球菌ppt课件.ppt

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1、第9章 球菌,(coccus),球菌(coccus):形状呈球形或椭圆形的一类细菌,大多数不导致人类的感染,病原性球菌(pyogenic coccus)少数对人类有致病性的球菌，通常引起化脓性炎症，又称化脓性球菌。根据革兰染色不同分两类：G 球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌 G球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌,第一节 葡萄球菌属(staphylococcus),分布广泛，种类繁多是医院内感染的常见致病菌大多不致病对人类致病的主要为金黄色葡萄球菌易产生多重耐药菌株,1.形态与染色:G、球形、葡萄串状排列、无鞭毛和芽胞。,一、生物学特性,2.培养特性 易培养:普通平板中生长良好、血平板生长更佳；产

2、色素:金黄色、白色、柠檬色（脂溶性）,中等大，突起，有色素，S型菌落。,金黄色葡萄球菌（金黄色）,表皮葡萄球菌（白色）,腐生葡萄球菌（柠檬色）,金黄色葡萄球菌有透明溶血环。,表皮葡萄球菌无溶血环。,3.抗原构造,葡萄球菌A蛋白(staphylococcus A protein,SPA):细胞壁表面的一种单链多肽，具有多种生物学作用。,SPA,capsule,teichoic acid,peptidoglycan,SPA的应用：协同凝集试验,SPA与IgG分子 的Fc段结合,金黄色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌(S.epidermidis)腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)

3、,4.分类,据色素、生化反应,根据有无凝固酶：凝固酶阳性菌 凝固酶阴性菌,4.分类,根据核酸遗传学分型：48种,5.抵抗力 无芽胞菌中抵抗力最强，耐干燥，对石炭酸、龙胆紫等敏感。易产生耐药性，特别对青霉素耐药株高达90%以上。由于广泛应用抗生素，耐药菌株增多，成为院内感染最常见的致病菌。,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,凡对甲氧西林、苯唑西林耐药或Mec基因阳性的金黄色葡萄球菌定义为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus MRSA)，也被称作“超级细菌”。,1961年英国首次报道,MRSA正在全世界快速蔓延，可能有

4、多达5300万人携带致命性MRSA。,致病机理与普通金黄葡萄球菌没什么两样,成为医院感染和社区获得性感染的重要致病菌。,MRSA（超级细菌）治疗难度大，病死率高，已成为医院感染中的严重问题，已与乙肝、艾滋病并列为世界三大感染性疾病。,MRSA传播主要通过医护人员的手，在患者、医护人员、患者间播散，另外，衣物、敷料等物品可携带MRSA，促进MRSA在院内的流行，病人一旦感染或携带MRSA，该菌可存在于患者身上达数月之久。(“肮脏的白大褂”),二、致病性与免疫性,1、致病物质 金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。侵袭性酶：血浆凝固酶；葡激酶；耐热核酸酶；透明质酸酶；脂酶 外毒素:葡萄球菌溶素、

5、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1(TSST-1);表面结构或蛋白：如粘附素、荚膜、肽聚糖和SPA等。,使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热，100，30min或高压灭菌后仍保持部分活性；但易被蛋白酶破坏。鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。,凝固酶（coagulase）,分类：A：游离凝固酶，分泌至菌体外。,B：结合凝固酶/凝聚因子，结合于菌体表面不释放，利于细菌凝集。,凝固酶原物质,凝固酶样物质,纤维蛋白原（液态）,纤维蛋白（固态）,血浆凝固,协同因子,致病机理：A：使周围血液/血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面，阻碍吞噬细胞的吞噬或胞内消化作用；B：集聚在细菌四周，保护

6、病菌不受血清中杀菌物质的破坏；C：细菌不易扩散，使感染易于局限化和形成血栓。,意义：鉴别有无致病性的重要指标。,葡萄球菌溶素（staphylolysin）,损伤细胞膜的毒素，主要是溶素；对多种哺乳动物RBC有溶血作用，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用；溶素是一种外毒素，具有良好的抗原性；经甲醛液脱毒后可制成类毒素；作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区，破坏膜的完整性导致细胞溶解。,杀白细胞素（leukocidin）,只攻击中性粒细胞和巨噬细胞；与细胞膜受体结合，使细胞膜发生构型变化，膜通透性增高，细胞浆内的颗粒排除，细胞死亡；在抵抗宿主吞噬细胞，增强病菌侵袭力方

7、面有意义。,肠毒素（enterotoxin）（超抗原）,约50%临床分离金黄色葡萄球菌可产生；耐热，抗胃肠液中蛋白酶的水解作用；产毒菌株污染牛奶、肉类等食物，经10h便产生大量肠毒素；作用机制：毒素与肠道神经细胞受体作用，刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食物中毒。,表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）由质粒编码产生的一种蛋白质，可水解宿主表皮粒层的细胞内桥桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中可引起烫伤样皮肤综合征(SSSS)。,毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）由噬菌体I群感染和产生。引起机体发热，增加对内毒素的敏感性;多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征(

8、toxic shok syndrome,TSS)。,病人的临床表现主要包括急性高热、低血压、猩红热样皮疹伴脱屑，严重者发生休克。,2.所致疾病,感染类型 所致疾病,侵袭性 局部感染 全身感染,毒素性 食物中毒 假膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 SSSS 毒性休克综合征TSS,病灶局限且脓汁粘稠,局部感染,食物中毒（肠毒素）,2011年“思念”牌水饺，被检出金黄色葡萄球菌而停售。,旧标准：不得含有”金黄色葡萄球菌。现在：在每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量只要在100010000个之间，都为合格产品。,表现为弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微。,烫伤样皮肤综合征,泉

9、州“婴儿疑被烤死”事件,2013.7.17，一名刚出生12天的婴儿在泉州市儿童医院保温箱内死亡，死亡时身体多处为黑色，疑为烤死。,SSSS综合症（烫伤样皮肤综合症）,3、免疫性 人体有一定的天然免疫力,只有当皮肤黏膜受伤后,宿主免疫力降低时,才易引起葡萄球菌感染。感染后能获得一定的免疫力，但不强，难以防止再次感染。,三、微生物学检查,标本采集 检查程序 检查方法,1.标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意：无菌操作，避免污染。,2.检查程序,脓液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液,脑脊液血液,粪便、呕吐物,直接涂片染色,增菌培养,分离培养（血

10、平板）,分离培养（高盐甘露醇平板）,取可疑菌落,鉴定试验药敏试验,涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶其他鉴定试验,报告,初 报,鉴定试验（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+）（2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+）（3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+）（4）肠毒素测定：金黄色葡萄球菌产生（5）SPA检测：金黄色葡萄球菌（6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定,防,注意消毒隔离,注意个人卫生,防止医源性感染,防止耐药菌株产生,治,抗菌素药敏试验,自身菌苗疗法,四、防治原则,人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌的感染最为常见。CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染，细菌性心内

11、膜炎，败血症等，其中大多为医院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。,凝固酶阴性葡萄球菌的致病性,第二节 链球菌属(Streptococcus),分类,根据溶血作用分类:甲（）型溶血 乙（）型溶血 丙（）型溶血,根据抗原结构分类,根据细胞壁中C多糖抗原不同，分为20个群。对人致病的链球菌，90%属于A群。链球菌的群别与其溶血性间无平行关系。A群多为乙型溶血。,A群链球菌,主要为-溶血性链球菌，是链球菌中对人致病作用最强的细菌。对人致病的链球菌有90%属此种。,一、生物学特性,1.形态与染色 G+，球形或椭圆形，呈链状排列，无鞭

12、毛、无芽胞，有荚膜。,2.培养特性,营养要求较高血液或组织液、生长因子菌落细小，S型溶血环液体培养成絮状沉淀,3.生化反应 活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。菊糖（-）胆汁溶菌试验（-）optochin敏感试验（-）触酶（-）（区别于葡萄球菌属）,（区别甲链与肺链）,4.抗原构造 多糖抗原（C抗原）：群特异性。蛋白抗原（M、T、R、S）：型特异性，与致病有关的是M蛋白抗原。核蛋白抗原：无特异性。,多糖抗原,蛋白质抗原,核蛋白抗原,链球菌抗原构造模式图,荚膜,（二）致病性与免疫性,细胞壁成分黏附素M蛋白外毒素致热外毒素（红疹毒素）溶血素ASO侵袭性酶透明质酸酶链激酶（）链道酶（）,致病物质,细胞

13、壁成分,黏附素M蛋白（主要致病因子）心肌、肾小球基底膜共同抗原风湿热急性肾小球肾炎,致热外毒素（pyrogenic exotoxin）是引起猩红热的主要毒性物质。由携带有溶原性噬菌体的A群链球菌产生 对机体具有致热和细胞毒作用。,外毒素,链球菌溶素（streptolysin）溶解RBC、破坏WBC和血小板。链球菌溶素O（SLO）：对哺乳动物多种细胞有毒 性作用（对氧不稳定），具有抗原性 链球菌溶素S（SLS）：对白细胞和多种组织细胞有破坏作用（对氧稳定），不具有抗原性,侵袭性酶,透明质酸酶链激酶（）链道酶（）,“丹毒”,蜂窝组织炎,所致疾病,A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%,淋巴

14、管炎蜂窝组织炎扁桃体炎等,猩红热,(3)变态反应性疾病,(1)化脓性感染,(2)中毒性疾病,风湿热急性肾小球肾炎,病灶界限不清,脓汁稀薄,三、微生物学检查,标本采集 检查程序 检查方法,标本直接涂片镜检 培养血琼脂平板，形成典型的溶血现象抗原的检测 血清学试验抗O试验（ASO）,鉴定链球菌的主要试验：根据形态、菌落、溶血情况进行：杆菌肽敏感试验：A群敏感(d10mm)Optochin敏感试验：肺炎链球菌d18mm，d15mm为阴性。胆汁溶菌试验：肺炎链球菌+,血清学试验：抗O试验（ASO test）原理：毒素与抗毒素的中和试验，用SLO检测血清中的ASO。方法：间接凝集。结果：效价1:400

15、单位有诊断意义。意义：辅助诊断急性风湿热、风湿活动期、急性肾小球肾炎。,积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果。,(四)防治原则,属链球菌科，链球菌属。广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道，多数不致病。可导致细菌性大叶性肺炎、脑膜炎、支气管炎,肺炎链球菌 S.pneumoniae,形态与染色：G、矛头状、成双（或短链）排列；平面相对、尖面相背；无鞭毛、无芽胞，有厚荚膜。,一、生物学性状,培养及生化反应,培养特性需氧或兼性厌氧营养要求高在固体培养基上形成“脐状”菌落，胆盐可促其自溶a溶血环生化反

16、应可发酵菊糖，胆汁溶菌，可鉴别肺炎球菌与甲型溶血性链球菌，奥普托欣抑制其生长,3.抗原构造荚膜多糖抗原：据此将肺炎链球菌分85型，对人致病的有20多型。-型引起大叶性肺炎。菌体多糖抗原：种特异性，C多糖可与CRP反应，产生沉淀，在炎症活动期(如风湿热)含量增多。M蛋白抗原：型特异性。,二、致病性与免疫性,致病物质荚膜肺炎链球菌溶血素脂磷壁酸所致疾病大叶性肺炎其他部位炎症免疫性牢固的型特异性免疫，同型再次感染少见,三、微生物学检查,标本采集 痰液，脓液，血液，脑脊液等。检查程序 检查方法,微生物学检查法,标本：痰液脓液血液脑脊液直接涂片镜检 分离培养：血琼脂平板鉴别试验肺炎链球菌与甲型溶血性链球

17、菌菌落相似，应加以鉴别：菊糖发酵试验；胆汁溶菌试验；奥普托欣试验（optochin test）肺炎链球菌型别鉴定（荚膜肿胀试验、凝集试验）动物试验,胆汁溶菌试验阳性：,加入胆汁或10%去氧胆酸钠，37，5-10min，激活本菌的自溶酶，出现溶菌现象。,取肉汤培养液均匀涂于血平板上用optochin纸片贴于接种区中央（或分区划线法，纸片贴于1-2区），35需氧培养过夜，抑菌圈 18mm。,Optochin敏感试验阳性：,多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗,预防,治疗,抗生素,四、防治原则,其他链球菌,B群链球菌：新生儿败血症、脑膜炎；孕妇流产、产后败血症等C群链球菌：多为动物源性疾病，引起密集人口流行性咽

18、炎、肺炎、脑膜炎等D群链球菌：医院内感染重要病原菌,甲型溶血性链球菌（草绿色链球菌）龋齿亚急性细菌性心内膜炎,第四节 奈瑟菌属 Neisseria,特点：G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛，需氧，氧化酶及触酶+，细胞内寄生。主要致病菌是：脑膜炎奈瑟菌(merningococcus)和淋病奈瑟菌(gonorrhoeae),脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis),即脑膜炎球菌，是流行性脑脊髓膜炎的病原体。,1.形态结构G-，肾形成双排列，有荚膜、菌毛；在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内。,（一）生物学性状,2培养特性专性需氧，营养要求高，常用巧克力培养基。血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光

19、滑似露滴状菌落。易自溶。,3抵抗力 很弱四怕：热、寒冷、干燥、消毒剂。,1.致病物质 菌毛、荚膜、内毒素2.所致疾病 传染源：病人和带菌者 传播途径：呼吸道传播，飞沫或接触 所致疾病：流行性脑脊髓膜炎3.免疫性 病原可产生群特异性抗体，但不持久。,（二）致病性与免疫性,病菌,上呼吸道炎症,菌血症或内毒素血症,寒战高热、恶心和出血性皮疹,突破血脑屏障,流行性脑脊髓膜炎,剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强直,(三)微生物学检查,1标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状，抽取脑脊液 带菌者：咽拭子 注意事项：立即送检，注意保温（勿放冰箱），防干燥，防紫外线,、检查

20、程序,血 液,增菌培养（葡糖肉汤）,分离培养（巧克力、血平板）,鉴定试验,涂染检 氧化酶 葡、麦糖 多价血清 药敏试验,结果报告,鼻咽拭子,卵黄双抗平板,510%co2,37 1824h,37 1824h,37 1824h,脑脊液 瘀血点,离心,上沉清淀液物,510%2,涂片染色,初步报告,直接凝集,（四）防治原则,预防：儿童注射A群脑膜炎球菌荚膜多糖抗原疫苗。6个月-2岁接种两次，间隔1月。治疗：抗生素。,淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）,（一）生物学性状,1形态结构G-，球形或肾形，成双排列，似一对咖啡豆，常位于中性粒细胞内；有荚膜和菌毛。,2培养特性专性需氧，营养要求高，常用巧克

21、力血平板；菌落：凸起，光滑、圆形，灰褐色，半透明。,3.抵抗力 弱，热、冷、干燥和消毒剂极敏感。,1.致病物质菌毛:粘附、抗吞噬；外膜蛋白:有助于粘附；脂多糖：损伤上皮细胞；内毒素：损害人体黏膜的重要因素。,（二）致病性与免疫性,淋病gonorrhea,人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主，属性传播疾病(STD)，主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症。,2.所致疾病,新生儿淋菌性结膜炎/脓漏眼,产道感染，胎儿经产道娩出时可被有淋病性阴道炎或子宫颈炎的孕妇感染,眼内有大量脓性分泌物。,淋病奈瑟菌性结膜炎及幼女阴道炎,通过毛巾、浴池间接感染。,新生儿以1%硝酸银或其它银盐溶液滴入两眼。,1标本采集 标本：

22、泌尿生殖道脓性分泌物，子宫 颈口表面分泌物；保暖保湿，立即送检。检验程序,（三）微生物学检查,脓汁、分泌物,直接涂片染色,分 离 培 养 血、巧克力、TM平板,510%CO2,35 1824h,鉴定试验,涂染检 氧化酶 糖发酵 药敏试验,报 告,初步报告,35 1824h,检查方法 直接涂片镜检 急性淋病：嗜中性粒细胞内大量G-，肾 形双球菌具有诊断意义 慢性淋病：镜检较困难 分离培养 采集即培养，培养基先预温。,防,开展防治性病的知识教育,防止不正当的两性关系,治,新生儿1%硝酸银滴眼。,抗生素。参考体外药敏试验。近年报告耐药菌株增多。,（四）防治原则,思考题名词解释：SPA、抗O试验简答：1、简述葡萄球菌、链球菌的分类及意义。2、简述葡萄球菌的重要致病物质和所致疾病。3、简述乙型溶血性链球菌的重要致病物质和所致疾病。4、简述淋球菌和脑膜炎球菌的所致疾病。,谢 谢,