发酵工程课件第二章.ppt

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1、第二章发酵设备,本章要求,了解发酵设备的种类；掌握通气式机械搅拌发酵罐的结构掌握通气式机械搅拌发酵罐的相关操作,发酵工程实验室包括：,无菌室,准备室,湿地板区,通用实验区,分析区,接种操作,菌种培养等,发酵,发酵液的分析,配制培养基等,无菌室,高度：一人加一手，便于消毒清扫；墙面涂上漆，最好不锈钢材料，光滑；顶上安紫外灯，高出操作台30cm,工作台,超净工作台,超净台是80年代开始问世的一种防止污染的装置。其主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃。通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。而且在接近外部的一方有一道高

2、速流动的气帘防止外部带菌空气进入。,操作人员的穿着,准备室,天平、灭菌锅、培养箱、pH计,摇床,灭菌消毒：KMnO4和甲醛熏蒸，比例根据污染程度而定；注意安全，关好窗防止MnO2跑掉。,往复式供氧比较好，但培养液容易溅起、易污染旋转式溶解氧较少，培养液不容易溅起,通用试验区,培养基的配制、细胞干重以及普通的测定（粘度等）,湿地板区,发酵罐、蒸馏装置、灭菌设施等,地板可以承载一定的负荷,分析区,气相色谱仪、液相色谱仪、分光光度计等,避免潮湿、振动，保证读数的准确性和仪器的使用寿命,固体,量少 浅盘，帘子量多 厚层通风发酵设备,液体,厌氧发酵好氧发酵,小试机械搅拌通气式发酵罐（实验室用，1L-50

3、L）,中试机械搅拌通气式发酵罐（50L-5000L）,一、通用式机械搅拌发酵罐结构,设备主要部件包括：罐身电机搅拌轴轴封消泡器搅拌器联轴器中间轴承空气吹泡管（或空气喷射器）挡板冷却（传热）装置人孔以及视镜其它,区别：1、罐径小于1米的小型罐，罐顶与罐身采用法兰连接，大中型发酵罐为整体焊接；2、手孔-人孔、梯子3、5吨以下罐，用夹套加热和冷却，5吨以上罐，用罐内蛇管加热和冷却；4、小型罐有挡板，大中型罐可以蛇管作为挡板；5、连轴器,发酵罐的基本条件,机械搅拌发酵罐在工厂广泛采用。它是利用机械搅拌器的作用，使空气和发酵液充分混合，提高发酵液的溶解氧，供给微生物生长繁殖代谢过程所需的氧。,发酵罐应具

4、有适宜的径高比（高/径比约为2.54）结构严密，耐腐蚀，光滑，附件少，无死角，可反复灭菌，脱落的金属要少要有良好的气-液、液-固混合性能（使细胞能获得营养）要尽量少的搅拌和通气的动力消耗良好的热交换性能，足够的冷却面积良好的消泡性能有必要、可靠的检测控制性能耐压，4.5kg/cm2（蒸气压一般 34kg/cm2）,发酵罐罐体的尺寸比例,罐体各部分的尺寸有一定比例，高/径比约为2.54。搅拌器直径约为1/3D。发酵罐通常装有两组搅拌器，两组搅拌器的间距S约为搅拌器直径的3倍。对于大型发酵罐以及液体深度HL较高的，可安装三组或三组以上的搅拌桨叶。最下面一组搅拌器与风管出口较接近为好，与罐底的距离C

5、一般等于搅拌器直径D，不宜小于0.8D，否则会影响液体的循环。,1.罐体,罐体由圆柱体或碟形封头焊接而成，材料为碳钢或不锈钢，大型发酵罐可用衬不锈钢或复合不锈钢制成，衬里用的不锈钢厚度为23mm。发酵罐的公称容积（V0）为罐圆筒部分容积+底封头容积，即全体积；装料体积V约为，其中V/V0为装料系数。为了满足工艺要求，罐需要承受一定压力，通常灭菌压力为0.25MPa。生产用的发酵罐容积有20m3，30m3，5060m3，75m3，150m3以至500m3。罐壁厚度决定于罐径及罐压的大小。小型发酵罐罐顶和罐身用法兰连接，为了便于清洗，小型发酵罐罐顶设有清洗用的手孔。中大型发酵罐装设有快开人孔。罐顶

6、装有视镜及灯镜、进料管、补料管、排气管、接种管和压力表接管，排气管尽可能靠近罐顶中心位置。罐身上有冷却水进出管、进空气管、温度计管和测检仪表接口。取样管可装在罐侧或罐顶，视操作方便而定。在罐体上的管路越少越好，进料口、补料口和接种口可合为一个接管口。放料可利用通风管压出。,换热夹套：用于小型罐，优点是结构简单，加工方便，易清洗，缺点是传热壁较厚，传热系数较低；立式蛇管：4-6组，优点是管内水的流速大，传热系数高，另外可兼起挡板的作用，缺点是立式蛇管体积约占发酵罐1.5%容积，蛇管一旦发生泄露，将造成整个罐批的发酵液染菌，且蛇管也给罐体的清洗带来不便；半圆形外蛇管：安装于罐外，优点是提高了发酵罐

7、的容积，罐体容易清洗，增强罐体强度，因而可以降低罐体壁厚，降低罐体造价。,2.传热系统,3.搅拌器和挡板 搅拌器,（1）搅拌（器）作用,产生强大的总体流动（宏观均匀，翻动），产生强烈的湍动（微观均匀，剪切）；打碎空气气泡，增加气液接触界面以提高气液间的传质效率；使发酵液充分混和，液体中的固形物料保持悬浮状态。,（2）搅拌产生三种基本流型,切向流（应加以抑制，可通过加入挡板来削弱）轴向流径向流,三种基本流型同时存在,（对混合起主要作用）,（3）搅拌叶的类型,挡板的作用改变液流的方向，将切向流改为轴向流，防止液面中央产生漩涡，促使液体激烈翻动，提高溶解氧。挡板宽度约为（0.10.12）D；装设46

8、块挡板，可满足全挡板条件。竖立的蛇管、列管、排管也可以起挡板作用；挡板的长度自液面起至罐底为止。挡板与罐壁之间的距离为（1/5 1/8）D，避免形成死角，防止物料与菌体堆积。,全挡板条件在一定转速下，再在搅拌罐内增加挡板或其他附件，搅拌功率仍保持不变而漩涡基本消失。能达到消除液面漩涡的最低条件即全挡板条件。,3.搅拌器和挡板 挡板,4.消泡器,5.轴封,轴封作用：使罐顶或罐底与轴之间的缝隙加以密封，防止泄漏和染菌。常用的轴封有填料函轴封和端面轴封（机械轴封）两种。,轴封部位,（1）填料函,填料函轴封是由填料箱体，填料底衬套，填料压盖和压紧螺栓等零件构成，使旋转轴达到密封的效果。,又称机械轴封，

9、靠弹性元件（弹簧、波纹管等）的压力使垂直于轴线的动环和静环表面紧密地相互贴合，并作相对转动而达到密封。由弹性元件、动环和静环组成。动环固定在轴上，随轴一起转动。静环装在壳体上。动环依靠弹簧的压力与静环紧密接触，阻止流体泄露。由两个环的端面互相密切贴合而达到密封的目的。动环的硬度应比静环大，动环的材料可用铸铁、硬质合金、高合金钢等，静环最常用浸渍石墨或填充聚四氟乙烯。,（2）端面轴封,依靠三个密封点达到完全密封：A、动环与静环 在相对运动的动环和静环之间的接触面（端面），两端面必须高度光洁平直，这是相对旋转密封。端面间有层极薄的液体，起到密封作用。,B、静环与压盖之间的密封 用有弹性的辅助密封圈

10、来防止液体从静环与压盖之间泄露，这是静密封。C、动环与轴之间的密封 同样是用辅助密封圈来防止液体从动环与轴之间泄露，这也是一个相对静止的密封。,优点：,清洁；密封可靠，使用时间较长，不会泄漏；无死角，可防止杂菌污染；寿命长，质量好的25年不需修理；摩擦功率耗损小，约为填料函轴封的10-50%；轴或轴套不受磨损，对轴的震动敏感性小；对轴的精度和光洁度没有填料函要求严格。,缺点：,结构复杂，需要一定的加工精度和安装技术。,6.仪表,工艺参数,温度压力空气流量液位pH值溶解氧,（1）压力表,弯管液封，上面的杂菌不会掉入下面管道中。,阀门三通，使弯管灭菌彻底,仪表精度,A 测量值A0 真实值Q 仪表测

11、量范围（量程）,精度相同，量程越窄越精确；读数在02/3量程；,如种子罐、发酵罐工作压力1 kg/cm2，蒸气压力23kg/cm2，配量程为67kg/cm2的压力表,（2）温度计,（3）流量计,常用的水银、酒精温度计,0100，酒精温度计100，水银温度计,转子流量计,二、发酵罐的灭菌,（在夹套中）关好空气阀，蒸气上进下出，冲蒸气，压力大于2 kg/cm2（120），最好是45 kg/cm2（160）。当罐内温度80，进蒸气口（蒸气阀）关掉，出蒸气口（排气阀）关小。打开空气阀，蒸气直接进罐，121，2030min。升温过程中，从80100上升很快，大于100后温度上升很慢，到118时就开始减小

12、蒸汽通入量并开始计时，计时25min时立即关掉蒸气阀。关掉蒸气阀后通入无菌空气，使罐内一直保持正压（高于大气压，空气不会倒灌入罐内）。（在夹套中）立即加自来水冷却，从下向上，使温度尽快降到55左右，到3738时关掉水，也有缓冲性。,因为有缓冲性，蒸气会冲到121。,在80以上冲入蒸气不容易产生冷凝水，罐内体积不会增加很大，培养基不会被稀释很大。,过程,升温降温时注意缓冲性灭菌时蒸气先从夹套预热，如直接进罐，蒸气冷凝，产生冷凝水、无法接种、容易污染冬天温度低、散热快，低于30需加温。加温时蒸气由下进入、从上而出。如从2530，加热到28时即可关蒸气阀微生物代谢发酵时产生大量热，使温度大于30，需

13、考虑适当降温。冷却时冷却水由下进入、从上而出，注意缓冲性，不要降至30才关小型罐 50L7吨用夹套系统冷却；大型罐7吨以上，用冷却管（盘肠、列管系统）,二、发酵罐的灭菌,注意点,三、发酵罐的管路和死角的消除,1.尽量减少管路,单罐多罐,发酵罐的出口越少越好，出料口和进气管可以合并接种管、消泡管、补料管可以合并排气管不能合并，易引起交叉污染,出料前后都要消毒，用活（流动）蒸气消毒出料管不能合并,三、发酵罐的管路和死角的消除,2.消灭死角,丝口连接处改用法兰连接焊接部位：堆焊、电焊、氧焊、鱼鳞焊，选用鱼鳞焊管道转弯有弧度放料管、取料管的阀腔处装小阀,3.消灭渗漏,三、发酵罐的管路和死角的消除,罐体

14、穿孔 不锈钢冷却管产生裂缝 定期更换垫圈（法兰连接）松脱 拧紧轴封渗漏 轴绝对垂直焊缝渗漏阀杆,四、发酵罐的一些操作,1.接种,接种的三种方法：,火圈直接倒种注射器接种压力差接种,小罐,接种口用火圈杀菌；橡胶口在火圈上过一下，套入接种口；打开进口阀、进气阀打开，排气阀关闭，罐内升压至1kg/cm2；突然打开排气阀，罐内压力下降至0.5kg/cm2，瓶内种子液进入罐内；一次没有接完再重复。,注意：,接种瓶密封、耐高压；接种瓶口上要旋紧、塞子塞紧，防止漏气染菌；进气口压力表一定不能超过1kg/cm2（否则接种瓶会爆炸）；一次接不完反复两三次直至全部种子液接入罐内为止。,2.移种,四、发酵罐的一些操

15、作,种子罐发酵罐,移种管灭菌：进入罐的管道阀门要关好，移种管中压力2kg/cm2，灭菌15min，关蒸气种子罐上进气阀打开，排气阀关闭，压力升至2kg/cm2发酵罐中保持正压，比空气高一点，排气阀打开，进气阀关小，0.5kg/cm2打开通向罐的阀门，两罐相通，因压力差，菌液进入发酵罐关掉通向罐的两个阀门，移种管灭菌,3.取样,四、发酵罐的一些操作,取样阀关紧，打开蒸气阀，再打开阀门，让蒸气冲（消毒杀菌510min）；关上蒸气阀，打开取样阀，培养液因压力作用流出；取样后关闭取样阀，打开蒸气阀，通蒸气再次消毒，关闭阀门和。,四、发酵罐的一些操作,4.进料和出料,发酵罐上的人孔用于加料和维修。出料管可以和进气管合并。,一般装料系数为0.6，占罐总体积的2/3。,