动物细胞融合和单克隆抗体.ppt

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1、人细胞,小鼠细胞,红色荧光燃料标记的膜蛋白,绿色荧光燃料标记的膜蛋白,杂交细胞,细胞融合,动物细胞融合,实验证明：细胞膜具有流动性,若A、B为植物细胞，在细胞融合之前用 处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是，化学方法是，融合完成的标志是。还要应用.技术把D培养成植株，此过程常添加的植物激素有.,纤维素酶和果胶酶,细胞壁,离心、电激、振动,产生新的细胞壁,植物组织培养,用聚乙二醇诱导,生长素、细胞分裂素,1、概念：,两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,原理：结果：,细胞膜的流动性,获得杂交细胞,灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点),离心、振动、电激；,聚乙二醇；,2、诱

2、导融合的方法：,一、动物细胞融合,为什么灭活的病毒能作诱导剂？,灭活丧失感染性,保留融合活性,【配对练习1】(2012年佛山联考)动植物细胞融合过程的,最重要的区别是(,),A细胞融合过程B人工诱导细胞融合的方法C植物细胞必须先用酶除去细胞壁D电融合技术,【答案】C,、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同,动物细胞融合有什么意义和应用？,总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合,细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,细胞膜的流动性,用纤维素酶、果胶酶去壁,用胰蛋白酶使细胞分散,物理、化学方法,物理、

3、化学、生物方法,获得部分或完整植株,主要用于制备单克隆抗体,3如图为人体体液免疫过程的示意图，关于此图的叙述正确的是A能产生抗体的是细胞B通过过程V产生的“某物质”是淋巴因子C细胞分别为吞噬细胞和T细胞，均能特异性识别抗原D当同一种抗原再次进入机体时，细胞会迅速增殖、分化,D,吞噬细胞,T细胞,B细胞,记忆细胞,浆细胞,抗体,1.抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？主要分布在哪里？,抗体,.一个淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？.简述获得抗体的传统途径？.这种方法获得的抗体有什么缺陷？,长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这

4、种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，反应不够灵敏，纯度低。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,提示1：仅用细胞培养技术可行吗？,提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？,问题：如何大量生产同一种抗体？,1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒设想：,二、单克隆抗体的制备,自学与思考：1）在从小鼠体内取B淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？为什么要

5、这样处理？2）从小鼠何处获取B淋巴细胞？3）如只考虑两两融合，会出现哪些融合类型细胞？4）是否所有杂交瘤细胞都能产生某一特定抗体？5）由特定的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞具有什么特点？6）最后可以通过哪些途径大量获取抗体？,注射抗原,效应B细胞,多种杂交细胞,选择性培养基 筛选1,继续培养,（筛选出杂交瘤细胞）,足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞,克隆化,注射抗原,效应B细胞,3种杂交细胞,选择性培养基 筛选1,继续培养,（筛选出杂交瘤细胞）,足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞,克隆化,用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体

6、就叫做单克隆抗体。,单克隆抗体：,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞,A,2、通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 选出能产生抗体的效应B细胞 选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（）A.B.C.D.,C,3、【巩固2】1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题。,(1)病原体注入小鼠体内后，通常需要经过

7、_细胞的处理后，才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_作介导，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_特点。(3)单克隆抗体的特点是_。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_。,吞噬,灭活的病毒或聚乙二醇,既能产生特异性抗体，又能无限增殖的,体外培养法和动物体内培养法,4、【例2】下图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请根据图回答下列问题。,(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。,(2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具

8、有_、_的特性。(3)由图中可以看出，单克隆抗体制备过程运用了_和_等动物细胞工程技术。,在体外大量繁殖产生特异性抗体,动物细胞融合动物细胞培养,单克隆抗体的优点:_、_.单克隆抗体的应用：.可用于作为诊断试剂：.可用于疾病治疗.“生物导弹”生物导弹单克隆抗体药物,单克隆抗体的应用,特异性强,灵敏度高,5、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于：A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单,6、“生物导弹”是指：A.单克隆抗体 B.带有特定药物的单克隆抗体C.杂交细胞 D.淋巴细胞,C,B,7.用动物细胞

9、工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是：A将抗原注入小鼠体内，获得能产生相应抗体的B淋巴细胞B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,B,（2005广东）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A、可以制成诊断盒用于疾病的诊断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产,2006年广东卷单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是A特

10、异性强、灵敏度高 B与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌,下图为某同学设计的生产抗破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案。,1、该实验方案的目的是_ _,2、A是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生_。在获得此细胞之前，小鼠已被注射了.,制备单克隆抗体,B淋巴细胞,特异性抗体,B,体外培养,足够数量的细胞群,注射到小鼠腹腔,A,C,破伤风杆菌,下图为某同学设计的生产抗破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案。,B,体外培养,足够数量的细胞群,A,C,3、图中B为_ 过程，常用_ 作为诱导因素，该细胞继承_的遗传特性，既能_,又

11、能_。,4、C过程指细胞培养，该过程包括_ 和_ 两个阶段，其中_代以内的的细胞属于细胞株。,动物细胞融合,灭活的病毒,双亲细胞,分泌特异性抗体,无限增殖,原代培养,传代培养,50,注射到小鼠腹腔,（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用 处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是。融合完成的标志是。还要应用 _ _ 技术把D培养成植株。,（2）若A、B是动物细胞，一般取自 _，然后用 使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是 _，所形成的D称为 _，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。,纤维素酶和果胶酶,细胞壁,离心、电激、振动,产生新的细胞壁

12、,植物组织培养,胚胎或幼龄动物的器官、组织,胰蛋白酶,灭活病毒诱导,杂交细胞,流动性,（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了 _ _，图中B为 _。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有 种，用来培养的D细胞应该是 _ _。从中选择出它的方法是 _ _ _培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和 _。,抗原,浆细胞、记忆细胞和抗体,骨髓瘤细胞,3,杂交瘤细胞,用特定选择培养基,小鼠腹腔内增殖,植物细胞工程与动物细胞工程的主要区别,植物细胞工程与动物细胞工程的主要区别,