺素溶液。具体请以每组清单为准,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,方法步骤,1、实验准备:损毁蟾蜍的脑、脊髓,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,先背位固定,剪开腹腔,找到肠系膜。,然后腹位固定四肢;拉出肠系膜,用大头针将肠系膜固定在蛙板孔上。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,2、实验观察项目,(1)动脉、静脉、毛细血管内血液流动特点。(2)机械刺激的影响。(3)肾上腺素、组织胺的影响。实验报告描绘观察到的现象。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意事项,1、固定肠系膜避免撕裂;2、大头针斜插固定,以免
4、遮挡物镜;3、注意不要污染显微镜。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,思考题,1、根据观察结果,归纳交感神经及其递质对内脏血管活动的作用。2、如何判断动脉血管和静脉血管?3、微循环是如何调节的?,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,坐骨神经-腓肠肌标本制备,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,学习并掌握两栖类神经-肌肉标本的制备方法;观察肌肉的收缩现象。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,两栖类神经肌肉标本体外保持活性的条件相对简单,操作容易,其兴奋、收缩特
5、性与哺乳动物的类似。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,仪器材料,蟾蜍。蛙毁脊针、蛙类手术器械、玻璃分针、锌铜弓、任氏液等。具体请以每组清单为准,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,方法步骤,1、损毁脑脊髓。2、在两前肢附近剪断脊柱,去掉内脏,剥离皮肤,制备双后肢标本。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,3、从正中间剪开后肢。4、分离坐骨神经。5、分离腓肠肌。6、活性检验。,用线结扎8cm左右,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意事项,1、剪刀的用法:粗剪刀用于剪骨骼、皮肤等,大剪刀用于剪肌肉、眼科剪用于剪神经、血管等纤薄
6、组织。2、神经组织避免牵拉及金属器械夹持。3、制备过程中用任氏液保持神经肌肉的湿润。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,思考题,1、兴奋是如何从神经传递到肌肉的?2、肌肉收缩是钙离子有什么作用?3、神经兴奋与肌肉收缩如何保证是一对一的关系?,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,蛙心收缩记录和心肌特性,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,了解心肌的某些特性并掌握蛙心收缩的记录方法。观察心肌的期前收缩与代偿间歇现象。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,心肌的绝对
7、不应期长,在心肌的相对不应期之后、节律性兴奋传来之前给予单个阈上刺激,可引起一次额外收缩,其后便产生一个较长的代偿间歇。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,仪器材料,蟾蜍。RM6240B信号采集处理系统、张力换能器、蛙心刺激电极、铁支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板、蛙针、手术器械、丝线、小烧杯、滴管、大头针、纱布,任氏液。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,方法步骤,1、实验准备:用蛙针破坏蟾蜍的脑与脊髓,暴露心脏,用眼科剪剪开心包膜。将连有丝线的蛙心夹在心室舒张时夹住心尖,丝线另一端连张力换能器。换能器接RM6240B信号采集处理系统。,2023/9/27,生命
8、科学学院动物生理学教学课件,2、实验操作,(1)打开仪器开关(背面)(2)双击电脑桌面“RM6240B”图标(3)打开“实验”下拉菜单,找到相应实验项目:“循环”-“期前收缩-代偿间歇”(4)点击“开始记录”图标单击此处观看示范,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,3、观察项目,(1)描记正常心搏活动曲线。(2)在心室收缩期给予中等强度的单个刺激,观察能否引起心脏活动的改变?(3)期前收缩和代偿间歇。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意事项,1、实验中经常给蛙心滴加任氏液,以防心肌组织干燥。2、引起期前收缩后,须间隔一段时间再给予心脏第二次刺激。3、固定电
9、极时确保电极接触心室璧,并且不得影响心室的收缩4、实验成功的关键在于把握施加刺激的时间。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,思考题,1、心肌的绝对不应期长有何生理意义?2、心肌收缩与钙离子的关系?3、心肌受到连续刺激后会发生强直收缩吗?,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,骨骼肌收缩特性,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,熟悉神经肌肉标本的制备方法理解刺激的强度、频率对骨骼肌收缩的影响。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,骨骼肌兴奋性较高,不应期短,可以发
10、生收缩的叠加;刺激的频率增大到一定数值时,发生强直收缩。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,仪器材料,蟾蜍。蛙类手术器械,任氏液,生理数据采集系统、张力换能器、肌槽。具体以清单为准。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,方法步骤,1、神经肌肉标本的制备。注意问题:(1)保留股骨(2)结扎牢固,防止滑脱(3)肌肉、神经保持湿润,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,2、联结仪器(教师示范),(1)股骨用肌槽的螺丝固定;(2)结扎线联结于张力换能器;(小心!切勿用力牵拉换能器的弹簧片)(3)神经搭在电极上。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学
11、教学课件,3、观察项目,(1)单收缩(2)不完全强直收缩(3)完全强直收缩操作系统:神经肌肉刺激频率典型实验点击观看示范,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意事项,1、制备标本过程中,应随时用任氏液润湿神经和肌肉,防止干燥。2、游离神经时,切勿用玻璃分针逆向剥离,以防损伤神经干,又要避免金属器械对神经的不必要触碰。3、请注意保存实验结果。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,思考题,1、骨骼肌完全强制收缩时,其细胞膜上的动作电位是怎样的?2、骨骼肌收缩一段时间后为什么会收缩能力下降?3、影响骨骼肌收缩的因素有哪些?,2023/9/27,生命科学学院动物生理学
12、教学课件,离体肠段运动描记,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,观察平滑肌运动的一般特性,了解某些理化因素对平滑肌运动的影响。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,肠道平滑肌具有自律性,离体肠段在适宜条件下可保持自律性收缩的特性,其收缩频率和幅度受到某些理化因素的影响。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,仪器材料,兔。哺乳动物手术器械、注射器、离体器官恒温装置、充气装置、张力换能器、RM6240B生理信号采集系统肾上腺素、乙酰胆碱等。具体以试验台贴出的清单为准,2023/9/
13、27,生命科学学院动物生理学教学课件,方法步骤,1、实验准备(1)恒温装置预热 38 a.台氏液 b.麦氏浴皿,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意:必须在完成预热工作后方可进行本部分操作!,(2)离体肠段制备 快速处死兔子(击打延髓或耳缘静脉注射空气,一定要迅速!)迅速剖开腹腔 找出十二指肠,挤出食糜,剪成2cm的肠段,立即放入38台氏液中。关键:操作迅速,否则影响实验结果!,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,(3)联结仪器(等老师来示范),注意:肠段浸入台氏液;通气,控制通气速度。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,2、实验操作,(1
14、)打开仪器开关(背面)(2)双击电脑桌面“RM6240B”图标(3)打开“实验”下拉菜单,找到相应实验项目(4)点击“开始记录”图标单击此处观看示范,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,3、观察项目,(1)正常运动曲线。(2)温度的影响。(3)乙酰胆碱的影响。(4)肾上腺素的影响。(5)钙离子(6)酸(7)碱,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,注意事项,1.标本安装好后,应在新鲜38台氏液中稳定510min,有收缩活动时即可开始实验。2.注意控制温度。加药前,要先准备好更换用的新鲜38台氏液,观察到实验结果后,应立即用38台氏液冲洗,待肠段活动恢复正常后,再进
15、行下一个实验项目。3.平滑肌反应较慢,若效果不明显,可以增补剂量,但要防止一次性加药过量。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,思考题,1、各种药物对平滑肌运动的影响机理。2、实验过程中为什么要不断通气?3、滴加药物的顺序有什么要求?,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,离体蛙心灌流,请务必认真学习本课件然后开始实验操作!,返回目录,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,目的要求,掌握离体蛙心制备和灌流方法;了解体液因素对蛙心收缩的影响。,2023/9/27,生命科学学院动物生理学教学课件,基本原理,心肌的收缩强度、频率等受肾上腺素、乙酰胆碱等激素
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