重组基因导入受体细胞.ppt
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1、重组基因导入到受体细胞,生物与食品工程学院,受体细胞,能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞。受体细胞应具有的特性:1.便于导入2.能使重组DNA分子稳定存在于细胞中3.便于筛选4.密码子使用没有明显的偏倚5.安全性高并不是所有的细胞都可以用来做受体细胞,原核受体细胞,1.没有核膜2.基因组简单便于对引入的外源基因进行遗传分析3.容易获得一致性的实验材料单细胞,原核受体细胞,大肠杆菌(E.coli)优点:1.研究背景清楚2.繁殖迅速培养简单缺点:1.可引起人体致病2.缺少加工后修饰 目前商品化的基因工程产品多数是大肠杆菌生产的人胰岛素、生长素、干扰素,原核受体细胞,枯草芽孢杆菌能将基因表达产物分
2、泌到培养基中一般可表达真核蛋白无致病性可以形成芽孢,方便培养和保存,原核受体细胞,蓝细菌含叶绿素,能进行光合作用,营养要求低。基因组简单,遗传背景清楚。可以成为植物基因表达的宿主。,真核受体细胞,酵母菌结构最为简单的真核生物,背景清楚具有真核生物蛋白翻译后修饰加工系统使用历史悠久,不产生毒素,安全有保障培养简单能将外源基因表达产物分泌到培养基中,真核受体细胞,植物受体细胞有细胞壁,但可通过纤维素酶降解原生质体在特定条件下培养,可再生细胞壁,进行细胞分裂。植物细胞具有全能性,可以通过一个细胞培养出稳定的植株。,真核受体细胞,动物受体细胞全能性较差,多采用胚胎细胞作为受体细胞。优点:能识别内含子有
3、翻译后加工修饰功能,真核受体细胞,人体胚胎干细胞(Stem cell)高度未分化的细胞,是受精卵分裂到囊胚时的细胞,具有体外培养无限增殖和多向分化的特性。几乎可以被诱导成所有的细胞类型。出于社会伦理的原因,一些国家禁止人类胚胎干细胞的研究。,转化,转化:重组DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程。是一种自然现象,感受态,感受态:细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。细胞培养与收集CaCl2处理50100mmol/L CaCl2,10mmol/L Tris-HCl,PH8.0,冰水浴15min。,转 化,革兰氏阳性菌转化过程1.细菌感受态的形成。受体细
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- 重组 基因 导入 受体 细胞
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