项目一丙氨酸的一般检查.ppt

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1、项 目 一丙氨酸的一般杂质检查,工 作 任 务 分 解,主要检查项目,氯化物检查,砷盐检查,铁盐检查,重金属检查,其他项目,硫酸盐、酸碱度、溶液颜色、易炭化物、炽灼残渣、干燥失重、可见异物,一.氯化物的检查,1.供试品的配制：称取丙氨酸0.30g，加水搅拌溶解使成25ml，加稀硝酸10ml，置50ml纳氏比色管，加水使成约40ml，摇匀，即为供试液。,一.氯化物的检查,2.标准品的配制：另取标准氯化钠溶液6.0ml，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。,一.氯化物的检查,3.测定方法及判断标准：于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用

2、水稀释使成50 ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。,一.氯化物的检查,4.操作时的注意事项：（1）供试品的称量（2）硝酸在检查中的作用（3）标准氯化钠溶液的量（4）比浊的方法,一.氯化物的检查,（1）供试品的称量：称重范围：0.2950.305g试验中供试品与试药等“称重”或“量取”的量，均以阿拉伯数表示，其精确度可根据数值的有效数位来确定，如称取“0.1g”，系指称取量可为0.06g 0.14g；称取“2g”，系指称取量可为1.5g2.5g；称取“2.0g”，系指称取量可为1.95g2.05g；称取2.00g，系指称取量可为1.

3、995g2.005g；依次类推。,一.氯化物的检查,（2）硝酸在检查中的作用加入硝酸可加速氯化银沉淀的生成、产生较好的乳浊并可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银及氧化银沉淀的形成而干扰检查。以50ml中含稀硝酸10ml为宜。,一.氯化物的检查,（3）标准氯化钠溶液的量药典规定的检查方法中标准氯化钠溶液每1ml相当于10gCl-，而以50 ml中含Cl-0.050.08mg（相当于标准氯化钠溶液5.08.0ml）所显混浊梯度明显，便于比较。,一.氯化物的检查,（4）比浊的方法同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。（平行操作原则）,原理：氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生

4、成氯化银的胶体微粒而显白色混浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银混浊比较，判定供试品中氯化物是否符合限量规定。,Cl-+Ag+,Cl-+Ag+AgCl,5.检查原理：,一.氯化物的检查,杂质检查的要求及限量计算,1.杂质限量的概念：杂质限量是生物药物中杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示一般不要求准确测量，只要求杂质的量在一定范围（限度）内。,2.杂质的限量计算：杂质限量（L）的计算公式如下：,杂质检查的要求及限量计算,2.杂质的限量计算：如果供试品（S）所含杂质的量由容量法测定，杂质限量（L）的计算公式为：,杂质检查的要求及限量计算,3.药物的杂质检查

5、法:,(1)对照法 限量检查法（Limit Test）特点：不需知道杂质的准确含量,杂质检查的要求及限量计算,(2)灵敏度法,系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。以待检杂质反应的灵敏度作为该杂质的最大允许量。特点：不需对照品,杂质检查的要求及限量计算,(3)比较法,含量测定法：测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、旋光度、pH值等，不得超过规定的值。特点：准确测定杂质的量；不需对照品,杂质检查的要求及限量计算,例题：检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为 A.0.20g B.2.0g C0

6、.020g D.1.0g E.0.10g,已知：c1 g/ml1106 g/mlV2ml L0.0001%,一.氯化物的检查,知识拓展1：其他注意事项：1.若供试品有色，需经处理后方可检查。（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。,一.氯化物的检查,知识拓展1：其他注意事项：1.若供试品有色，需经处理后方可检查。（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。,2.当有其它干扰物质存在时，必需在 检查前除去（1）碘中氯化物的检查（2）碘化物中氯化物的检查,知识拓展1：其他注意事项：,一.氯化物的检查,（1）碘中氯化物的检查可在供试品中加入一定量的

7、酸和过氧化氢溶液，加热煮沸，使将I-氧化成产物I2并挥发、溶液澄明无色后，再依法检查。,知识拓展1：其他注意事项：,一.氯化物的检查,（1）碘中氯化物的检查也可以利用碘化银沉淀稳定，在氨液中不溶解，而氯化银、溴化银沉淀在氨溶液中溶解的性质，除去碘化物的干扰。,知识拓展1：其他注意事项：,一.氯化物的检查,（2）碘化物中氯化物的检查将供试品加水研磨、滤过，于滤液中加锌粉使碘还原为无色的碘化物，再在氨碱性条件下滴加硝酸银试液使生成碘化银沉淀而滤除。向滤液中加入硝酸，破坏络离子后，AgCl 沉淀复析出，再与一定量标准氯化钠溶液生成的沉淀比较。,知识拓展1：其他注意事项：,一.氯化物的检查,3.不溶于

8、水的有机药物,（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。,（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。,（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。,一.氯化物的检查,知识拓展1：其他注意事项：,拓展知识2：一般杂质检查规则,药品检验操作标准规定：1.遵循平行操作原则,（1）仪器的配对性：如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品的同步操作,拓展知识2：一般杂质检查规则,2.正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过2%，1g不超过1%,3.正确的比色、比浊方法,4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复

9、查二份,拓展知识2：一般杂质检查规则,二.铁盐的检查,1.供试品的配制：称取丙氨酸1.0g，加水搅拌溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml后，加30%硫氰酸铵溶液3 ml，再加水适量稀释成50 ml，摇匀，得供试溶液。,二.铁盐的检查,2.标准品的配制：另取标准铁溶液1.0 ml，置50ml纳氏比色管中，加水使成25 ml，加稀盐酸4 ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35 ml，加30%硫氰酸铵溶液3 ml，再加水适量稀释成50 ml，摇匀，即为对照溶液。,二.铁盐的检查,3.测定方法及判断标准：同置于白色背景上，从比色管上方向下

10、观察、比较，供试管颜色不得深于对照管。,4.操作时的注意事项：（1）标准溶液的配制（2）所加各试剂的作用（3）色调不一致时的处理,二.铁盐的检查,（1）标准溶液的配制用FeNH4(SO4)212H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10g Fe3+/ml，50ml溶液中含1050g的Fe3+显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.05.0ml,二.铁盐的检查,（2）所加各试剂的作用,二.铁盐的检查,反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。,试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行,（2）所加各

11、试剂的作用,二.铁盐的检查,铁盐检查时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+,（3）色调不一致时的处理为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。,二.铁盐的检查,二.铁盐的检查,5.铁盐检查法的原理：原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性的硫氰酸铁配位离子，再与一定量标准铁溶液用同法处理后所显颜色进行比较。,Cl-+Ag+,Fe3+n SCN-Fe(SCN)n3nn=16（红色）,三.重金属的检查,1.供试品的配制：称取丙氨酸2.0g，

12、置25 ml纳氏比色管，加水23 ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2 ml，得供试溶液。,2.标准品的配制：取25 ml纳氏比色管，加标准铅溶液2 ml，再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2 ml，用水稀释成25 ml，得对照溶液；,三.重金属的检查,3.测定方法及判断标准：在供试管和对照管中分别加入硫代乙酰胺试液2 ml，摇匀，放置2min，同置白纸上，自上向下透视，供试管中显示的颜色与对照管比较，不得更深,三.重金属的检查,4.操作时的注意事项：（1）测定的范围（2）溶液pH值的影响,三.重金属的检查,（1）测定的范围用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止Pb2+水解），配制和贮存用玻璃

13、容器均不得含铅。标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10g Pb2+/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含1020g的Pb2+。,三.重金属的检查,（2）溶液pH值的影响 本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为33.5，沉淀较完全，酸度增大，重金属离子与硫化氢呈色变浅，甚至不显色。因此供试品若用强酸溶解，或在处理中用了强酸，在加入硫代乙酰胺试液前，应先加氨水至溶液对酚酞指示液显中性，再加pH3.5醋酸盐缓冲液调节溶液酸度。,三.重金属的检查,5.重金属检查法的原理：原理：硫代乙酰胺在弱酸性（pH3.5醋酸盐缓冲液）条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子（以Pb2+为代表）

14、生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较。,Cl-+Ag+,CH3CSNH2+H2O CH3CONH2+H2SH2S+Pb2+PbS+2H+,三.重金属的检查,检查原理：对照法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物,三.重金属的检查,（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。,A.外消色法：即在加硫代乙酰胺试液前在对照溶液管中滴加少量稀焦糖溶液(取蔗糖用小火加热后，再混悬于水中做成，水溶液呈黄、褐或棕黑色)，使之与供试品溶液管的颜色一致，然后再加硫代乙酰胺试液比色。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三.重金属的检查,（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。,知识拓

15、展：检查方法的干扰及排除,三.重金属的检查,B.内消色法,C.改用第四法，微孔滤膜过滤法,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三.重金属的检查,（2）若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（0.51.0g）还原Fe3+为Fe2+，可消除干扰。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三.重金属的检查,（3）若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查（加硫化钠试液检查铅盐）。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,三.重金属的检查,（4）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰

16、。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法检查（硫化钠法）。,例题：中国药典（2000年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（多选）A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C.使产生的红色产物颜色更深 D防止干扰 E便于观察、比较,例题：葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（单选）A.用硫代乙酰胺为标准对照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下观察,四.砷盐的检查,1.检查装置的搭建：测试时，于导管C中装入醋酸铅棉花约60mg（装管高度为6080m

17、m），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为 宜），盖上旋塞盖E并旋紧，即得。,四.砷盐的检查,2.标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2 ml，置A瓶中，加盐酸5 ml与水21 ml，再加碘化钾试液5 ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粒2g，立即将已照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置2540水浴中，反应45min，取出溴化汞试纸，即得。,四.砷盐的检查,3.测定方法及判断标准：称取丙氨酸2.0g，置A瓶中加水23 ml溶解后，加盐酸5 ml，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液5 ml”起，依法操作，得供试品砷斑。供试品砷

18、斑的颜色应不深于标准砷斑。,4.操作时的注意事项：（1）氢气产生的速度（2）砷溶液浓度的大小（3）砷的化合价的影响（4）醋酸铅棉花的作用（5）砷斑的稳定性及保存,四.砷盐的检查,（1）氢气产生的速度 氢气产生的速度过缓或过于剧烈都将影响砷化氢的逸出速度，使砷斑的色泽和清晰程度受到影响。而氢气的发生速度与溶液的酸度、锌粒的粒度与用量以及反应温度等有关。所用锌粒应无砷，粒度较大时，用量酌情增加，反应时间延长为1h。,四.砷盐的检查,（2）砷溶液浓度的大小用三氧化二砷配制贮备液，临用前取贮备液配制标准砷溶液，每1ml标准砷溶液相当于1g的As。中国药典制备标准砷斑采用2ml标准砷溶液,所得砷斑清晰。

19、砷溶液浓度过大或偏小，制得的砷斑将过深或偏浅，影响比色。因此，药物的含砷限量不同时，应按规定限量改变供试品取用量。,四.砷盐的检查,（3）砷的化合价的影响五价砷在酸性溶液中也能被金属锌还原为砷化氢，但生成砷化氢的速度较三价砷慢，故在反应液中加入碘化钾及氯化亚锡将五价砷还原为三价砷，碘化钾被氧化生成的碘又可被氯化亚锡还原为碘离子，后者与反应中产生的锌离子能形成稳定配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行。,四.砷盐的检查,（3）砷的化合价的影响氯化亚锡与碘化钾还可抑制锑化氢的生成，因锑化氢也能与溴化汞试纸作用生成锑斑。在本试验条件下，100g锑存在也不致干扰测定。氯化亚锡又可与锌作用，在锌粒表面

20、形成锌锡齐，起去极化作用，从而使氢气均匀而连续地发生。,四.砷盐的检查,（4）醋酸铅棉花的作用醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装管高度6080mm。,四.砷盐的检查,（5）砷斑的稳定性及保存砷斑不稳定，应立即观察。,四.砷盐的检查,5.砷盐检查法的原理：砷盐是有毒的物质，多由药物生产过程中所应用的无机试剂引入，和重金属一样，在多种药物中要求严格控制其限量。中国药规定主要采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法检查药物中的微量砷盐。,四.砷盐的检查,5.砷盐检查法的原理：原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸

21、产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液同条件下所生成的砷斑比较，判断砷盐的含量。,知识拓展丙氨酸的砷盐检查,检查原理：对照法,遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四.砷盐的检查,（1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四.砷盐的检查,（2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四.砷盐的检查,（3）具环状结构的有机药物，要

22、先行有机破坏后再进行检查。常用的有机破坏方法：,碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法 酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查,知识拓展：检查方法的干扰及排除,四.砷盐的检查,（4）本法适用于不含Sb或含Sb量小于100g的供试品。,例题：在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是（单选）A.氯化物 B.硫酸盐C.醋酸盐 D.砷盐 E.淀粉,例题：砷盐检查法中，在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是（单选）A.吸收砷化氢 B.吸收溴化氢C.吸收硫化氢 D.吸收氯化氢E.吸收锑化氢,例题：古蔡氏法中，SnC12的作用有（多选）A.使As5+As3+B.除去H2SC.除去I2 D.组成锌锡齐E.除去

23、其它杂质,五.硫酸盐的检查,1.供试品的配制：称取丙氮酸1.0g，加水搅拌溶解使成约40ml，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2 ml，摇匀，即为供试液。,2.标准品的配制：另取2.0ml标准硫酸钾溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2 ml，摇匀，即得对照溶液。,五.硫酸盐的检查,3.测定方法及判断标准：于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5 ml，用水稀释至50 ml，充分摇匀，放置10 min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，供试管不得浓于对照管。,五.硫酸盐的检查,4.操作时的注意事项：（1）测定的范围（2）检查中盐酸的作用（3）供试品颜色

24、的消除,五.硫酸盐的检查,（1）测定的范围标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液15ml。,五.硫酸盐的检查,（2）检查中盐酸的作用 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。,五.硫酸盐的检查,（3）供试品颜色的消除,五.硫酸盐的检查,若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。,六.炽灼残渣的检查,1.供试品的灰化：取丙氨酸约1g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷；,2.炽灼残渣的测定：加硫酸1 ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700800炽灼使完全灰化，移

25、置干燥器内，放冷，精密称定，再在700800炽灼至恒重，残渣不得过0.1%。,六.炽灼残渣的检查,操作方法简析：,炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼.5h后进行。,3.操作时的注意事项：（1）供试品的称量（2）炽灼残渣的计算（3）其他注意事项,六.炽灼残渣的检查,（1）供试品的称量,六.炽灼残渣的检查,供试品的取用量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。样品过多，炭化和灰化时间太长；过少，称量误差增大。一般应使炽灼残渣量为12mg，残渣限量一般为0.1%0.2%，如限量为0.1%，取样约1g；若为0.05%，取样2g；限量为1%以上者，取样可在1g以下。,（2）炽灼残渣的计算,

26、六.炽灼残渣的检查,（3）其他注意事项,六.炽灼残渣的检查,若残渣需留作重金属检查，则500600 炽灼至恒重：一些重金属(如铅)于高温下易挥发。,含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。,（3）其他注意事项,六.炽灼残渣的检查,加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化。,1.酸碱度检查法：生物药物加水制成的溶液其pH应保持恒定，否则显示受到酸、碱的污染，或发生了水解反应。检查药物的酸碱度是保证其质量的一项重要工作。中国药典规定溶液pH小于7.0称为“酸度”、大于时称为“碱度”、在7.0上下两侧的称为酸碱度。,七.酸碱度的检查,2.酸碱度检查法注意事项：（1）酸碱滴定法（2）指示

27、液法（3）pH值测定法,七.酸碱度的检查,1.溶液颜色的检查方法：（1）第一法 目视比色法原理：采用与标准比色液对照来判断供试品溶液颜色是否符合要求。,八.溶液颜色的检查,2.标准比色液的配制,八.溶液颜色的检查,3.溶液颜色检查法的操作：操作方法：取供试品，加水溶解，置于25ml纳氏比色管中，加水稀释至10ml。另取规定色调和色号的标准比色液10ml，置于另一纳氏比色管中，两管同置白色背景上，自上向下透视或平视观察，供试品管呈现的颜色与对照管比较，不得更深。,八.溶液颜色的检查,4.溶液颜色检查法的注意事项：（1）标准比色液的选择（2）观察方式的选择,八.溶液颜色的检查,5.溶液颜色检查的第

28、二法：第二法 分光光度法取规定量供试品，加水溶解使成10ml，必要时滤过（除去不溶性杂质对吸光度测定的干扰），滤液于规定波长处照分光光度法测定，吸光度不得超过规定值。,八.溶液颜色的检查,1.易碳化物检查法：易炭化物是指药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的有机杂质。,检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。,九.易碳化物的检查,2.易碳化物检查法的操作：取内径一致的比色管两支：甲管中加各品种项下规定的对照液5ml；乙管中加硫酸含H2SO4 94.5%95.5%（g/g）5ml后，分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。静置15min后，将甲、乙两管同置白色背景前，平视观察。,九

29、.易碳化物的检查,3.易碳化物检查法的注意事项：,注意事项及讨论：（1）固体供试品的处理（2）易炭化物所呈现颜色的影响因素,九.易碳化物的检查,1.干燥失重检查法,干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：,十.干燥失重的检查,（一）常压恒温干燥法,适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105。,干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。,十.干燥失重的检查,（二）干燥剂干燥法,适用于受热易分解或挥发的供试品。,干燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5。,十.干燥失重的检查,（三）减压干燥法,适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除

30、的药物。,除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。,十.干燥失重的检查,（四）热分析法 热分析法是在程序控制温度下，精确记录待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程所发生的晶型转变、熔融、升华、吸附等物理变化和脱水、热分解、氧化还原等化学变化，对物质进行物理常数（如熔点和沸点）的确定、鉴别和纯度检查的方法。,十.干燥失重的检查,十一、水分测定法,药品中的水分包括结晶水和吸附水。过多的水分可使药物的含量降低，还可导致药物的水解、霉变，从而直接影响其理化性状及生理作用。应对药品中的水分进行限量控制。中国药典(2005年版)采用费休氏法和甲苯法测定药物中的水分，尤以费休法为主。

31、,十一、水分检查,（一）费休水分测定法,特点：操作简便、专属性强、准确度高，适用于受热易被破坏的药物，因而成为国际上通用的水分测定法。USP(25版)、BP(2000年版)、JP(14版)亦均采用此法测定水分。,（一）费休水分测定法,费休水分测定法为非水氧化还原滴定反应，采用的标准滴定液称费休试液，是由碘、二氧化硫、吡啶和甲醇按一定比例组成。,1 原 理,利用碘氧化二氧化硫时，需要一定量的水分参加反应。每消耗1mol碘就证明存在着1mol的水，从消耗碘的量可以测定出水分含量。,I2+SO2+H20 2HI+SO3,但硫酸酐吡啶不稳定，加入无水甲醇使其转变成稳定的甲基硫酸氢吡啶。,12+SO2+

32、3C5H5N+H2O 2C5H5NHI+C5H5NSO3,C5H5NSO3+CH3OH C5H5NHSO4CH3,由于上述反应是可逆的，加入无水吡啶能定量地吸收HI和S03，形成氢碘酸吡啶和硫酸酐吡啶。,所以滴定的总反应为：每1mol水需要1mol碘、1mol二氧化硫、3mol吡啶和1mol甲醇。无水吡啶和无水甲醇不仅参与滴定反应，而且还起溶剂作用。,12+SO2+3C5H5N+CH3OH+H2O 2C5H5NHI+C5H5NHSO4CH3,2方 法,滴定终点的指示可采用下列两种方法(1)目视法:观察滴定过程中溶液颜色的变化，化学计量点前溶液呈浅黄色，化学计量点后稍过量一滴的费休试液使溶液呈红

33、棕色(碘的红棕色)，即溶液由浅黄色变为红棕色即为滴定终点。当供试品本身有色而干扰终点判断时，应采用永停滴定法。,(二)永停滴定法,当滴定至电流计指针突然偏转，并持续数分钟不退回，即为滴定终点；本法较目视法灵敏、准确。采用永停法指示终点时，其滴定装置应严密，用磨口塞，进样侧管也应考虑防湿。铂电极临用前活化，可采用含有少量三氯化铁的硝酸或铬酸清洁液浸泡23min，水洗干燥后备用。,中国药典附录采用水分测定仪直接标定费休试液，或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约30mg，加无水甲醇25ml，用费休试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指定终点；另作空白试验，按下式计算费休试液的滴定度(每

34、1ml费休试液相当于水的重量mg)。,十二、可见异物检查法,是用以检查存在于注射剂、滴眼液中，在规定条件下目视即可检查到的不溶性物质，粒径或者长度通常大于50微米。,十二、可见异物检查,（1）灯检法：取供试品20支（瓶），除去容器标签，擦净外壁，轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮，置供试品于遮光板边缘处，分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部使药液轻轻旋转，用目视检测。,十二、可见异物检查,（1）灯检法：无色注射剂或滴眼剂检查的光照度为10001500lx；透明塑料容器或有色溶液注射液或滴眼剂检查的光照度应为20003000lx；混悬型注射液和混悬型滴眼剂检查的光照度应为4000lx

35、，仅检查色块、纤毛等可见异物。,十二、可见异物检查,（1）灯检法的注意事项：灯检法应在暗室中进行。检查人员应无色盲，且远距离和近距离视力均应为4.9或4.9以上。,十二、可见异物检查,（1）灯检法的注意事项：旋转或翻转使可见异物悬浮时注意不能产生气泡。用有色透明容器包装或液体色泽较深的品种不适用灯检法，应选用光散射法。,十二、可见异物检查,（2）光散射法当一束单色激光照射溶液时，溶液中存在的不溶性物质使入射光发生散射，散射的能量与不溶性物质的大小有关。本法通过对溶液中不溶性物质引起的光散射能量的测量，并与规定的阈值比较，来检查可见异物。,十二、可见异物检查,必须知识补充：生物药物的杂质及其来源

36、,1.生物药物杂质的概念：是指生物药物中存在的无治疗作用或影响生物药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。,杂质（forin、impurities）是指：(1)有毒副作用的物质(2)本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质(3)本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质,生物药物的杂质及其来源,1.生物药物杂质的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度，是药物质量优劣的综合指标，药物中的杂质是影响药物纯度的主要方面，因此，药物的杂质检查常常称为药物的纯度检查。,药物的纯度与化学试剂的纯度的区别？,生物药物的杂质及其来源,2.生物药物杂质的来源：第一个来源是生物

37、药物的生产过程中引入；第二个来源是生物药物在贮存过程中受外界条件的影响，引起理化性质的变化而产生。,1.生产过程中引入,（1）原料、反应中间体及副产物,（2）试剂、溶剂、催化剂类,（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质,生物药物的杂质及其来源,2.贮藏过程中产生,水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等。,（1）易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等,（2）易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等,生物药物的杂质及其来源,（3）微生物的污染：青霉素酰化酶、黄曲霉素等,（4）药物结构的变化：同分异构体、同质异晶现象等,

38、例题：在药物生产过程中引入杂质的途径为 A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D.所用金属器皿及装置等引入杂质 E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质,生物药物的杂质及其来源,3.生物药物杂质的分类：一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种生物药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质：中国药典附录中规定了氯化物、硫酸盐、硫化物、铁盐、重金属、砷盐、酸碱度、溶液颜色、易炭化物、炽灼残渣、干燥失重、水分、可见异物等一般杂质检查的项目。,生物药物的杂质及其来源,3.生物药物杂质的分类：特殊杂质是指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不同而异：如阿司匹林中的游离水杨酸、如胰蛋白酶中检查糜蛋白酶。,