《兽医微生物学教学课件》18.套式病毒.ppt

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1、第33章 套式病毒目（Nidovirales）,该目病毒包括：冠状病毒科、动脉炎病毒科及杆套病毒科三者形态、基因组大小差异悬殊，但基因结构与复制方式有共同之处：即：这些病毒均采用套式系列的转录方式。,冠状病毒科（Coronaviridae）,特性,1、球形，80220 nm。2、单分子线状、单股正链RNA，2732 kb，在RNA病毒中基因组最大；为传染性核酸。3、核衣壳呈螺旋对称。4、有囊膜:囊膜上有排列间隔较宽的大纤突,使整个病毒颗粒外形如日冕或冠状，故名。,5、胞浆内复制，通过出芽进入内质网，胞吐释放。6、冠状病毒能在多种细胞上增殖。,分类,猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible

2、 gastroenteritis virus of swine，TGEV）,病毒特点：圆形、椭圆形或多边形；单分子线状、单股正链RNA;螺旋对称核衣壳；有囊膜，有1824nm长的冠状纤突。病毒不耐酸,致病性：,1.致病 TGEV在世界各地均有发现，引致仔猪腹泻，伴有呕吐，3周龄以下的仔者有较高死亡率。但有时成年猪也有高死亡率，母猪表现为厌食、发热、腹泻及无乳等。2.致病机理 病毒通过消化道进入机体，潜伏期18-72h。仔猪易感染出现临床症状。病毒损伤肠绒毛后，绒毛上皮细胞分泌的乳糖酶及其他双糖酶减少，导致肠道内容物的渗透压增高，水从组织进入肠腔，导致腹泻。,防制 仔猪 可通过初乳及奶液获得母源

3、IgA抗体，产生被动免疫。非经肠免疫不能产生母源免疫，唯有通过黏膜免疫才有效。疫区 病毒可能在某些猪持续存在。对易感猪群的所有猪检疫、免疫接种。疫苗 弱毒疫苗免疫不佳，用强毒株灭活疫苗接种怀孕母猪可使仔猪通过母源抗体获得保护。,传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）,病毒粒子直径约为80120nm，有时多形性。可见梨状纤突(约20nm长)，放射状排列。基因组大而易发生突变，产生许多抗原性及致病性的变异株，目前世界上已分离出30多个血清型。,致病机理 传播 病毒通过气雾、污染粪便的食物而在鸡群中迅速传播。在环境中病毒可存活数天，在低温环境下，则可存活

4、数周。鸡群中往往存在持续感染的带毒者。复制 病毒先在呼吸道纤毛上皮细胞或肠道复制，可达到很高滴度。后出现病毒血症，将病毒散布到许多器官，最终导致生殖系统及肾脏的严重损伤，可产生永久性的结构损伤。,致病性：,急性高度接触性呼吸道传染病，其临诊特征是呼吸困难、发出罗音、咳嗽、张口呼吸、打喷嚏。各种年龄的鸡均可感染，但14周龄雏鸡最易感；症状主要有呼吸道型（气喘、咳嗽及呼吸抑制）、肾型等；产蛋鸡感染后可引起产蛋量下降或停止、产异常蛋。,微生物学诊断,病毒的分离培养：鸡胚接种。鸡胚发育迟缓 病毒鉴定：易感雏鸡接种；病毒中和实验；血清学实验（如荧光抗体、琼脂扩散、间接血凝等）、核酸探针、RT-PCR。,

5、防控,建立无病鸡群是根本性预防措施弱毒苗被广泛使用，7-10日龄接种疫苗，4周龄再次免疫。由于IBV不断出乳新的突变株，各型病毒免疫交叉弱，免疫效果是个问题。,动脉炎病毒科（Arteriviridae）,猪繁殖和呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus，PRRSV）,猪繁殖与呼吸综合症是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪的一种繁殖障碍和呼吸道的传染病。其特征为发热、厌食、呼吸困难，怀孕猪发生流产、产死胎和木乃伊胎。,本病已造成世界养猪业严重经济损失。我国1996年报道，已在很多省市蔓延。,1987年在美国首先发现本病，其

6、后在加拿大、德、法、荷兰、英、西班牙、比利时、澳大利亚、日本、菲律宾等国家发生。又称为“猪神秘病”(Swine mystery disease，SMD)、“猪蓝耳病”(Blue-ear disease)、猪不孕与呼吸综合征(SIRS)。,1991 首次从感染猪体内分离到病毒，命名为Lelystadvirus(LV)。随后，德国、加拿大、美国等许多国家也分离到了该病毒，其中，1992 年美国分离到病毒，命名为VR2332 毒株。目前世界上流行的PRRSV 主要有两个基因型，即以LV 为代表的欧洲型和以VR2332 为代表的美洲型。自20世纪90 年代以来，该病几乎已传播到世界上所有养猪的国家，给

7、世界的养猪业造成了巨大的经济损失。,我国郭宝清等1996 年从流产胎儿中分离到PRRSV，从而首次证实我国存在该病。2006年6月以来，“无名高热”开始发生我国的南方部分省份，后逐渐扩散和蔓延到我国大部分养猪省份和地区。发病猪临床上以体温升高、皮肤发红为特征，而且发病率高和死亡率高。此次疫病的流行和发生给我国养猪业造成了巨大经济损失，据估计疫病的流行造成病死及淘汰猪数量达数千万头。,PRRSV的危害,免疫抑制，猪抵抗力下降流产率升高，产活仔数减少仔猪、小猪、母猪、种公猪死淘率升高种(公、母)猪繁殖力降低仔猪、生长肥育猪生长缓慢或停滞,PRRSV属动脉炎病毒科，粒子呈球形，直径5560 nm，有

8、囊膜，表面有纤突，呈二十面立体对称，内含单股线状正链基因组RNA，长约15.1 kb，是4种动脉炎病毒成员中最大的。基因组RNA具有感染性.,病 原 学,病毒的变异,病毒株存在广泛变异。以LV 型为代表的欧洲型和以VR2332 为代表的北美洲型，两者核苷酸序列同源性约为60%。这两个病毒的分叉时间大约在1980 年左右。与其他目前所发现的RNA 病毒相比，PRRSV 具有较高的进化速率。PRRSV 是大约在1980 年从另外一种宿主转移给猪，并且通过改变跨膜区而适应于猪。在2006年我国出现毒力(致病性)大幅度提高的病毒株。目前已证实PRRSV 不同基因型间，甚至同一基因型间存在抗原变异。由于

9、抗原变异的存在，一种毒株制备的疫苗可能对不同毒株的感染不能起到良好的免疫保护作用。,流 行 病 学,传 染 源:病猪、带毒猪(长期带毒状态)，保毒宿主(野猪)。传播途径:高感染性是PRRS的一个标志。感染母猪可通过鼻分泌物、粪便、尿等排出病毒。低温利于病毒存活，冬季易于流行，病毒可经接触、气雾及精液传递。耐过猪可长期带毒和不断向体外排毒。主要经呼吸道感染，也可垂直传播。易感动物：猪，孕猪、初生仔猪最易感。,致病机理,猪繁殖呼吸综合症病毒感染单核细胞及巨噬细胞，造成免疫抑制。它与巨噬细胞有特殊的亲和力，能够在巨噬细胞体内增殖，并导致巨噬细胞死亡。这种病毒侵入猪群后会永远存在，并可随时激活。染病后

10、，患猪体内40的巨噬细胞会被PRRS病毒杀死，免疫功能严重缺失，从而让其它细菌、病毒得以侵入、定殖。比如，感染PRRS后，生长猪或肥育猪群中地方性肺炎的病情会明显加剧。PRRSV可通过血液循环穿过胎盘使胎猪受到感染，并导致脐带出血性病变，从而引起妊娠后期母猪流产等繁殖障碍。,发病过程蓝耳病病毒（PRRSV）进入猪机体后，侵入肺泡巨噬细胞，造成严重的间质性肺炎，入侵的第二天即可造成肺的损害，7天后损伤整个肺尖叶，呈多中心病状，病毒侵入细胞后在细胞内增殖，使巨噬细胞破裂，溶解崩溃，造成巨噬细胞数量减少，肺泡壁增厚，淋巴组织呈衰竭状态，同时降低了肺泡巨噬细胞对其他细菌和病毒免疫力。另外，因为毒株的变

11、异，导致免疫细胞识别能力降低，从而逃避抗体的作用，极易继发或并发其它疾病，使病情非常复杂。,猪感染PRRSV后，出现免疫抑制（Immunosuppression）持续性感染（Persistent Infection）抗体依赖性增强作用（Antibody Dependent Enhancement,ADE）,免疫抑制：感染猪后病毒对巨噬细胞、单核细胞和小胶质细胞的某些亚群具有严格的细胞噬性。,病毒血症、间质性肺炎、血管炎、淋巴结病、心肌炎和脑炎显著增强对其他疾病的易感性，造成严重的继发感染,造成多器官疾病：,持续性感染：,低水平的病毒复制，感染猪虽然产生免疫反应，但难以清除体内的全部病毒带毒猪将

12、病毒传播给阴性猪或垂直传播引起胎儿感染，从而造成猪群内PRRSV的长期存在，很难从猪场内清除,抗体依赖性增强作用：,被动免疫的仔猪，中和抗体效价较高时具有保护作用母源抗体水平下降到保护水平以下，PRRSV就会表现抗体依赖性增强作用，更增加了仔猪的易感性 PRRSV疫苗免疫诱导产生的抗体对强毒株的感染也具有抗体依赖增强作用，因此临床上会见到疫苗免疫后反而使病情加剧的现象，这给疫苗的应用带来不良的后果。,临 床 症 状,PRRS的临床症状变化很大，受病毒猪、免疫状态及管理因素影响。低毒株：无症状流行强毒株：严重的临床疾病。主要症状为减食、发热、呼吸困难。很多母猪早产、死产，木乃伊胎，产弱仔等。断奶

13、前死亡率高，主要症状发育不良、呼吸困难，其它病混合感染时，死亡率高。猪PRRS感染的唯一的完全一致的临床特征可能就是这个感染没有一个完全一致的特征。,发病猪体温升高至4142，精神沉郁，采食停止，饮水减少，喜卧扎堆或卧地不起。患猪耳部、腹下、臀部和四肢皮肤呈紫红色。呼吸困难、喘气、咳嗽；妊娠不同阶段的母猪均可感染发病，并发生流产，产出死胎，死胎充血而呈红色。仔猪 以228日龄感染后症状明显，死亡率高达80，早产仔猪在出生后当时或几天内死亡，大多数出生仔猪表现呼吸困难、肌肉震颤、后肢麻痹、共济失调、打喷嚏、嗜睡，有的仔猪耳紫和躯体末端皮肤发绀。,猪繁殖与呼吸综合征-发病猪群,猪繁殖与呼吸综合症：

14、病猪呼吸困难、卧地不起,猪繁殖与呼吸综合征-发病猪,猪繁殖与呼吸综合症：哺乳仔猪虚弱、消瘦，耳潮红或发紫，有的病猪共济失调，后躯瘫痪，站立不起,猪繁殖与呼吸综合症：病仔猪体质衰弱,猪繁殖与呼吸综合症：患猪两耳充血、淤血,猪繁殖与呼吸综合症：病猪耳部皮肤淤血、发绀，呈蓝色（蓝耳）,猪繁殖与呼吸综合症：病猪皮肤充血、淤血，发红,猪繁殖与呼吸综合症：病死猪皮肤充血、淤血，发红,猪繁殖与呼吸综合症：病猪流产,猪繁殖与呼吸综合症：病猪流产的死胎,猪繁殖与呼吸综合症：木乃伊胎儿,猪繁殖与呼吸综合症：病猪肺出血,猪繁殖与呼吸综合症：病猪脾脏出血、淤血,猪繁殖与呼吸综合症：病猪肝脏出血、坏死,猪繁殖与呼吸综合

15、症：病猪肾脏充血、出血,诊断,1.根据流行病学、临床症状和病理变化，可以做出初步诊断。确诊须进行实验室检查。怀孕猪流产，死胎，木乃伊化胎儿，病猪皮肤淤血、蓝耳，呼吸困难，剖检时可见肺脏出现间质性肺炎。,2.病毒分离与鉴定 将病猪的肺、死胎儿的肠和腹水、胎儿血清、母猪血液、鼻拭子和粪便等病料进行病毒分离。病毒较易失活，应迅速采用，接种猪肺泡巨噬细胞或Marc-145细胞培养，分离鉴定病毒。3.血清学试验 间接ELISA法 用于检测抗体，其敏感性和特异性都较好。4.RT-PCR法 能直接检测出病料的PRRSV。,引种到无病猪场时，常规隔离和检疫很重要。接种疫苗：弱毒苗、灭活苗有效，对感染猪群发挥一定作用。,防 制,发病时采取的措施,(1)确诊后应对病猪实行隔离、扑杀。(2)严格消毒污染及可能污染的环境、用具等。病猪尸体应实行深埋，焚烧或化制处理。(3)对疫区内尚未发病的猪和疫区周围的猪进行紧急疫苗接种。(4)加强市场检疫，严禁贩卖、屠宰、加工和销售病死猪。(5)治疗要慎重，早期大量用药进行治疗可能增加病猪的死亡，如有血清，及时应用有较好的疗效。,