《兽医微生物学教学课件》10.支原体.ppt
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1、支原体又叫霉形体,属柔膜体纲,是一类无细胞壁的细菌,具有多形性,能通过细菌滤器。是目前已知能在无生命的培养基中繁殖的最小原核细胞型微生物。,第17章 支原体(Mycoplasma),特点:(1)无细胞壁,细胞柔软,多形性,能通过细菌滤器(多形性、可塑性、滤过性)(2)在人工培养基中生长繁殖,形成“煎荷包蛋状”菌落(3)基因组较小,(4)以二分裂或芽生方式繁殖(5)对青霉素有抵抗力 常污染实验室培养的细胞及生物制品,一、形态与染色0.20.3m,外围只有胞浆膜,常呈球状、两极状、环状、杆状偶见分枝丝状,无鞭毛,革兰氏染色呈阴性,着色不良,姬姆萨或瑞氏染色良好,呈淡紫色。支原体的细胞膜具有三层结构
2、,内、外层主要是蛋白质,中间层主要是脂质(固醇含量高,约占36%)。凡能作用于胆固醇的物质(如两性霉素B、皂素等)均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。,二、培养特性 由于基因组小,合成能力较弱,营养要求较高,需添加外源脂肪酸、甾醇、辅酶I、氨基酸等。生长缓慢(2-6d长出微小菌落),菌落呈“荷包蛋状”(猪肺炎支原体除外),菌落中心深入培养基中,致密、色暗;周围长在培养基表面,较透明。,可在鸡胚的卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长,有些菌株可致鸡胚死亡。也能在细胞培养中生长,不一定引起细胞病变,但可妨碍病毒的细胞培养。,液体培养基中,生长数量少,不易见浑浊,仅有 小颗粒沉于管底。,三、与细菌L型的区别,
3、支原体 L型遗传上与细菌无关 与原菌有关,常可以回复需甾醇 一般不需甾醇在一般培养基中稳定 大多需要高渗培养生长慢,菌落小 菌落稍大 0.1-0.3mm 菌落中心深埋于培养基中 菌落生长于基质表面,不易刮除,光亮、透明 易于刮除,较暗、不透明液体培养混浊度低 有一定混浊度 对洋地黄皂苷敏感 不敏感,四、生理生化特性,根据对糖类分解利用能力不同,分为两群:一群能分解葡萄糖及其他多种糖类产酸不产气,称发酵型。另一群不分解糖,称非发酵型,但能利用精氨酸作为碳源和能量来源。,常用的生理生化实验:,葡萄糖发酵和精氨酸水解试验尿素水解试验(区分脲原体与其它支原体)洋地黄苷敏感性试验,五、抗原及分型,支原体
4、的抗原由细胞膜上的蛋白质和类脂组成。可用相应抗血清做生长抑制试验、代谢抑制试验、免疫荧光试验及ELISA等进行鉴定和分型。,病原性支原体一般不侵入机体组织与血液常常定居于多种动物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等,引起牛传染性胸膜肺炎、猪喘气病、禽败血霉形体感染等,传播途径主要是呼吸道。单独感染时,常常症状轻微或无临床表现,当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素作用引起疾病。特点是潜伏期长,慢性及地方性流行。主要毒力因子:胞黏素,与黏膜呼吸道上皮细胞的纤毛有关,粘附导致纤毛损害并脱落从而使肺易发继发感染。可通过不同机制引起细胞损伤,如获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜的损伤,释放神经
5、(外)毒素、磷酸脂酶等。,六、致病性,七、诊断直接镜检:形态多样,意义不大。分离培养:过滤除菌病料,进行细菌L型鉴定及2-3次克隆、纯化(0.45m过滤),初代分离在含CO2及高湿环境中生长。生理生化反应:洋地黄苷、脲酶及葡萄糖、精氨酸分解试验。缩小选用抗血清的范围,种的鉴定必须用血清学方法最后确定,这与细菌鉴定到种只需作生理生化测定不同。血清学检查:生长抑制试验、代谢抑制试验等,第2节 猪肺炎支原体,猪地方流行性肺炎(猪喘气病)的病原。形态多样,大小不等,以环形为主。兼性厌氧,营养要求高,菌落不呈“荷包蛋状”以哺乳仔猪和幼猪最为易感,表现为咳嗽和气喘,发病率高,死亡率低。存在于病猪肺的细支气
6、管和支气管上皮细胞表面和纤毛,经呼吸道传播,通常由病猪传给低日龄易感猪,也可经风力传播数公里之遥。,鸡毒支原体,主要感染鸡和火鸡,引起慢性呼吸道病(Chronic Respiratory Disease,CRD)。病原体存在于病鸡和带菌鸡的呼吸道、卵巢、输卵管和精液中,可通过垂直传递或交配将病传遍整个鸡群,鸡群一旦染病难以彻底根除。在其它病原微生物继发感染时加重病情。,嗜血支原体,寄生于红细胞表面,大多球状。对青霉素及同类药物有抗性,体外不能培养。感染多无临床症状,在隐性感染的动物体内可存在数年之久。嗜血支原体具有黏附素,菌体的黏附致使红细胞凹陷进而破坏细胞骨架,增加其脆性。嗜血支原体感染的主
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