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1、宠物人兽共患病汉坦病毒的诊治要点汉坦病毒是布尼亚病毒科中的一属病毒,在全球分布广泛,主要以啮齿动物和食虫动物为宿主。人感染汉坦病毒后导致疾病和其临床症状具有多样,主要引起2种严重的疾病:肾综合征出血热(HFRS)和汉坦病毒性肺综合征(HPS),主要流行于欧亚大陆和美洲大陆。目前,人感染汉坦病毒引起发病的情况时有发生。1976年,韩国李镐汪教授等首先从疫区的黑线姬鼠肺组织中分离到引起HFRS的汉坦病毒,1993年在美国西南部新墨西哥、科罗拉多、犹他和亚利桑那4个州交界的四角地区首次暴发汉坦病毒肺综合征。近年来随着各国科学家的研究,相继从不同宿主动物中分离出汉坦病毒,已发现的汉坦病毒至少有30个血
2、清型或基因型。我国是受该病危害最严重的国家,近年来年发病数在1万人左右,除新疆、西藏、台湾和海南外,均有病例报告,有数据显示全球90%以上的HFRS病例发生在我国。一、病原(一)分类地位汉坦病毒为布尼亚病毒科(BUnyaViridae)汉坦病毒属(hantavirus),该属是布尼亚病毒科中唯一由非节肢动物传播的病原。该属病毒种类很多,包括:汉坦病毒(Hanta-anvirus),又名肾综合征出血热病毒(HRSV),于1978年从黑线姬鼠体内分离得到;辛农卜来病毒(SinNombrevirus),1993年在美国和加拿大等地发现,可引起人的急性呼吸道综合征即汉坦病毒肺综合征(HPS);多布拉伐
3、病毒(Dobravavirus);汉城病毒(Seoulvirus);普马拉病毒(Puumalavirus);纽约病毒(NewYorkvirus);贝尤病毒(Bayouvirus);黑河沟病毒(BlackGreekCanalvirus);安德斯病毒(AndeSVirUS)等。随着研究的进一步深入,一些新的汉坦病毒仍在不断被发现,并带来新的潜在威胁。(二)形态学及基本特征病毒粒子为球形或椭圆形,直径为7521Onm(平均为122nm),基因组为单股负链RNA,病毒外层是双层脂质包膜,表面有由糖蛋白Gl和G2组成的刺突。病毒的包膜中存在有3种大小的病毒核衣壳,呈螺旋对称,由病毒核蛋白N,RNA聚合酶
4、L分别包绕病毒核酸的不同片段(L,M,S)组成,表现为疏松的带粗颗粒的丝状结构(三)培养特性汉坦病毒最敏感的细胞系是非洲绿猴肾细胞(VerO-E6)和人非小细胞肺癌细胞(A549),在VerO-E6细胞株上进行人工培养,盲传数代后可用荧光抗体等技术检出。此外,该病毒也可在BHK-21CI3、人血管内皮细胞、巨噬细胞、白细胞、金黄地鼠肾细胞(GHKC).长爪沙鼠肾细胞(MGKC)及恒河猴肾(LLC-MK-2)等多种细胞中增殖。病毒增殖缓慢,一般不引起明显的CPE,有时可以出现形态不一的病毒包涵体,但感染细胞仍可生长繁殖。(四)理化特性汉坦病毒对热(6(C,60min),酸(pH空斑减少中和试验(
5、PRNT)、血凝抑制试验(HI)等。取发病早期及恢复期双份血清,用IFA.ELISA、HI等方法检测病毒特异性抗体,如恢复期血清较急性期血清抗体效价升高4倍以上即有诊断意义。IFA,ELISA,Westernblotting主要是对汉坦病毒特异性的IgM和IgG进行检测。IgM检测是急性感染诊断的重要方法,特别是二次感染检测。PRNT是血清学检验的金标准,是应用最早的经典的汉坦病毒分型方法,但是PRNT需要在生物安全三级实验室进行操作。高密度颗粒凝集试验(HDPA)是新建立的汉坦病毒检测方法,该方法操作简便,特异性高,适用于临床快速诊断和现场流行病学调查。2 .病原学检测(1)病毒核酸检查。用
6、同位素、生物素等标记的病毒基因S或M节段为特异性探针,与待检标本进行核酸杂交试验,或者用RT-PCR法从血清、血浆、单个核细胞和血凝块中检测病毒RNA进行汉坦病毒感染的辅助诊断。(2)病毒分离。取病人急性期血液、尸检材料或野鼠脏器等制成10%悬液,用Vero-E6单层细胞培养法,或采用24日龄乳鼠、黑线姬鼠等动物接种法进行病毒分离,再以免疫荧光法测定单层细胞内或鼠肺组织片内的病毒特异性抗原,作为病毒增殖的指标。最后可以通过病毒的形态学、血清学鉴定或PCR等方法确定病毒及其型别。(3)特异性抗原检查。用免疫荧光法或酶标抗体法检测患者的白细胞或尿沉渣细胞内的特异抗原。前者阳性率达82.6%,后者达
7、71%。五、防控措施(一)监测为及时了解HFRS流行动态和掌握流行规律,可以通过建立监测点,开展人间疫情监测、血清学监测、宿主动物监测、疫源地和疫区监测、控制效果监测和流行趋势预测等工作。(一)预防1 .消灭传染源灭鼠是预防该病的有效措施,有数据显示鼠密度控制在1%左右可有效控制本病。此外,还要注意处理鼠的排泄物,加强实验动物的管理。2 .切断传播途径加强个人防护,避免呼吸道及接触感染。并保证食品和个人卫生。3 .免疫接种人接种肾综合征出血热疫苗后能产生特异性中和抗体,起到免疫保护作用,在重点疫区、重点人群可通过注射灭活疫苗进行预防该病。我国供应的HFRS疫苗有出血热沙鼠肾细胞I型灭活疫苗、出血热乳鼠脑纯化I型灭活疫苗、出血热地鼠肾细胞II型灭活疫苗以及出血热双价灭活疫苗。汉坦病毒肺综合征目前还没有疫苗。(三)疫情处置暴发疫情后,立即对暴发点采取灭鼠防鼠、预防接种等综合性防制措施。1 .灭鼠灭鼠3周后的鼠密度室内应达到K以下,室外应达到3%以下。预防接种:对暴发点内的高危人群实施应急预防接种,接种率应达80%以上。2 .灭螭对床铺草垫、地面、室外草丛、柴草堆等处采用药物灭蜻。环境治理:大力开展爱国卫生运动,整治和改善环境卫生。
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