综合血球培训2k3k.ppt
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1、BC-2000工程师培训,用户服务部血球组,1、血液基础知识2、临床操作、参数测试性能3、血液分析仪的原理及发展4、参数介绍及安装5、机器硬件讲解6、机器软件和液路7、维护和常见故障处理8、问题讨论和培训考核,培训安排,BC-2000,HC-1022 HC-2022,BC-3000系列 BC-1800系列 BC-2800系列,BC-2200,主要特点,1、白细胞三分群,18项测试参数和3个直方图,全参数彩色液晶显示2、配备中英文两种版本,采用图标和菜单式人机界面,满足不同用户3、内置大容量记忆,可存储10000份样本全参数以及9批次质控全参数4、测试速度大于60个样本/小时,自动加溶血素,自动
2、搅拌5、具有故障自动诊断显示、存储、打印提取功能,方便维修6、可外接打印机,打印宽幅报告单,支持的型号EPSON LQ300K/1600K,血液基础知识,血液不断流动于循环系统之中,与机体的所有部分均发生联系。参与机体的功能活动,维持正常的新陈代谢和内、外环境的平衡。在病理情况下造血系统的各种疾患常影响全身组织器官。反之,各组织和器官的病变也可直接或间接引起血液发生相应的病理变化。因此,血液的检验不仅是诊断各种血液病的主要依据,而且对其他系统疾病的诊断和鉴别也可提供许多重要信息,是临床医学检验中最常用、最重要的基本内容之一。,为什么要做血常规,什么时候需做血常规,许多病人在病因不明时都要做血常
3、规检查 一些已经明确诊断或治疗过程中的患者也需要经常做血常规检查,这是观察治疗效果、用药或停药、继续治疗或停止治疗、疾病复发或痊愈的常用指标 需要特别提到的是,在化疗、放疗及血液病等特殊病人中,血常规检查是个非常重要的和经常需要检测的观察指标,人体血液是由血细胞和血浆两部分组成的红色粘调混悬液。pH值为7.357.45。相对密度(比重)为1.051.060,相对粘度为45。正常成人血量约占体重的7.9,平均血量5L左右 血液功能:输送,协调,调节体温,维持内环境恒定,防御功能,人体血液的特点和功能,人体血液的组成,白细胞 红细胞 血小板,微观血细胞形态,白细胞的作用,白细胞的数目较少,不足红细
4、胞的六百分之一,但白细胞是机体的“卫士”,它能吞噬和清除侵入体内的微生物,细菌被吞噬以后,白细胞释放出多种物质(如自由基、蛋白消化酶等)可以把它消灭。白细胞也是机体的“清道夫”,它能清除体内已经破坏的组织细胞及多种异物碎片,白细胞的参考范围,正常参考值范围:4.010109个/L,白细胞功能保护肌体免受外来侵略(感染),白细胞的组成,粒细胞(75%)单核细胞(5%)淋巴细胞(25%)中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 下图是经过瑞氏染色后的各种白细胞,三分类的定义,该机器的三分类是指对白细胞中的细胞细分成:淋巴细胞、中间细胞(嗜酸、单核、嗜碱)、中性粒细胞溶血素的作用 溶血剂对不同类别白细
5、胞质膜产生不同的反应:淋巴胞质膜内的水溶性胞质释出,膜缩水后包饶细胞核单核立即产生反应粒细胞只产生有限反应 之外,溶血素对红细胞进行破坏,释放出血红蛋白*机器测量到的细胞体积不是细胞的生理体积,淋巴细胞(25%)单核细胞(5%)粒细胞(75%)嗜酸性粒细胞 中性粒细胞 嗜碱性粒细胞,红细胞的作用,红细胞的主要功能有二个,一是运输氧和二氧化碳;二是维持血液的酸碱度 红细胞的功能主要是由血红蛋白来完成的。血液呈现红色,也正是因为红细胞里含有血红蛋白的缘故。,红细胞生理形状,内含血红蛋白(血色素)携带氧气至组织,带出二氧化碳,正常参考值范围:男性:4.05.51012个/L,女性:3.55.0101
6、2个/L,原红细胞 早幼红细胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成熟红细胞,红细胞发育的全过程,血红蛋白的生理形状,正常参考值范围:110160g/L,血红蛋白位于红细胞内,当红细胞的细胞膜被溶血素溶解后,血红蛋白被释放出来血红蛋白的功能携带O2和CO2,血红蛋白是一种结合蛋白,由一种被称为珠蛋白的特殊蛋白质和一种含铁的色素叫亚铁血红素组成,血小板的作用,血小板的作用是参与止血和凝血 在正常的血液循环中,血小板并不与内皮细胞表面或其他细胞发生作用,而是沿着毛细血管内壁排列,维持其完整性 当血管局部受损伤时,血小板的止血兼有机械性的堵塞伤口和生物化学性粘附聚集作用,血小板的参考范围,正常参考值范围:10
7、0300109个/L,血小板的功能参与止血,现场临床操作,1、仪器外部界面、接口介绍2、全血模式临床操作3、预稀释模式临床操作,前功能面板介绍,机器背面硬件接口介绍,机器背面液路接口介绍,稀释器接口介绍,全血、预稀释临床操作,直方图显示区,18参数显示区,仪器状态,当前界面提示,测试模式,菜单,操作信息提示区,联机状态,系统时间,报警信息提示区,开机本底检测,BC-2000当开机后,首先对仪器进行本底(空白)测量,本底测量参数的要求如下:,血样准备注意事项,静脉血的注意事项 推荐用K2EDTA 抗凝剂,含量规定为1.5 2.2 mg/ml血。K2EDTA 是一种比较理想的抗凝剂,它能保持红细胞
8、与白细胞在分类检测与计数时的形态稳定 末梢血的注意事项 稀释样本需放置35分钟,在20分钟之内进行计数;如果计数不可靠,需要做重新计数,或在20分钟之后进行血细胞计数,虽然能出数值,但不能保证分类结果(部分血样也可能不能分类,即显示为*的结果)对事先制备好的稀释液,应避免灰尘混入使测量值产生偏差,全血模式临床操作,1、用稀释器取40ul K2EDTA抗凝血,并擦拭取液管的外部2、取样品杯装稀释器排出的9ml+40ul的第一稀释液(1:225)并充分摇匀3、用稀释器取40ul第一稀释液,并擦拭取液管的外部4、取另一个样品杯装稀释器排出的9ml+40ul的第二稀释液(1:50625)5、将第一稀释
9、液放入WBC杯座上6、将第二稀释液充分摇匀放入RBC杯座上7、按“计数”键开始计数,准备下一份标本8、若做完样本,需将两杯空白稀释液放置于两探头下(*注意这两杯空白稀释液约每做10个样本更换一次),预稀释模式临床操作,1、取样品杯在稀释器上取9ml 稀释液2、用20ul的采血管采末梢血,将其溶入稀释液中并充分摇匀(1:450)3、用稀释器取90ul第一稀释液,并擦拭取液管的外部4、取另一个样品杯装稀释器排出的9ml+90ul的第二稀释液(1:45000)5、将第一稀释液放入WBC杯座上6、将第二稀释液充分摇匀放入RBC杯座上7、按“计数”键开始计数,准备下一份标本8、若做完样本,需将两杯空白稀
10、释液放置于两探头下(*注意这两杯空白稀释液约每做10个样本更换一次),当计数过程中出现孔堵、气泡报警或操作者认为必要,可以对上一血样重新计数。重新计数不再给WBC/HGB 样品杯加入溶血素,也不吸样分析HGB,样本号不变。由于溶血素作用时间过长,WBC 分类结果可能不准确。重计数和计数的区别:1、不加溶血素 2、不混匀 3、不做HGB测量,重计数,参数介绍,BC-2000系列能定量的测量血液中18项参数+3直方图,白细胞数目WBC淋巴细胞数目Lymph#中间细胞数目Mid#中性粒细胞数目Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%,红细胞数目 RBC血红
11、蛋白 HGB红细胞压积 HCT平均红细胞体积 MCV平均红细胞血红蛋白含量 MCH平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC红细胞体积分布宽度 RDW,血小板数目PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积 PCT,BC-2000系列能定量的测量血液中18项参数+3直方图,白细胞数目WBC淋巴细胞数目Lymph#中间细胞数目Mid#中性粒细胞数目Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%,红细胞数目 RBC血红蛋白 HGB红细胞压积 HCT平均红细胞体积 MCV平均红细胞血红蛋白含量 MCH平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC红细胞体积分布宽度 RDW,
12、血小板数目PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积 PCT,直接由机器测量出来的参数,BC-2000系列能定量的测量血液中18项参数+3直方图,白细胞数目WBC淋巴细胞数目Lymph#中间细胞数目Mid#中性粒细胞数目Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%,红细胞数目 RBC血红蛋白 HGB红细胞压积 HCT平均红细胞体积 MCV平均红细胞血红蛋白含量 MCH平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC红细胞体积分布宽度 RDW,血小板数目PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积 PCT,由直方图得出的参数,BC-2000系列能
13、定量的测量血液中18项参数+3直方图,白细胞数目WBC淋巴细胞数目Lymph#中间细胞数目Mid#中性粒细胞数目Gran#淋巴细胞百分比Lymph%中间细胞百分比Mid%中性粒细胞百分比Gran%,红细胞数目 RBC血红蛋白 HGB红细胞压积 HCT平均红细胞体积 MCV平均红细胞血红蛋白含量 MCH平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC红细胞体积分布宽度 RDW,血小板数目PLT平均血小板体积MPV血小板分布宽度PDW血小板压积 PCT,直接计算出来的参数,线性范围和显示范围,重复性指标,Mean:平均值Diff:标准差CV:变异系数,血液分析仪的原理及发展,手工法:经典的显微镜检查用显微镜对细胞
14、进行计数及分析,早期的血球计数分析方法,手工法检验的过程,1、细胞计数(红细胞、白细胞、血小板等血细胞的镜下计数)2、定量血红蛋白3、白细胞分类(瑞氏染色)4、其它:血细胞比积、红细胞形态、嗜酸球计数等,现在的细胞计数方法,50年代,库尔特发明电阻抗法库尔特原理(小孔电阻抗法):根据血细胞是电的不良导体的性质,当它通过微孔时就引起电阻的变化,将电信号的变化检测出来,即可检测到通过微孔的细胞。,COULTER原理的局限,粒子的形状和在通过计数小孔时的姿态对测量到的阻抗影响。使其不能正确地反映被测粒子的实际体积。如两个同体积的粒子,一个是球形,另一个为长椭球形,由于球形粒子的横截面大于长椭球形粒子
15、的横截面,球形粒子测得的体积将明显大于椭球体的体积 只能对粒子的体积测量,不能测量粒子内部的成分,所以应用在计数和体积测量,不适合细胞分类,尽管随着基础医学的发展,高科技在血液分析的应用,各种型号的血液分析仪逐步在国内普及,但显微镜目测检查仍不失为最可靠、最基本的常规血液检查的实验手段 当我们在用仪器检测时碰到特殊的血样,一定要用手工法复查。,手工法的重要性,血球计数仪的发展方向,血常规检验多参数化 目前有的仪器甚至可以提供4050种测量或计算参数。但很多的新参数目前仍不能应用于临床,仅限定在实验室中供研究使用多功能合成扩展 一体化设计不能局限在只进行常规的血细胞分析,需要增加许多扩展功能 检
16、测速度的提高 方法的改进和进展 为了做到更加准确的计数和分析、更多的测定和分析参数必须不断改进检测方法,目前较先进的有激光散射法、射频分析法等应用的方便性,射频法,射频法原理(RF),RF的应用和局限性可以比较有效地区别内容物差异大的细胞种类(如检测影细胞、幼稚细胞);不足是RF反映的是内部核、质、颗粒总体情况,不特异而且不能够反映膜表面信息,在细胞分类方面能力差,如图,射频电导法,实际上也是一种阻抗法。它利用射频可透入细胞内部,细胞核的大小、细胞浆的多少及颗粒的多少使其电导率产生差异,通过测量由于电导率发生变化,而导致的电压变化,可间接测量核的大小及颗粒的多少,激光散射法原理,细胞对激光散射
17、,散射法原理和局限,原理:血细胞的大小、内容物、表面特征存在差异,可以通过前向角反映体积,低角度散射光反映内容物,高角度反映膜表面特征;是和电抗类方法完全不同的方法使用散射光可以增强分类性能和测定体积达60fl以上PLT,不与小RBC混淆;局限是内容物信息还是核、质、颗粒的总体信息,还是不能够实现直接白细胞5分类,综合法,血球计数的原理,库尔特原理实验,视频演示,体积计数原理实验,视频演示,细胞脉冲形态,1、大小相同的细胞以恒定的速度通过微孔形成的脉冲2、大小相同的细胞以不同的速度通过微孔形成的脉冲3、大小不同的细胞以不同的速度通过微孔形成的脉冲,脉冲的放大、阈值调节、甑别和整形、计数,1放大
18、 由于血细胞通过微孔时产生的脉冲信号非常微弱,不能直接触发计数电路因此必须通过放大器,将微伏信号放大为伏级脉冲讯号 2阈值调节 在一定范围内调节参考电压的大小,使计数结果尽可能符合实际 3甄别 通过微孔时各种微粒均可产生相应脉冲信号,信号电平(脉冲幅度)与微粒大小成正比。因此除血细胞外,血细胞碎片、稀释液中杂质微粒均可产生假脉冲,使计数结果偏高。所谓甄别,就是利用甄别器根据阈值调节器提供的参考电压,将低于参考电压的假脉冲去掉,以提高细胞计数的准确性 4整形 经放大和甄别后的细胞脉冲信号波形尚不一致,必须经过整形器调整为形状一致标准的平顶波后,才能触发电路 5计数 血细胞的脉冲信号经过放大、甄别
19、、整形后,送入计数系统。各型血细胞分析仪计数系统通过计算得出计数结果,脉冲与阈值的关系,A、B、C、D表示不同细胞的脉冲,通道4通道3通道2通道1,脉冲与直方图的关系,视频演示,体积分析,经过差异性溶血反应后,仪器分析来自微孔的每个脉冲,并将其排列在256个计数通道中,然后分析出一条曲线,以X轴代表细胞体积,以Y轴代表细胞数量,体积范围淋巴:3085fl中间:85125fl中性粒:125400fl,体积计量原理,HGB测量原理,红细胞经溶血素作用溶解后,血红蛋白被氧化成高铁血红蛋白,它与溶血素中的成分作用,生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)氰化高铁血红蛋白在540nm有最大吸收峰。H
20、iCN法具有操作简单,显色快且稳定,直接定值等优点。是国际血液学标准化委员会(ICSH)的标准方法。缺点:氰化物有剧毒,氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法,环保无氰溶血素,目前针对氰化物的缺陷,我公司推出了SFT无氰化物法,该方法和现有的国际血液学标准委员会的方法一样,具有操作简单,显色快且稳定,直接定值等优点。同时也具备了环保的要求。,BC-2000的HGB的测量方法,光源发射,HGB光接收,HGB计算公式,利用朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律,机器的安装、注意事项,BC-2000的安装,主机包装箱(包括BC-2000主机一台,电源线一根,地线一根,主机与稀释器通信电缆一根,操作手
21、册,保修卡,主机装箱单)稀释器包装箱(BC-100稀释器一台,电源线一根,稀释液传感器组件一根,稀释器装箱单)试剂包装箱(稀释液两桶5.5L/桶,溶血素1L,E-Z液500mL/瓶2瓶,探头清洗液300mL1瓶)附件包装箱(E-Z清洗液瓶盖组件1件,溶血素瓶盖组件1件等)详见各装箱单,安装环境环境应尽可能无尘、无机械振动、无大噪音源和电源干扰,不要靠近电刷型发动机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备。避免阳光直射或置于热源及风源附近。,空间要求BC-2000 放于平台上,BC-100 放在右边以方便操作,平台应足够大以放置试剂。BC-2000 旁边应当空有75 cm 75 cm 48 cm 的
22、空间,用于测试操作和放置试剂,电源要求BC-2000 及BC-100 要求提供220 VAC 电源电压,电源电压波动均要求在10%以内,电源频率为4763Hz。如果电源电压低于192V,稀释器不能正常工作BC-2000 需一个良好接地的电源插座以提供所需的电源,最大功耗为150 瓦。电源插座的零地电压5V。如可能,BC-2000 应连至专用地线上。BC-100 稀释器的最大功耗是50 瓦。,液路连接,E-Z 清洗液的连接 将导液管的一端插入E-Z 液瓶中,顺时针方向旋紧瓶盖。将导液管的另一端液路接头(蓝色)接到BC-2000 背面的“E-Z RINSE”液路接头(蓝色)上,顺时针方向旋紧接头。
23、将与导线相连的BNC 插头插入BC-2000 背面的“E-Z RINSE”传感器BNC插座上,插入后旋紧。,稀释液的连接 导液管的一端插入稀释液(DILUENT)桶中,顺时针方向旋紧桶盖。将稀释液导液管的绿色液路接头连至BC-2000 背面的“DILUENT”液路接头(绿色)上,顺时针方向旋紧。将稀释液导液管的白色液路接头连至BC-100 背面的“DILUENT”液路接头(白色)上,顺时针方向旋紧。将与导线相连的BNC 插头插入BC-2000 背面的“DILUENT”传感器BNC 插座上,插入后旋紧。,溶血素的连接 将溶血素倒入溶血素瓶中将导液管及传感器的一端插入溶血素瓶中,顺时针方向旋紧瓶盖
24、。将溶血素导液管的橙色液路接头连至BC-2000 背面的“LYSE”液路接头(橙色)上,顺时针方向旋紧。将与导线相连的BNC 插头插入BC-2000 背面的“LYSE”传感器BNC 插座上,插入后顺时针方向旋紧。,废液导液管的连接 将导液管的红色液路接头端连至BC-2000 背面的“WASTE”液路接头(红色)上,顺时针方向旋紧。废液桶放置于与BC-2000 同一水平高度或比BC-2000 低的位置。将废液导液管插入废液桶中,BC-100与BC-2000 的连接将一条两端带有DB9 插头的通信线一端插入主机背后的“TO DILUENT”插座上,另一端插入稀释器背后的“TO BC-2000”DB
25、9 通讯接口上。,软件界面使用培训,机 械 结 构,探头结构,白细胞和红细胞探头组件图,白细胞、红细胞模块内部结构图(左视图),模块内部结构图(右视图),稀释器结构(左视)图,稀释器结构(背视)图,硬件结构、板件功能,硬件结构,整机原理框图前放板I/O接口板功率驱动板微打板开关电源板其他板件,可选件(打印机,条码扫描器,键盘等),工控主板,接口板(A/DI/O)(PC104),LCD显示卡(PC104),WBC放大板,RBC/PLT放大板,MTB板(WBC、RBC/PLT),按键板,行程开关稀释器档位溶血素行程 废液满试剂空(3),变压器,开关电源板,滤波器,滤波器,执行部件(泵、阀、电机等)
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