中药含量测定技术.ppt

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1、1,第四章-复习,杂质概念来源分类重金属概念检查原因检查方法干扰物排除最终产物砷盐检查原因药典收载方法检查中酸性SnCl2作用？,2,中药制剂含量测定技术,3,方法,化学方法*仪器分析方法,有效成分指标性成分毒性成分,分析成分,中药制剂含量测定技术,4,高效液相色谱法薄层扫描法可见-紫外分光光度法气相色谱法原子吸收分光光度法,方法,仪器分析方法,滴定法浸出物测定法重量法挥发油测定法总氮测定法,化学方法,5,仪器分析法之,紫外-可见分光光度法,6,A:吸光度K:吸收系数C:溶液浓度L:液层厚度,基本原理:Lamber-Beer定律,紫外-可见分光光度法,7,吸收系数两种表示法：摩尔吸收系数：一定

2、，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度百分含量吸收系数/比吸收系数 一定，C=1g/100ml，L=1cm时的吸光度,紫外-可见分光光度法,*,8,紫外-可见分光光度法,吸收光谱（吸收曲线）：定性依据:吸收峰max 吸收谷min 肩峰sh定量依据:吸收峰max,9,光源,单色器,样品池,检测器,记录装置,紫外|可见分光光度计,数据处理,报告书,10,钨灯或卤钨灯：可见光源 3501000nm氢灯或氘灯：紫外光源 200360nm,吸收池：玻璃-能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英-不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致）,光源,紫外-可见分光光度法,11,

3、测定波长的选择：max吸光度读数范围的选择：A=0.30.7,UV 吸光度测量的条件选择,样,参,调节光路,光学性质和厚度相同,样品池,样品溶液,，,参比池,空白溶液,样品池,参比池,配制样品的溶剂,空白溶液,A,T,A,+,=,=,+,%,100,0,12,样品A值,UV-标准曲线法,对照品溶液：一系列不同浓度的对照品溶液,相同条件下,A为纵坐标，C为横坐标,标准曲线（工作曲线）,样品的浓度和含量,一系列A值,13,标准曲线又称工作曲线。如吸光光度法，在绘制时，首先在一定条件下配制一系列具有不同已知浓度吸光物质的标准溶液，然后在确定的波长和光程等条件下，分别测量系列溶液的吸光度，绘制A-c曲

4、线，从而得到一条通过原点的直线，即标准曲线。当需要对某未知液的浓度cx进行测定时，只需要在相同条件下测得未知液的吸光度Ax，就可由cx=Ax/b计算得出或直接在标准曲线上查得cx。在实际操作中，应注意调整cx的大小，使其对应的Ax处于标准曲线的直线范围（线性范围）之内。,UV-标准曲线法,14,UV-标准曲线法,标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度（或含量）的范围称为该方法的线性范围。,15,标准曲线是依据标准系列的浓度（或含量）和其相对应的相应信号测量值来绘制的。如浓度（或含量）分别为x1,x2xn，其相应信号(吸光度)的测量值分别为y1,y2yn，用简单的方法很难绘制出能准确反映y与x之

5、间关系的标准曲线。通常，用“一元线性回归法”来给出y与x的关系式 y=a+bx（1-1）式中其中 式(1-1)称为一元线性回归方程，b称为回归系数，即回归直线的斜率，a为截距。,UV-标准曲线法,16,当两个变量之间直线关系不够严格，数据的偏离较严重时，虽然也可以求得一条回归线，但是，实际上只有当两个变量之间存在某种线性关系时，这条回归线才有意义。判断回归线是否有意义，可用相关系数r来检验。相关系数的定义式为：r值在-1.0000与+1.0000之间。相关系数的物理意义如下：（1）r=1时，y与x之间存在严格的线性关系，所有的yi值都在回归线上。（2）r=0时，y与x之间完全不存在线性关系。（

6、3）0r1时，y与x之间存在一定的线性关系。r值愈接近1，线性关系就愈好,UV-标准曲线法-相关系数r,17,例：用光度法测定合金钢中Mn的含量，吸光度与Mn的含量间有下列关系：Mn的质量/g 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 未知样吸光度/A 0.032 0.135 0.187 0.268 0.359 0.435 0.511 0.242试求出标准曲线的回归方程及其相关系数r并计算未知样品中Mn的含量,解：此组数据中，组分浓度为零时，吸光度不为零，这可能是在试剂中含有少量Mn，或者含有其它在该测量波长下有吸光的物质。设Mn含量值为x，吸光度值为y，按公式计算回归系

7、数a，b值。n=7。所以该标准曲线的回归方程为 y=0.038+3.95x,UV-标准曲线法-实例,18,未知样品的吸光度为y=0.242 0.242=0.038+3.95x所以x=0.052g故求出样品中含Mn为0.052g(注：该题可用计算机方便统计处理),相关系数,UV-标准曲线法-实例,19,-,特点：用于可见分光光度法 批量生产 曲线可多次使用,UV-标准曲线法,20,UV-对照品比较法,对照品溶液中所含被测成分的量应为：供试品溶液中被测成分标示量的100%10%,C供=（A供/A对）C对,供试的含量（%）=,C供D供 V,W供,100%,对照品、样品：各配制两份,21,吸收系数法,

8、注意：仪器波长 空白校正 吸收度准确度的检定 杂散光的检查优点：无需对照品，方法简便,AD1%V,LW,含量（%）=,100%,22,注意事项,光源选择波长吸收池种类溶液高度吸收度读数范围供试品应取2份（对照品比较法，对照品一般也应取2份）平行操作，平均偏差应在0.5%以内,23,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,本品为黄杨宁经加工制成的片剂。每片含环维黄杨星D 0.5mg或1mg。可用对照品比较法测其含量。环维黄杨星D,24,测定原理：酸性染料比色法,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,25,对照品溶液的制备精密称取经105干燥至恒重的环维黄杨星D对照品25mg（实际称取24.94mg)，置2

9、50ml量瓶中，加甲醇70ml使溶解，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含黄杨星D10g的对照溶液（实际浓度C对=9.976g/ml）试写出计算过程,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,26,供试品溶液的制备取本品20片（标示量为0.5mg/片），精密称定（2.050g)，研细，精密称取适量（约相当于黄杨宁0.5mg）(称取0.1021g)，置50ml量瓶中，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至近刻度，80水浴恒温1.5小时后取出，冷却至室温，加0.05mol/L磷酸二氢

10、钠缓冲液至刻度，摇匀，离心6分钟（3000转/分），取上清液，即可若标示量为1mg/片，其他数值不变，试求取样范围？,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,27,测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各5ml，分别置分液漏斗中，各精密加入溴麝香草酚蓝溶液（取溴麝香草酚蓝18mg，置250ml量瓶中，加甲醇5ml使溶解，加0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液至刻度，摇匀，即得）5ml，摇匀，立即分别精密加入三氯甲烷10ml，振摇2分钟，静置1.5小时，分取三氯甲烷层，置含0.5g无水硫酸钠的具塞试管中，振摇，静置，取上清液，照分光光度法在410nm处分别测定吸光度（A对=0.454,A样=0.445），

11、计算，即得。药品标准规定每片含环维黄杨星D（C26H46N2O），应为标示量的90.0%110%试写出计算公式,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,28,计算药品标准规定每片含黄杨宁以环维黄杨星D（C26H46N2O）计算，应为标示量的90.0%110.0%。,例题：黄杨宁片中黄杨宁的含量测定,29,六味地黄颗粒中牡丹皮的含量测定,取装量差异项下的本品约2g，研细，精密称定，用水蒸汽蒸馏，收集馏出液约450ml，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法在274nm波长处测定吸收度，按丹皮酚（C9H10O3）的吸收系数为862计算，即得。药品标准规定每袋（装量为5g）含牡丹皮按丹皮酚

12、（C9H10O3）计，不得少于6.0mg。,30,1g供试品中含牡丹皮按丹皮酚计，含量为：,每袋六味地黄颗粒（5g装）含牡丹皮按丹皮酚计含量为：,六味地黄颗粒中牡丹皮的含量测定,31,仪器分析法之,薄层扫描法（TLCS）,32,概念：指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品质量检测的方法色谱条件：选择性好，组分能完全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。测量方法：多使用反射法光源氘灯：200370nm钨灯：370700nm氙灯汞灯,薄层扫描法,33,薄层扫描法有外标法和内标法。常用外标法外标法系指将一定量的

13、供试品溶液和对照品溶液分别交叉点加在同一块薄层板上，展开，显色，定位，扫描待测组分和对照品斑点，测定相应的吸光度或荧光强度积分值，计算被测成分的含量。外标一点法：标准曲线通过原点，马钱子散等个别品种外标两点法：标准曲线不通过原点，绝大多数品种采用所谓一点法是指在一块薄层板上对照品的浓度为一种点样浓度，两点法则是指在一块薄层板上对照品的浓度为两种点样浓度。操作方法：供试品溶液：两份或以上点样：供试品和对照品交叉点样，每份原点不得少于2个展开：展距为15cm,薄层扫描法,34,扫描方式：单波长 双波长测定波长 被测组分max，参比波长 组分无吸收位置上 若背景有均匀污染时，可选择背景光谱中与测定波

14、长的等吸收处。,薄层扫描法,薄层扫描法,计算外标一点法外标二点法,35,薄层扫描法,马钱子散中马钱子的含量测定：【含量测定】取装量差异项下的本品约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷20ml，浓氨试液1ml，轻轻摇匀，称定重量后，于室温放置24小时，再称定重量，用三氯甲烷量补足减失重量，充分振摇，滤过，滤液作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录 B）试验，分别吸取供试品溶液8l和对照品溶液4l，交叉点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（16:12:1:4）的上层溶液为展开剂，展开，取出

15、，晾干。照薄层色谱法（附录 B薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：S=257nm，R300nm，测量供试品与对照品吸光度积分值，计算，即得。实验数据：m对=24.90mg,mS=0.5324,A对=22000.73,A供=15659.12本品每袋含马钱子以士的宁计（C21H22N2O2）应为7.28.8mg。,36,薄层扫描法,马钱子散中马钱子的含量测定,37,薄层扫描法,大山楂丸中山楂的含量测定：【含量测定】取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约3g，精密称定，加水30ml，60水浴温热使充分溶散，加硅藻土2g，搅匀，滤过，残渣用水30ml洗涤，100烘干，连同滤纸一并置索氏提取器中，加乙醚适量

16、，加热回流提取4小时，提取液回收溶剂至干，残渣用石油醚（3060）浸泡2次（每次约2分钟），每次5ml，倾去石油醚液，残渣加无水乙醇-三氯甲烷（3:2）的混合溶液适量，微热使溶解，转移至5ml量瓶中，用上述混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B）试验，分别精密吸取供试品溶液5l、对照品溶液4l与8l，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（20:5:8:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110加热至斑点显色清晰，在薄层板

17、上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法（附录 B薄层色谱扫描法）进行扫描，波长：S=535nm；R=650nm，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。测得数据：A供=5659.12、A对1=2057.73、A对2=7901.25。本品每丸含山楂以熊果酸（C30H4803）计，不得少于7.0mg。,38,薄层扫描法,大山楂丸中山楂的含量测定,39,补:分析天平使用和称量,感量0.1mg0.01mg0.001mg用途：较精密的检验工作称量含量测定对照品称量滴定液标化微量水分测定,40,补:分析天平使用前准备,精度选择：精密称定大于100mg，感量为0.1mg天平10

18、010mg，感量为0.01mg天平小于10mg，感量为0.001mg天平检查该天平的使用登记表检查水准器内的气泡：水准器圆的中心位置检查硅胶软毛刷轻刷天平调好零点,41,高效液相色谱法,在经典液相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法适用范围溶解后能制成溶液的样品不受样品挥发性和热稳定性的限制分子量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%特点高柱效（n=104片/米）高灵敏度高选择性分析速度快,42,高效液相色谱法,仪器高压输液系统、进样系统、色谱系统、检测系统、数据处理系统1.储液罐；2.脱气装置；3.梯度洗脱；4.高压输液泵；5.流动相流量显示；6.柱

19、前压力表；7.输液泵头；8.过滤器；9.阻尼器；10.进样装置；11.色谱柱；12.检测器；13.数据处理系统；14.废液储罐,43,高效液相色谱法,仪器高压输液系统贮液罐：盛装流动相过滤器：过滤流动相中的尘粒或不溶性的颗粒物质高压输液泵：完成流动相的输送任务进样系统六通进样阀进样：定量环定量和微量注射器定量自动进样器色谱系统：色谱柱和柱温箱检测系统：紫外检测器（UVD）、二极管阵列检测器（DVD）、荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器数据处理系统,44,HPLC进样装置隔膜进样（高分子有机硅胶垫进样室）HPLC系统压力太大，必须停泵进样（早期）阀进样：不必停

20、泵，六通阀,45,透明(棕色)玻璃样品瓶 自动进样器,高效液相色谱法,色谱柱-ODS柱非极性固定相反相色谱法流动相：极性流动相甲醇-水乙腈-水洗脱梯度洗脱等度洗脱极性大组分先出柱，极性小的组分后出柱,46,高效液相色谱法,高效液相色谱法,HPLC 流出曲线和色谱峰流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线色谱峰：流出曲线上突起部分,47,48,基本概念基线：当没有待测组分进入检测器时，反映检测器噪音随时间变化的曲线；稳定平直直线噪音：仪器本身所固有的，以噪音带表示（仪器越好，噪音越小）漂移：（仪器未稳定造成），基线向某个方向稳定移动保留时间tR：从进样开始到组分出现浓度极大点时所需时间，即组

21、分通过色谱柱所需要的时间死时间tm：不被固定相溶解或吸附的组分的保留时间（即组分在流动相中的所消耗的时间），或流动相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间，又称流动相保留时间调整保留时间tR：组分的保留时间与死时间之差值，即组分在固定相中滞留的时,高效液相色谱法,色谱图及其参数（见图）保留时间tR：定性峰高h：峰顶到基线的距离。可用于定量半峰宽W1/2：峰高一半处的宽度峰宽W：从色谱峰两侧拐点作切线与基线相交部分峰面积A：色谱峰与基线之间所包括的面积，常用来定量,49,高效液相色谱法,不对称因子,HPLC 流出曲线和色谱峰,高效液相色谱法,系统适用性实验：理论塔板数（n）：分离度（R）：重复性

22、对照溶液（待测物质或其他）连续进样35次相对标准偏差应不大于2.0%拖尾因子（T）：0.951.05,高效液相色谱法,分离度计算相临两组分间峰顶间距离是峰底宽平均值的几倍（衡量色谱分离条件优劣的参数）,52,高效液相色谱法,操作方法操作前的准备：仪器检查流动相的制备纯化供试品和对照品溶液配制（各两份）系统适用性试验测定法定量依据：峰面积（或峰高）定量杂质含量：峰面积法,53,高效液相色谱法,含量测定面积归一法 C%=Ai/A100%内标加校正因子法：少用外标法:常用,54,高效液相色谱法,三黄片（小片）中大黄的测定检验依据（中国药典2010年版一部457页）【处方】大黄300g 盐酸小檗碱5g

23、 黄芩浸膏21g,55,高效液相色谱法,【含量测定】大黄 照高效液相色谱法（附录 D）测定。色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备 取大黄素对照品和大黄酚对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液制成每1ml含大黄素10g、大黄酚25g的混合液，即得。供试品溶液的制备 取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），取约0.26g，精密称定，置锥形瓶中，精密加乙醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，用乙醇补足减失的重量，滤过

24、，精密量取续滤液10ml，置烧瓶中，蒸干，加30%乙醇-盐酸（10:1）混合溶液15ml，置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）的混合溶液溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含大黄以大黄素（C15H10O5）和大黄酚（C15H10O4）总量计，小片不得少于1.55mg；大片不得少于3.1mg。,56,高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定,流动相的配制 取甲醇（色谱纯）425ml和0.

25、1%磷酸溶液75ml混合均匀，用0.45m的滤膜过滤，超声处理30min，即得。对照品溶液的制备 分别精密称取大黄素对照品25mg和大黄酚对照品63mg，置25ml量瓶中，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液至刻度，摇匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1）混合溶液至刻度，摇匀，用0.45m的滤膜过滤，即得。供试品溶液的制备 取本品20片，用小刀除去包衣（注意勿损失内容物），精密称定，置研钵中研细后，过三号筛，取约0.26g，置锥形瓶中，依法操作，即得。测定，照高效液相色谱法测定。实验数据：20片总重量为5.3100g；m供=0.2610g、m对（大黄素）=0.

26、02509g、m对（大黄酚）=0.06286g；A供（大黄素）=285721、A供（大黄酚）=538079、A对（大黄素）463379、A对（大黄酚）=1300561。,57,高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定,58,高效液相色谱法：三黄片中大黄的测定,【处方】黄连165g 大黄500g 黄芩250g【含量测定】照高效液相色谱法(附录)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液（用磷酸调节pH值至2.7）(4258)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品12.5mg，

27、置250ml量瓶中,加甲醇10ml使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含黄芩苷50g)。供试品溶液的制备取本品装量差异项下的本品，研细，取约0.75g，精密称定，置100ml量瓶中,加甲醇10ml，超声处理（功率250W，频率50kHz）10分钟，放冷，加水稀释至刻度,摇匀，离心，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l,注入液相色谱仪,测定，即得。本品每袋含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于21mg。,59,高效液相色谱法：一清颗粒,气相色谱法,气相色谱法：以气体为流动相的柱色谱分离技术分类按固定相分气-固色谱气-液色谱按分离原理分吸附色谱分配色

28、谱按柱子粗细分填充柱色谱毛细管柱色谱适用性分析气体、易挥发的液体及固体不适合分析不易气化或不稳定性物质样品的衍生化使应用范围进一步扩大,60,气相色谱法,气相色谱仪的组成载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统,61,62,气相色谱法,流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线色谱峰：流出曲线上突起部分,63,不对称因子,fs在0.951.05之间,fs小于0.95,fs大于1.05,气相色谱法,操作前准备样品溶液和对照品溶液的制备：定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制2份。仪器检查系统适用性试验：同高效液相色谱法理论板数分离度重复性：相对标准偏差应不大于2.0%拖尾因子,

29、64,气相色谱法,气相色谱法,气相色谱实验条件的选择柱温的选择载气与流速的选择进样条件的选择气化室温度一般稍高于样品沸点检测室温度应高于柱温30500C进样量不可过大，否则造成拖尾峰,66,气相色谱法,定性定量分析定性分析保留时间比较法定量分析：以峰高或峰面积定量峰面积的测量定量校正因子 定量方法归一化法外标法 内标法 内标对比法,67,气相色谱法,定量分析：以峰高或峰面积定量归一化法前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰依据：组分含量与峰面积成正比优点 简便，准确 定量结果与进样量、重复性无关（前提柱子不超载）色谱条件略有变化对结果几乎无影响缺点：所有组分必须在一定时间内都出峰 必须已

30、知所有组分的校正因子 不适合微量组分的测定,68,气相色谱法,定量分析外标法：以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法工作曲线法：i纯品工作曲线，同体积样品与之比较 c前提：进入检测器样品量与峰面积成正比 外标一点法：一种浓度对照物对比样品中待测组分含量前提：截距为0，对照品浓度与待测组分浓度接近外标两点法：前提：选取两点对照品的浓度，需涵盖待测浓度外标法特点不需要校正因子，不需要所有组分出峰 结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大每次进样量应一致，否则产生误差,69,气相色谱法,70,气相色谱法,定量分析-内标法内标法是以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分

31、的响应信号相比较进行定量的方法优点进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关 适合测定微量组分缺点：制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子对内标物要求：内标物须为原样品中不含组分内标物与待测物保留时间应接近且R1.5内标物为高纯度标准物质或含量已知物质,定量分析-内标法内标法是根据待测组分与内标物的峰面积比与其浓度比在一定浓度范围内呈线性关系，对组分进行定量分析，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量的内标溶液，在相同条件下分别测定其中被测组分和内标物的色谱峰峰面积计算校正因子的计算含量计算,71,气相色谱法,检验依据（中国药典2010年版

32、一部471页）【处方】川贝母流浸膏45ml 桔梗45g 枇杷叶300g 薄荷脑0.34g川贝枇杷糖浆由川贝母流浸膏、桔梗、枇杷叶、薄荷脑四味中药制备而成。薄荷脑具局麻作用，有薄荷的特殊香气，味初灼热后清凉，可掩盖苦味；在乙醇、三氯甲烷、乙醚中极易溶解，在水中极微溶解。中国药典采用挥发油测定法（附录X D）试验，用环己烷为溶剂提取、气相色谱法测定薄荷脑含量。,72,气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定,薄荷脑对照品气相色谱图,川贝枇杷糖浆气相色谱图,【含量测定】照气相色谱法（附录 E）测定。色谱条件与系统适用性试验 改性聚乙二醇毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25m）；柱温为

33、110，分流进样，分流比为25:1，理论板数按萘峰计算应不低于5000。校正因子测定 取萘适量，精密称定，加环己烷制成每1ml含15mg的溶液，作为内标溶液。另取薄荷脑对照品75mg，精密称定，置5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀。吸取1l，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法 精密量取本品50ml，加水250ml，照挥发油测定法（附录X D）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管

34、内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2次，每次3ml，用铺有无水硫酸钠0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。吸取1l，注入气相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含薄荷脑（C10H20O）应不少于0.20mg。,73,气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定,校正因子测定 精密称定环己酮75.15mg，置5ml量瓶中，加无水乙醇适量溶解并稀释至刻度，作为内标溶液。另精密称取薄荷脑对照品73.26mg，置5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1m

35、l，加环己烷至刻度，摇匀。吸取1l，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法 精密量取本品50ml，加水250ml，照挥发油测定法（附录X D）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2次，每次3ml，用铺有无水硫酸钠0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。吸取1l，注入气相色谱仪，测定，即得。实验数据：m内为75.15mg、m对为73.26m

36、g；A内=851302.0、A对=798023.5、=841603.2、A供=814180.5。,74,气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定,75,气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定,检验依据（中国药典2010年版一部1222页）【检查】乙醇量 应为60%70%（附录 M）测定:精密量取恒温至20的颠茄酊8ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取恒温至20的无水乙醇5ml和正丙醇5ml，置100ml容量瓶中，加纯化水稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液。取标准溶液和供试品溶液各2l，连续进样3次，测得校正因子（f）分别为0.6925、0.69

37、21、0.6918。AX/AS分别为1.466、1.458、1.431。求出该供试品乙醇量及其相对标准偏差（RSD）。,76,气相色谱法-颠茄酊中乙醇量的检查,77,气相色谱法-颠茄酊中乙醇量的检查,78,气相色谱法,79,适用性,浸出物测定,有效成分不清楚的,无定量方法的,有效成分溶解性能,药用部位制剂处方,溶剂浸出物含量质量,测定方法水溶性浸出物测定法 醇溶性浸出物测定法 挥发性醚浸出物测定法前处理粉碎二号筛（水、醇）四号筛（醚）,80,浸出物测定,81,水溶性浸出物测定法,溶剂：水,水溶性成分,方法,冷浸法,热浸法,不含或少含淀粉、黏液质,浸出物测定,水溶性浸出物测定法冷浸法:取供试品约

38、4g，称定重量，置250300ml的锥形瓶中，精密加入水100ml，塞紧，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液20ml，置己干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）热浸法:取供试品约24g，称定重量，置100250ml的锥形瓶中，精密加入水50100ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。弃去初滤液，精密量

39、取续滤液25ml置干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%）,82,浸出物测定,83,醇溶性浸出物测定法,醇溶性成分,溶剂,甲、乙醇,丁醇,含较多皂苷,方法同水溶性浸出物测定法,84,操作方法水溶液制剂：用饱和正丁醇提取，依法检查固体制剂：水溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取数次，合并提取液，照上述方法蒸干，干燥，称定浸出物重量，计算出制剂中正丁醇浸出物的含量（W/W%）儿康宁糖浆正丁醇浸出物的测定:精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，第1次30ml，

40、以后 每次20ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，置105干燥3小时,移置 干燥器中、冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。本品含正丁醇提取物不得少于3.0,醇溶性浸出物测定法,85,醚溶性浸出物测定法,乙醚,溶剂,醚溶性成分挥发性成分,86,挥发油的测定,挥发油又称芳香油或精油，是广泛存在于植物中的一类可随水蒸气蒸馏得到的与水不相溶的油状液体的总称，内含有多种化学成分，组成复杂。中国药典中挥发油的测定系指采用水蒸气蒸馏法对药品中挥发油总量的测定。例如，正骨水、牡荆油胶丸、保妇康栓和满山红油滴丸中挥发油的测定测定原理：首先利用挥发油的挥发性用水蒸气蒸馏法将其提取完全；

41、再利用其较强的亲脂性与水不相溶而分层，即可读测取油的总量并求算出含量,87,容量分析法,酸碱滴定法沉淀滴定法配位滴定法氧化还原滴定法适用范围 生物碱的含量某些矿物药的含量,88,生物碱的含量测定,如果生物碱可溶于水或水-醇溶液中，且生物碱碱性较强，则可用强酸滴定液直接测定；如果生物碱在水中溶解度较小时，可先将其溶解在一定量过量的酸标准溶液中，再用强碱滴定液回滴剩余的酸，即用反滴定法测其含量。如北豆根片、止喘灵注射液及颠茄酊中总生物碱的含量测定均采用此法。对于某些不溶于水的生物碱或碱性比较弱（KC10-8）的生物碱也可采用非水酸碱滴定法测其含量。测定时可选用冰醋酸、醋酐、三氯甲烷、吡啶等非水溶剂，用高氯酸作滴定液，结晶紫等作指示剂或以电位法确定终点。本法多用于纯生物碱的含量测定,89,矿物药的测定,矿物药包括天然矿物、生物化石、人类加工品及纯粹化学制品，其组成为无机化合物。矿物药依据其所含最主要的含量最多的元素和化合物类别，可分为砷类药（如雄黄）、汞类药（如朱砂）、铅类药（如密陀僧）、铜类药（如胆矾）、铁类药（如赭石）等十种。由于其品种复杂，且砷、汞、铅等类药物具有毒性，因此对矿物药的质量控制尤为重要,