《兽医微生物学教学课件》9.分枝杆菌.ppt

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1、第15章 分枝杆菌属(Mycobacterium),本属菌均为细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。主要特点是细胞壁含有大量糖脂，革兰氏染色不易着色。抗酸性染色成红色，非抗酸菌呈蓝色。对人和动物有致病性的主要是结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、禽分枝杆菌和副结核分枝杆菌，引起人畜和禽类慢性传染病。,又称抗酸杆菌 本菌属种类较多，可分为3组：结核分枝杆菌(模式种)；非结核分枝杆菌；麻风分枝杆菌。,结核分枝杆菌（M.tuberculosis）,形态与染色细长、微弯的杆菌，无芽孢和鞭毛。革兰氏阳性菌，细胞壁有特殊的糖脂。不易着色，而抗酸染色为红色。糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免疫系统，分枝杆菌因此被制

2、成免疫佐剂得到普遍应用。,抗酸染色,由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)抗酸染色法(acid-fast stain)：以5石炭酸复红加温染色，再用3盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。,培养特性 专性需氧菌，对营养要求严格挑-营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。懒-生长缓慢，1418h分裂1次，在固体培养基上25w才出现肉眼可见的菌落。丑-典型菌落为粗糙型，表面干

3、燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样。,菌落粗糙，呈颗粒、结节或花菜样，乳白色或米黄色。液体培养基中易形成菌膜浮于液面。,菌体的化学成分：结核杆菌细胞壁含有脂质、多糖和蛋白质复合物（1）脂质：结核杆菌含大量脂质，主要有磷脂、脂肪酸和蜡质，三种成分都与蛋白质、多糖形成复合物。（2）蛋白质：结核杆菌含有多种蛋白质成分。结核菌素就是其中之一。（3）多糖,运用：弗氏佐剂、结核菌素试验,致病因子,类脂,索状因子（破坏线粒体膜，抑制白细胞游走，引起肉芽肿，佐剂）,磷脂（刺激单核细胞增生，形成结核结节）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）蜡质D（引起迟发性过敏反应）,蛋白质,引起迟发性过敏反应,分枝

4、菌酸（胞内繁殖、抗酸性染色特性）,抵抗力,四不怕干燥酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力碱性染料磺胺类、青霉素等抗生素,四怕乙醇湿热紫外线抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）,变异性,形态结构变异：异烟肼诱导产生结核杆菌的L型：胞壁消失，呈多型性。毒力变异：卡介苗(BCG)：Calmette和Gurin将牛分枝杆菌经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株耐药性变异：耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多,致病性,致病特点：细胞内寄生和形成局部病灶,细菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡，被巨噬细胞吞噬但不被消化降解，并在其内繁殖形成病灶，产生干酪样坏死。坏死灶被吞噬细胞、T

5、细胞和B细胞等包围形成结核结节。免疫力低下者此局限性病灶可能破溃，菌体排入支气管，随痰咳出体外；或病灶液化，扩散进入血流及其他器官，造成机体死亡。对于免疫正常者，局限性病灶在活化的巨噬细胞作用下其内细菌停止生长，病灶钙化而痊愈。人感染个体中90%以上表现为潜伏性感染，不到10%发展为活动性结核病。,结核病的的疫情与现状,全球形势严峻WHO2009年全球结核病控制报告显示，全球现有结核病患者1370万，每年发病人数为927万，每年死亡人数177万。结核病仍为单一病原菌引起疾病死因的第一位。目前全球有1/3人口即17亿人感染了结核病,每1秒钟就有1人受感染。发病人数占前五位的国家分别为印度、中国、

6、印度尼西亚、尼日利亚、南非。,中国形势（七“多”）感染人数多：全国结核分枝杆菌感染率44.5%,受结核菌感染人数约5.5亿，明显高出全球平均感染水平。患病人数多：全国活动性肺结核、传染性肺结核患病率分别为367/10万和122/10万，有活动性肺结核患者约450万，其中传染性肺结核患者约150万。新发患者多：全国每年新发生活动性肺结核患者约145万，其中传染性肺结核患者约65万。死亡人数多：全国每年约有13万人死于结核病。青壮年患病和死亡多：活动性和涂阳患者分别占病人总数的53%和61.6%，占结核病死亡总人数的48%。农村患者多：全国约80%的结核病患者在农村，而且主要在经济不发达的中西部地

7、区。耐药患者多：全国结核病耐药率高达28%。,结核病的的疫情与现状,艾滋病毒和结核艾滋病毒和结核并存是致命的，各自会加速对方的发展。,耐药结核现在，在调查的每一个国家中都记载了对单一药物具有耐药性的菌株；甚至已出现了对所有主要的抗结核药物具有耐药性的结核菌株。耐药结核是由于不能坚持治疗或只做部分治疗引起的。,免疫性,1.带菌免疫（传染性免疫）:细菌在机体消失或死亡后，其免疫也终止。2.细胞免疫（主要作用）与体液免疫分离:细胞免疫随病情加重而减弱，体液免疫则相反。3.机体免疫（核蛋白体RNA）与迟发性变态反应(结核菌素)：不同T细胞介导。,结核菌素试验（tuberculin test）1.原理

8、结核菌素（OT或PPD）注入皮内后如受试者已感染结核，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发型超敏反应性炎症，若受试者未感染过结核则无反应。2.方法 牛颈部皮内注射0.1 ml（1万IU）,72小时后观察局部炎症反应3.结果分析（1）阳性 皮肿胀厚度差4mm（2）疑似 皮肿胀厚度差2-4 mm；30d后复检（3）阴性 皮肿胀厚度差小于2mm。4.应用（1）选择BCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCG；（2）结核菌素试验对幼畜可做诊断结核病之用；（3）可在未接种BCG的动物中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查。5.缺点:无法证明目前是否为活动性感染,细

9、菌的分离培养鉴定：.涂片镜检：抗酸染色红色.分离培养：强酸或强碱处理后接种罗杰二氏培养基.细菌鉴定：培养特性、生化特性动物接种用于细菌的分离和毒力测定。常用的动物为豚鼠和兔。免疫学诊断1.结核菌素试验；2.检测抗体，阳性意味着病情恶化。3.ELISA 检测抗PPD的IgG，肺结核病人的阳性率为80-90。PCR 运用于分离菌株及结核病人的临床样本（痰液）的检测。,预防接种 卡介苗（BCG）接种，免疫期：4-5年。对动物一般不接种疫苗。治疗 第一线抗结核药物包括异烟肼、利福平、利福定、乙胺丁醇 和链霉素。第二线抗结核药物有对氨水杨酸、吡嗪酰胺、乙硫异烟胺和环丝氨酸等。结核分枝杆菌耐药株的增多使结

10、核病成为人类健康的一个新的严峻事实，对动物不提倡用药物治疗，定期监测及淘汰。,麻风分枝杆菌(Mycobacterium.leprae),俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲,生物学性状,形态、染色与结核分枝杆菌相似麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌麻风细胞体外人工培养至今仍未成功,犰 狳,致病性与免疫性,传播方式呼吸道也可通过接触传染发病慢,病程长麻风的免疫主要是靠细胞免疫细菌主要侵犯神经、皮肤,第16章 螺旋体（Spirochaeta）,螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物。它的基本结构与细菌类似，有细胞壁、核质，以二分裂繁

11、殖，广义上属于细菌。,螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布在人和动物体内。大部分营自由的腐生或共生生活，无致病性，只有少部分可致人和动物的疾病。,（一）主要生物学特性1.形态：螺旋状或波浪状圆柱形，具有多个螺旋。2.结构：原生质柱、轴鞭毛（轴丝）、外鞘。,3.运动性：运动活跃。4.繁殖方式：以二分裂法繁殖。5.染色：革兰氏阴性，但大多数不易着色，常用姬姆萨染色。以相差显微镜或暗视野显微镜观察。6.培养特性：多数需厌氧培养，营养要求较高，有些不能用人工培养基培养。,（二）分类：螺旋体目（螺旋体科与钩端螺旋体科）与兽医有关的属有：疏螺旋体属(Borrelia)3-10个稀疏而不规则的螺旋，呈波状

12、。密螺旋体属(Treponema)有细密而规则的螺旋，数目较多，两端尖蛇形螺旋体属(Serpulina)猪痢疾蛇形螺旋体(S.hyodysenteriae)钩端螺旋体属(Leptospira)螺旋较密螺旋体更细密而规则，一端或两端弯曲成钩状，故名。,螺旋体科各属的特征及致病性,伯氏疏螺旋体（B.burgdorferi）,引起莱姆病（Lyme disease）的病原体。莱姆病最早于1975年在美国的康尼狄克州的莱姆镇发现，故而得名，现已遍布全世界。,此病由硬蜱（Ixodes）为传播媒介，感染人和犬、牛、马等动物，可致关节炎等多种疾病。病人出现的第一个病症是被蜱叮咬的部位呈圆环状疹块。,症状,1、

13、皮肤病变：常为首发症状，特征性表现为慢性游走性红斑，初起为红色斑疹或丘疹，逐渐扩大成环殂损害。一般出现在蜱叮咬后332天，好发于躯干、大腿、腹股沟，、腋下等处。2、神经系统病变：约见于15%的患者，与皮疹同时或消退后16周出现。表现为脑膜炎、脑神经炎、舞蹈症、小脑共济失调，出现脑膜刺激征、昏迷、面瘫或三叉神经痛等。3、心脏病变：见于8%左右的患者，常于皮损出现3周后发生房室传导阻滞、心肌炎、心包炎或全心炎等。4、关节病变：约见于60%的患者，多累及大关节，尤其是膝关节，反复发作肿胀、疼痛，10%的患者可转变为慢性关节炎。5、其他表现：发热、乏力、肌痛、恶心、呕吐、结膜炎、虹膜炎、淋巴结及肝脾大等。,