维生素类药物的分析.ppt
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1、第九章,维生素类药物的分析,第一节 概述,维生素:是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。,VitA、D2、D3、E、K1 等,脂溶性,水溶性,VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺,VitM,VitPP,人体需要的重要维生素有6种:维生素A、维生素B1、维生素B2、烟酸、维生素C、维生素D,其他维生素的需要量则较少。除维生素D外,人体不能合成维生素。,公元前3500年-古埃及人发现能防治夜盲症的物质,也就是后来 的维A。1600年-医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。1747年-苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病,也就是后来的维C。1831年-胡萝卜素被发现。1
2、905年-甲状腺肿大被碘治愈。1911年-波兰化学家丰克为维生素命名。1915年-科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的1916年-维生素B被分离出来。1917年-英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病,随后断定这种病是 缺乏维D引起的。,1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A。1922年-维E被发现。1928年-科学家发现维B至少有两种类型。1933年-维E首次用于治疗。1948年-大剂量维C用于治疗炎症。1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症。1954年-自由基与人体老化的关系被揭开。1957年-Q10多酶被发现。1969年-体内超级抗氧化酶被发现。1970年-维C被用于治疗感冒。
3、1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。,返 回,维生素与人的关系,(1)维生素A对人体的生长、视觉和生殖功能都很重要,对神经系统和内分泌有调节作用,同时对上皮组织的生长、增生和分化有重要调节作用,可改善角化过度。可用于治疗维生素A缺乏病、毛发红糠疹、毛发苔癣、鱼鳞病、小儿银屑病、鳞状毛囊角化病、进行性对称性红斑角化症、色素性扁平苔癣、聚合性痤疮等。,(2)维生素D与钙、磷代谢及植物神经系统、内分泌及血管系统有密切关系,具有皮质类固醇激素样作用。可用于治疗异位性皮炎、红斑狼疮、斑秃、聚合性痤疮、泛发性脓疱性银屑病等(3)维生素E可用于治疗冻疮、多形红斑、结节性红斑、单纯性紫癜、
4、色素性紫癜性皮肤病、肢端紫绀症、痛经以及治疗抑郁症。,(4)维生素K促进肝脏合成凝血酶原及血浆因子,与皮质类固醇激素有协同作用。可用于治疗紫癜、慢性荨麻疹、淋巴瘤伴皮肤瘙痒病等。(5)维生素B1可用于治疗湿疹、皮炎、脓皮病、念珠菌病、光感性皮肤病、带状疱疹后遗神经痛、多发性神经炎等。,(6)维生素B2可用于治疗脂溢性皮炎、脂溢性脱发、寻常痤疮、酒渣鼻、寻常须疮、口周湿疹、日光性皮炎等。(7)维生素B6可用于治疗脂溢性皮炎、脂溢性脱发、寻常痤疮、酒渣鼻、湿疹、渗出性银屑病、神经性皮炎、妊娠痒疹、斑秃、唇炎等。,(8)维生素B12是体内多种代谢过程中必需的辅酶,参与核蛋白的合成,甲基的转换以及脂肪
5、和糖的代谢,可用于治疗慢性荨麻疹、接触性皮炎、早期银屑病、扁平疣、水痘、带状疱疹、扁平苔癣、脂溢性皮炎、光感性皮肤病等。(9)维生素C主要用于抗炎和抗衰老,可用于治疗紫癜性皮肤病、湿疹、荨麻疹、黄褐斑、黑变病、特发性斑状色素沉着、早期银屑病、砷剂皮炎等。,-H 维生素A醇-COCH3 维生素A醋酸酯-COC15H31 维生素A棕榈酸酯,R:,第二节 维生素A,为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯,(一),具有UV吸收,存在多种立体异构化合物,维生素A 325.5 100%新维生素Aa 328 75%新维生素Ab 320.5 24%新维生素Ac 310.5 15%异维生素Aa 323 21%异维生素
6、Ab 324 24%,相对生物效价,VitA2,VitA3,易发生脱氢、脱水、聚合反应,鲸醇,或有金属离子存在时氧化,环氧化物,VitA醛,VitA酸,CHCl3,不溶于水易溶于有机溶剂和植物油等,条件 无水无醇,CHCl3,蓝色,紫红,(BP(1998),max为326nm一个吸收峰,max为350390nm三个吸收峰,去水VitA(VitA3),VitA,USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值,BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑,立体异构体氧化产物及光照产物合成中间体去氢维生素A(VitA2)去水维生素A(VitA3),UV法,(一),三点校正法1.条件:(1)杂质的吸收在3103
7、40nm波长范围内呈一条直线,且随波长的增大吸收度减小;(2)物质对光的吸收具有加和性。,2.波长的选择:(1)1 VitA的max(328nm)(2)2 3 分别在1的两侧各选一点,测定对象 VitA醋酸酯,第一法 等波长差法,第二法 等吸收度法(皂化法),测定对象 VitA醇,测定法(1)基本步骤:第一步 A选择选择依据:所选A值中杂质的干扰已基本消除,注意:C 为混合样品的浓度,第二步 求,第三步 求效价,换算因数由纯品计算而得:,第四步:求标示量,方法:,(2),第一法,维生素A醋酸酯,判断 是否在326329nm之间,在326329nm之间,改用第二法,是,否,求算 并与规定值比较,
8、规定值 差值,判断差值是否超过规定值的,有一个以上超过,无超过,计算 A328(校正),用A328计算,第二法,第二法,VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下(平均装量0.08262g/丸)的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀;精密量取2.0ml,置另一20 ml量瓶中,用环己烷稀释至刻度,摇匀。以环己烷为空白,测定最大吸收波长为328nm,并在下列波长处测得吸收度为,A300:0.354A316:0.561A328:0.628A340:0.523A360:0.216,A300/A328:0.555A31
9、6/A328:0.907A328/A328:1.000A340/A328:0.811A360/A328:0.299,求本品中维生素A的含量?,A300/A328:0.564A316/A328:0.893A328/A328:1.000A340/A328:0.833A360/A328:0.344,0.555 0.907 1.000 0.811 0.299,+0.010.01 0+0.02+0.04,=,适用于维生素A醇,(等吸收度法),第一法无法消除杂质干扰时用此法,皂化法、6/7A法,(3)第二法,水溶性,脂溶性,判断max是否在323327nm之间,取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定,计算,是
10、,否,判断 A300/A325 是否大于0.73,是,否,取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定,计算A325(校正),0,3%,3%,三氯化锑比色法,(二),优点 简便 快速,max 618nm620nm,标准曲线法,氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵碱),第二节 维生素B1,HCl,Cl-,维生素B12为水溶性维生素,过量可直接通过尿液排出体外;注射过量的维生素B12可出现哮喘、荨麻疹、湿疹、面部浮肿、寒颤等过敏反应,也可能相发神经兴奋、心前区痛和心悸。,(一),溶解性,1、易溶于水,2、水溶液呈酸性,(二),UV,共轭双键,max=246nm,嘧啶环 伯氨,噻唑环 季铵,1、可与酸成盐,2、与生物
11、碱,3、含量测定 非水碱量法,(三),硫色素反应,(四),碱性,ChP,硫色素,2H,VitB1,H+,H+,H+,H+,S元素反应,Cl-反应,喹那啶红亚甲蓝(紫红天蓝),UV法,(二),片剂、注射剂,=421,(每片)相当于标示量的%=,A=ECL,规格g/片,g/100ml,g,ChP,(每ml)相当于标示量的%=,规格g/ml,ml,准确度高灵敏度低操作繁琐设备简单,2337.27,3479.22,取本品约50mg,精密称定,加水50ml溶解后,加盐酸2ml,煮沸,立即滴加硅钨酸试液4ml,继续煮沸2分钟,用80恒重的垂熔玻璃坩埚滤过,沉淀先用煮沸的盐酸溶液(120)20ml分次洗涤,
12、再用水10ml洗涤1次,最后用丙酮洗涤2次,每次5ml,在80干燥至恒重,精密称定,所得重量与0.1939相乘,即得,例,精密称取本品0.0519g,加水50 ml溶解,加盐酸2ml煮沸,立即滴加硅钨酸试液4 ml,继续煮沸2分钟,用80恒重的垂熔玻璃坩埚滤过,沉淀先用煮沸的盐酸溶液(120)20 ml 分次洗涤,再用水10ml 洗涤1次,后用丙酮洗涤2次,每次5ml。在80干燥至恒重,称得沉淀重量为0.2557g。求本品的含量按干燥品计算为多少?,(本品干燥失重项下测定结果为3.73%),A.取样量50mg 提高灵敏度,B.80 保持4个H2O,C.HCl 增大沉淀颗粒,D.硅钨酸:VitB
13、1=8:1 使沉淀完全,E.硅钨酸边搅拌边缓慢加入 增大沉淀颗粒,NaOH,激发波长365nm发射波长435nm,+NaOH+铁氰化钾+异丁醇+NaOH+异丁醇,+NaOH+铁氰化钾+异丁醇+NaOH+异丁醇,S,d,A,b,对照液,供试液,(1)灵敏度高,线性范围宽(2)代谢产物不干扰,适用于 体液分析,第三节 维生素C,L抗坏血酸,(1)大剂量使用维生素C,可在体内部分转变为草酸,显著增加尿中草酸盐或尿酸盐的排泄而形成肾结石。(2)大剂量维生素C可导致部分妇女不孕。孕妇服用过量维生素C可能会影响胎儿的发育,易引起流产和死胎。(3)研究表明,处于生长时期的小儿长期服用过量维生素C容易患骨骼疾
14、病。(4)长期大量服用维生素C后,一旦突然停药,仍可出现坏血病症状。(5)长期大量使用维生素C可使血栓发生率明显增加,同时也可影响血小板的结构和功能。(6)维生素C还会破坏食物中的维生素B12,而致维生素B12缺乏。,二烯醇结构,二酮基结构,二烯醇结构,有活性,有活性,无活性,糖类的显色反应,50,结构与糖类相似,C3OH的pKa=4.17,C2OH的pKa=11.57,一元酸,L(+)抗坏血酸活性最强,手性C(C4、C5),*,*,与碱反应,1、与AgNO3反应,2、与2,6-二氯靛酚反应,(ChP2000),氧化型,玫瑰红色,(ChP2000),(玫瑰色),(无色),3、与碱性酒石酸铜反应
15、,USP,4、与KMnO4反应,或盐酸,50,吡咯,USP,(蓝色),(糠醛),(戊糖),BP,0.01mol/L HCl,三、杂质检查,1.溶液的澄清度与颜色:有色杂质 分光光度法2.铁、铜离子:原子吸收分光光度法,指示剂 淀粉指示液,H+,取本品约0.2g,精密称定,加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解,加淀粉指示液1ml,立即用碘滴定液(0.1mol/L)滴定,至溶液显蓝色,在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6,(1)酸性环境 d.HCl,(2)新沸冷H2O,减慢VitC被O2氧化速度,(3)立即滴定,赶走水中O2,减少O2的干
16、扰,(4)附加剂干扰的排除,片剂 滑石粉 过滤,USP,JP,(2)快速滴定 2min内,(1)酸性环境 HPO3-HAc,稳定VitC,防止其他还原性物质干扰,(3)剩余比色测定,(定量过量),(测剩余染料),(4)缺点,需经常标定,贮存一周,干扰多 氧化力较强,1、HPLC的优点,灵敏度高,选择性高,分离分析同步,微量分析,干扰少,快速,2、HPLC法分离VitC常用方法及测 定对象,对象 制剂、生物样品、果汁,方法 离子交换色谱法 离子对色谱法 分配色谱法(正、反相),血、尿、组织、细胞等,苯并二氢吡喃醇,第三节 维生素E,维生素E防治心脑血管疾病、防癌抗癌和抗衰老。适量服用维生素E有抗
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