CEMS在中药现代化中的应用.ppt

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1、,毛细管电泳质谱联用技术 在现代中药中的应用,主要内容,毛细管电泳分离分析原理,CE-MS技术的分类,CE-MS应用进展,总结和展望,5,2,3,4,前言,1,1.前言：,中药组成十分复杂，有效成分不明确、含量低、药理作用复杂难监测等原因，发展高效、高灵敏、高通量的分析鉴定手段具有重大意义。毛细管电泳逐渐进入了中药分析的领域，为中药分析开辟了一个新的天地，中药的有效成分中如生物碱、多糖等在非水毛细管电泳中已得到了良好的分离分析。,电泳迁移,电渗迁移,分离原理,2.毛细管电泳分离分析原理,分离原理,3.CE-MS的分类,按接口技术 类型不同,按毛细管电泳类型不同,在线,离线,非水毛细管电泳(NA

2、CE),毛细管等电聚焦（CIEF-MS）,CGE-MS法（凝胶毛细管电泳）,其他,电喷雾电离技术电感耦合等离子体（CE-ICP-MS）技术飞行时间质谱(TOFMS)三重四极杆质谱(TQ-MS)离子阱质谱(IT-MS),3.CE-MS的分类,按接口技术类型不同,在线技术,离线技术,3.1在线技术：,CE-MS在线结合的仪器主要包括三个部分:即CE系统，CE-MS接口和MS检测器。目前，成功地应用于CE-MS接口中的离子化技术有连续流-快原子轰击（CF-FAB）、离子喷雾（IS）、电喷雾（ESI）、大气压化学电离、基质辅助激光解吸离子化和等离子体解吸离子化技术等。其中电喷雾电离是最常用、最成熟的技

3、术。,3.1.1电喷雾电离技术,3.1.1电喷雾电离技术,优点,灵敏度高,ESIMS分析在中草药定量分析上具可行性和优越性，且定性简单快速。,可测定生物大分子,CEESIMS在二维分离技术上有很大的优越性。,可用于结构鉴定,3.1.1电喷雾电离技术,电喷雾接口可分为无鞘流式电喷雾接口和鞘液体接口。,稳定性差,Description of the contents,毛细管柱使用寿命短,3.1.1电喷雾电离技术,无鞘流电喷雾接口的缺点有：,3.1.1电喷雾电离技术,3.1.1.2鞘液体接口：金属接口（喷雾杆）具有三层套管结构：内层中插入普通毛细管,与最初设计不同的是中间层采用了液体鞘流技术,鞘液体

4、从中间层流出,与毛细管中流出的液体混合,解决了毛细管末端电接触的问题,同时可以控制鞘液体流速以增大进入ESI的液体量，补给足够的液体基质,形成稳定的电喷雾。,3.1在线技术小结：,优点：CE-MS 在线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度快等优点,其应用要比离线联用广泛缺点：a.限制离子源的使用，仅电喷雾等几种方法可选 b.常不允许CE采用其最佳缓冲条件，限制其优势的发挥 c.CE出峰很快，欲进行二级质谱研究，时间常不够，限 制结构测定能力发挥,此外 CE-MS 在线联用需要设计合适的接口,能够将已分离的样品全部转移到质谱仪中,同时实现样品快速高效的离子化。因此,CE-MS在线联用接口技

5、术是研究的重点。,3.2离线技术,优点：a.操作方便，特别是允许CE按所需要优化其分离条件 b.对离子化方法没有限制缺点：关键是对已分离样品的有效收集,并不涉及真正意义上的联用接口技术,3.CE-MS的分类,非水毛细管电泳(NACE),毛细管等电聚焦（CIEF-MS）,CGE-MS法（凝胶毛细管电泳）,其他方法,按毛细管电泳类型不同,3.1非水毛细管电泳(NACE),释义：非水毛细管电泳(nonaqueous capillary electrophoresis，NACE)法是CE的一个分支，它没有严格的定义，主要是指以有机溶剂完全替代水作电解液的溶剂这种情况。目前，NACE应用的研究热点集中在

6、有机溶剂、电解质、检测器的选择以及方法的优化等方面。,分析不易溶于水、易溶于有机溶剂的物质,在水中难以进行反应的研究,分离在水溶剂CE中淌度十分相似的物质,Vision 01,Vision 03,Vision 02,Vision 03,适用范围,3.1非水毛细管电泳(NACE),分离效率高，分析时间短,3.1非水毛细管电泳(NACE),检测手段多,降低峰宽并改善拖尾,提高被分析物的回收率,由于以有机溶剂完全替代水作电解液，所以有一定局限性。,优点,不足,3.2毛细管等电聚焦(CIEF-MS),是新近出现的技术，技术尚不成熟，未得到广泛应用,优点,不足,给复杂生物大分子混合物的分离和结构阐述提供

7、了一种强有力的工具,3.3 凝胶毛细管电泳（CGE-MS）,分离和鉴定生物样品中的低聚核苷酸以及生物碱、黄酮及其苷、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物。,特点,适用,特别适用于缓冲液和相对高浓度的液体的分析，使其不会流出CE柱。,3.4 其他方法,毛细管区带电泳(CZE)、胶束电动毛细管色谱(MEKC)，也适用于生物碱、黄酮及其苷、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物的分离。,4.CE-MS 应用进展,Text in here,Text in here,Text in here,1,2,3,生物大分子及相关物质分析,天然产物中活性和毒性成分

8、分析,食品药品分析及其他领域的应用,4.1生物大分子及相关物质分析,例：促红细胞生长素(EPO),4.2天然产物中活性和毒性成分分析,4.2.1 CE-MS用于中药化学成分的研究,例1：陈军辉等，高效毛细管电泳电喷雾飞行时间质谱联用分析黄连中的生物碱 化学学报 Vol.65,2007 2743-2749,4.2.2 中草药中毒性成分的分析,例：马兜铃酸,4.2.2 中草药中毒性成分的分析,5.总结和展望,CE/MS的应用报道虽然很多,但作为常规方法尚存在以下缺点:浓度灵敏度低,不如LC-MS；毛细管壁涂层材料或者MEKC中的表面活性剂等会降低被分析物的离子化效率甚至严重污染MS离子源；不是所有的CE分离模式都可方便地用于与MS相联用；MS对CE分离缓冲液的限制较多。,展 望,与提取富集技术联用,提高选择性和灵敏度,发展毛细管涂层材料,研制新型的高效CE-MS接口,Add Title,与高分辨MS等新型质谱仪联用,应用研究领域的进一步拓展,小组成员,S0920436 郭雨姗 S0920438王淑蕾S0920441 熊焰(PPT)S0920442刘玲玲S0920443 骆杨丽 S0920446唐开亮S0920447 孙建博 S0920452何 艳S0920453 翦雨青 S0920455唐本钦,Thank You!,