细胞吞噬活动的观察.ppt
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1、实验八 细胞吞噬活动的观察,实验目的,(1)通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的实验,了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功能。(2)了解吞噬在机体非特异免疫中的重要作用。,实验原理,高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,具有吞噬的功能。当病原微生物或其他异物侵入机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又具有趋化性,它通过产生活跃的变形运动,主动向病原体和异物移行聚集,首先把异物吸附在细胞表面,随之,吸附区域的细胞膜向内凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质,形成吞噬泡,继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合,形成吞噬溶酶体,把 病原体杀死,异物消化分解。,实验用品和材料,(一)仪器、用具 显微镜、高压
2、灭菌锅、解剖盘、解剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片(二)材料 小鼠(体重20g左右),鸡血(三)试剂 6淀粉肉汤(含0.3台盼蓝),方法与步骤,1实验前2天,每天给小白鼠腹腔注射6淀粉肉汤(含台盼蓝)1ml。2实验时,再往腹腔内注射1ml 1鸡红细胞悬液,并轻揉腹部,使鸡红细胞悬液分散。32030in后,用脊椎脱臼法处死小鼠(右手抓住鼠尾,用力向后拉,左手拇指与食指同时按住鼠头,使脊髓与脑髓间断开致死)。4迅速剖开腹腔,用未装针头的注射器或吸管吸取腹腔液。5取一张干净的载玻片,滴一滴腹腔液,盖上盖玻片,显微镜下检查。,观察,在高倍镜下,先分辨清鸡红细胞和巨噬细胞。体积较大圆形或不规则的细胞,其表面有许多似毛刺状的小突起(伪足),胞质中有数量不等的蓝色颗粒(为吞入的含台盼蓝淀粉肉汤形成的吞噬泡)即为巨噬细胞。变换视野,仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见有的鸡红细胞(一至多个)紧贴附于巨噬细胞的表面;有的巨噬细胞已将1至数个红细胞部分吞入;有的巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚刚形成椭圆形的吞噬泡;有的巨噬细胞内的吞噬泡体积缩小,并呈现圆形,这是与初级溶酶体发生融合,泡内物正在被消化分解。,注意事项,1小鼠腹腔注射时注意不要刺伤内脏。2腹腔内的细胞浓度过大,可用生理盐水稀释。,
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