公开课动物细胞培养.ppt

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1、动物细胞工程,动物细胞工程常用的技术手段：,动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体,思考：,植物细胞工程常用的技术手段有哪些？,植物组织培养、植物体细胞杂交,强调：,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。,烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？,取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植,学习目标：【知识能力】1、动物细胞培养的过程、条件及应用 2、应用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础【情感态度与价值观】1、讨论细胞工程技术的社会意义 2、认同细胞学基础理论研究与技术

2、开发之间的关系,一、动物细胞培养,概念：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。,一、动物细胞培养,原理：是细胞增殖（有丝分裂）,一、动物细胞培养,阅读P53-55“哺乳动物细胞培养技术”并思考：,1、动物细胞生长特点是什么？2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？3、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？4、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？5、动物细胞培养的条件有哪些？6、简述动物细胞培养的操作过程,1、动物细胞生长特点：,细胞贴壁：悬液中分散的

3、细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。,接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。,接触抑制,动物细胞生长特点,部分细胞突变，获得不死性，向癌细胞方向发展，糖蛋白减少，失去接触抑制（如肿瘤细胞）。,接触抑制,动物组织块,细胞悬液,原代培养,传代培养,胰蛋白酶处理分散成单个细胞,幼龄动物的器官组织；动物胚胎,加入培养液,用胰蛋白酶等处理贴壁细胞,适宜条件,2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的

4、细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。,一、动物细胞培养,动物组织块,细胞悬液,原代培养,传代培养,胰蛋白酶处理分散成单个细胞,幼龄动物的器官组织；动物胚胎,加入培养液,用胰蛋白酶等处理贴壁细胞,适宜条件,3、为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？,分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物。,一、动物细胞培养,4、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么？胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？,细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。,一、动物细胞培养,胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰

5、蛋白酶的消化时间。,动物组织块,细胞悬液,原代培养,传代培养,胰蛋白酶处理分散成单个细胞,幼龄动物的器官组织；动物胚胎,加入培养液,用胰蛋白酶等处理贴壁细胞,适宜条件,5、动物细胞培养条件,1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH 36.5+（-）0.5度4、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）,保证细胞顺利的生长增殖,一、动物细胞培养,一、动物细胞培养,6、过程：,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液,胰蛋白酶,10代细胞,原代培养,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,（分解弹性纤维

6、）,从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。,将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，一般培养的第11代细胞与传40代或50代称为传代培养。,用胰蛋白酶等处理贴壁细胞,植物组织培养和动物细胞培养的比较,细胞的全能性,细胞增殖,固体培养基,液体培养基,蔗糖 植物激素,葡萄糖 动物血清,植物体,细胞株、细胞系,快速繁殖、培育无病毒植株,获得细胞或细胞分泌蛋白,动物细胞培养应用：.大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；.检测有毒物质，判断某种物质的毒性；.培养基因工程中的受体细胞,1.

7、用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A都需用培养箱 B都须用液体培养基 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性,C,巩固练习：,2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株,A,3、动物细胞工程技术的基础是A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,D,4、细胞株的特点是A遗传物质没有改变，可以无限传代B遗传物质发生改变，不可无限传代C遗传物质没有改变，不可无限传代D遗传物质发生改变，且有

8、癌变特点，可以无限传代 5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系,C,D,6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强,D,回答下列有关动物细胞培养的问题：在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。,相互接触,单层,胰蛋白酶,衰老甚至死亡,接触抑制,不死性,降低,减少,