植物组织中超氧物歧化酶活性的测定.ppt

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植物组织中超氧物歧化酶活性的测定,一、实验目的,掌握SOD酶活性测定方法。掌握分光光度计、光照培养箱、冷冻离心机使用方法。,二、实验原理,因此光还原反应后，反应液蓝色愈深说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。,本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。,核黄素,被氧化物质,还原的核黄素,氧,氮蓝四唑,蓝色的化合物,（560nm）,2+2H+H2O2+O2,SOD,三、实验材料,绿豆芽下胚轴,四、实验步骤,1、酶液提取,2、显色反应,表1 各溶液加入量,3、SOD活性测定,五、实验结果计算,SOD总活性=,单位：酶单位/g鲜重表示；,Ack照光对照管的光密度值；AE样品管的光密度值；V样液总体积（ml）；a测定时样品用量（ml）；W样重（g）；,六、思考题,1、在SOD测定中为什么设暗中和照光两个对照管？2、影响本实验准确性的主要因素是什么？应如何克服？,