血液学血细胞化学染色.ppt

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1、第三章 细胞化学染色技术,学习目标,1.掌握：细胞化学染色的基本步骤；铁染 色、过氧化物酶染色、酯酶染色、过碘 酸-希夫染色、碱性磷酸酶染色、酸性磷 酸酶染色的正常血细胞染色反应和临床 意义。2.熟悉：细胞化学染色的概念和临床应用。3.了解：细胞化学染色的原理和影响因素。,第一节 概 述,一、概念 细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学。它以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学成分(酶类/脂类/糖类/铁/蛋白质/核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。,要求：,血细胞化学染色的基本要求是在原位显示细胞成分和结构，反应产物应是有色沉淀物，具有一定的稳定性。血细胞

2、化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。,二、必要性,从形态学观察，存在较多的主观性；有些原始细胞形态较相似，难以鉴别；结合细胞化学染色，提高疾病的诊断率。,三、临床应用,1.辅助判断急性白血病的细胞类型 2.辅助血液系统疾病的诊断和鉴别 诊断 3.观察疾病的疗效和预后 4.疾病发病机制的探讨,白血病的诊断：MICM分型 M：morphology I：immunology C：cytogenitics M：molecular biology,形态学分型：进行初步的诊断免疫学分型：明确细胞种类细胞遗传学分型：与疾病预后有关分子生物学分型：提高到分子水平,四、基本步骤,1.固定（1）物理法：干燥、

3、火焰（2）化学法：A、蒸气固定：甲醛 B、液体固定：甲醛、乙醇、甲醇、丙酮。,2.显示：有色沉淀反应,（1）偶氮偶联法：酯酶染色（2）联苯胺法：POX（3）普鲁士蓝反应：Fe（4）希夫反应：PAS（5）金属沉淀法：NAP（6）物理显色法：SBB,3.复染：使各种细胞能显示出来,铁染色-中性红、伊红PAS-甲基绿核：中性红、甲基绿、沙黄等。浆：伊红、刚果红、光绿等。,五、研究对象 外周血和骨髓新鲜涂片单个细胞中的化学物质：酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等,第二节 常用细胞化学染色技术,铁染色 过氧化物酶染色 苏丹黑B染色 酯酶染色 过碘酸-希夫反应 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 酸性磷酸酶染色,

4、一、铁 染 色（ferric stain）,亚铁氰化钾,亚铁氰化铁(蓝色沉淀在含Fe部位),铁,酸性环境,普鲁士蓝 反应,骨髓小粒中的含Fe血黄素（细胞外铁）骨髓中贮存铁 幼红细胞内的Fe（细胞内铁）,原理,二、结果判断,1.细胞外铁(骨髓小粒含铁血黄素),铁颗粒、铁小珠、铁团块,细胞外铁(低倍镜观察)（）：无颗粒（）：有少量铁颗粒或偶见铁小珠（）：有较多的铁颗粒或铁小珠（）：有很多的铁颗粒、铁小珠 和少数铁小块（）：有极多铁颗粒、小珠和 很多铁小块，密集成堆。,2.细胞内铁(中晚幼红细胞，油镜观察),（1）分级(按铁颗粒数量的多少及大小)细小颗粒：细沙样铁小粒，不易看清。粗大颗粒：很容易看清

5、的颗粒。（2）阳性率 观察100个中晚幼红细胞，计算出铁 粒幼红细胞的百分比。,【结果判断】幼红细胞核染色为鲜红色,铁粒呈蓝绿色。,细胞内铁(油镜观察幼红细胞),型：12个小铁颗粒；型：35个小铁颗粒；型：610个小铁颗粒或14个大颗粒；型：10个以上小铁颗粒或5个以上大颗粒。,环形铁粒幼红细胞(ringed sideroblast)幼红细胞胞质内铁颗粒6个，围绕 核周2/3以上者。,铁粒幼红细胞(sideroblast)：胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞。,铁粒红细胞(siderocyte)：胞质中出现蓝色铁颗粒的成熟红细胞。,绿色箭头示：环形铁粒幼红细胞；蓝色箭头示：铁粒红细胞,1.细胞外铁

6、：（+）（+）2.细胞内铁：铁粒幼红细胞阳性率大约 1244%，III型（I型为主），无 型、型、环形铁粒幼红细胞及铁粒 红细胞。,三、参考范围,四、临床意义,铁染色是评估铁缺乏最实用的方法，是反映储存铁的金标准，是临床应用最广泛的细胞化学染色之一。,1.缺铁性贫血：外铁（），内铁10%；治疗有效后，内外铁。2.铁粒幼细胞性贫血：外铁；内铁阳性率，环形铁粒幼 红细胞增多，可见粗颗粒的、型 铁粒幼红细胞。,3.MDS-RAS：内外铁增多，环形铁粒 幼红细胞15%。4.非缺铁性贫血：溶贫、巨幼贫、再障、白血病等，内外铁正常或增多。5.感染、肝硬化、慢性肾炎、血色病等：外铁增多。,五、应用评价,铁染

7、色是临床常用的一种细胞化学 染色，虽不如血浆铁蛋白敏感，但是反 映机体储存铁的金标准。外铁：反映骨髓中铁的储存量；内铁：反映骨髓中可利用的铁量。,二、过氧化物酶染色（peroxidase,POX）,一、原 理,粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含 有过氧化物酶(POX)，它可分解H2O2释放出新生 态的氧，后者氧化二氨基联苯胺，形成金黄色不 溶性沉淀，定位于胞质内酶所在的活性部位。二甲基联苯胺法（DAB）原理,POX,新生态氧 O,过氧化氢（基质中）,四甲基联苯胺（无色）,联苯胺蓝（蓝色）,亚硝基铁氰化钠,蓝色颗粒（浆内酶部位）,粒、单核细胞胞浆,【原理】,二、ICSH推荐的三种方法 二氨基联

8、苯胺法（DBA）二盐酸联苯胺法 过氧化物酶氨基-甲基卡巴唑染色法,三、结果判断,在细胞质内出现金黄色颗粒为阳性反应。（二氨基联苯胺法）,二氨基联苯胺法,二盐酸联苯胺法,二盐酸联苯胺法,【结果判断】-、+、+、+、+弱阳性 颗粒小，分布稀疏阳性 颗粒稍粗，分布较密集强阳性 颗粒粗大，密布于整个胞浆,POX结果判断,细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。（）无颗粒沉着；（a）（）颗粒细小，分布稀疏；（b）（+）颗粒较粗，局灶分布；（c）（+）颗粒粗大，分布较密，占胞质 1/22/3；（d）（+）颗粒粗大，呈团块分布；（e）（+）全部胞质均部满颗粒，可覆盖胞核（f）。,【正常血细胞染色反应】1.粒细胞系统

9、POX主要存在于粒系细胞中。分化差的原粒细胞阴性;分化好的原粒细胞至中性成熟粒细胞各阶段均呈阳性，阳性反应程度随细胞的成熟逐渐增强。中性分叶核粒细胞：强阳性 嗜酸粒细胞：阳性最强 嗜碱粒细胞：（）,2.单核细胞系统 阴性或弱阳性 3.淋巴细胞系统 红细胞系统 巨核细胞系统 阴性 浆细胞 组织细胞,四、临床意义,鉴别急性白血病的类型首选（1）急淋和急性髓细胞系的鉴别：急淋：（），阳性率3%；急单：弱阳性；急粒：阳性（+）。,2.单核细胞系统：（）或弱（+），阳性颗粒少而细小。3.其它系统细胞：淋巴细胞系统、红细胞系统、巨核 细胞系统、浆细胞、组织细胞（）。,【临床评价】,急性髓细胞白血病 急性淋

10、巴细胞白血病,鉴别,1.急性髓细胞白血病（1）急性粒细胞白血病 阳性反应（2）急性单核细胞白血病 弱阳性反应,2.急性淋巴细胞白血病 阴性反应或阳性率 3%(残留原粒细胞),ALL,ALL,原粒阴性,原粒弱阳性,原粒阳性,早幼粒 强阳性,一、原理,苏丹黑B是一种脂溶性重氮染料，可溶解 细胞内含脂结构(中性脂肪、磷脂、糖脂和类 固醇)，而使脂类物质显示出来，呈棕黑色或 深黑色(粒细胞：丰富；单核细胞：少量)。,三、苏丹黑B染色（Sudan black B，SBB）,正常血细胞的染色反应,与POX染色基本一致临床意义 与POX染色相似,二、SBB与POX区别：,1.POX特异性高于SBB，而敏感性

11、 低于SBB；2.POX染色要求涂片新鲜，保持酶活 性，SBB染色可用陈旧涂片。,1.特异性酯酶（specific esterase）主要存在于粒细胞，又称“粒细胞酯酶”氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）。,一、分类,四、酯 酶 染 色,2.非特异性酯酶(nonspecific esterase)单核、组织细胞中含量较多，粒细 胞、淋巴细胞中含量少，且氟化钠抑 制单核细胞中的非特异性酯酶，而不 抑制粒细胞、淋巴细胞及其他细胞。,醋酸AS-D奈酚酯酶：NAS-DAE-醋酸奈酚酯酶：-NAE-丁酸奈酚酯酶：-NBE 酸性-醋酸奈酚酯酶：ANAE(-NBE 敏感性不如NAS-DAE 但特异性较

12、之强),（一）特异性脂酶染色,1.氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色 Naphthol AS-D chloroacetate esterase,1.原理,氯乙酸AS-D萘酚 AS-D萘酚 不溶性的有色(红)沉淀。NAS-DCE几乎仅出现在粒细胞，其特异性高，因此又称为“粒细胞酯酶”,NAS-DCE,重氮盐(坚牢蓝紫酱),氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色,2.正常血细胞的染色反应,粒系(酶活性不随细胞成熟而增强)原粒（）或（+）早幼粒成熟中性粒细胞（+）嗜酸性粒细胞（）或弱（+）嗜碱性粒细胞（+）,单核细胞系统：（）肥大细胞：（+）淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、巨核细胞、血小板：（）,3.临床意义,主要用于辅助

13、鉴别急性白血病细胞类型：急性粒细胞白血病：（+）急性早幼粒细胞白血病：强（+）急性单核细胞白血病：（）急粒-单：粒细胞（+）单核细胞（）急性巨核细胞性白血病：（）急性淋巴细胞白血病：（）,原 理：非特异性脂酶在相应的pH环境中，将基质液中相应底物水解，产生含萘酚 的物质，后者与重氮盐发生偶联反应，形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质 内酶所在的部位。,（二）非特异性脂酶染色,根据pH值的不同分为：酸性：酸性-醋酸萘酚酯酶染色(ANAE)中性：-醋酸萘酚酯酶染色(-NAE)醋酸AS-D萘酚酯酶染色(NAS-DAE)碱性：-丁酸萘酚酯酶染色(-NBE),1.-醋酸萘酚酯酶染色（-naphthol a

14、cetate esterase，-NAE）,-醋酸萘酚酯酶（细胞内）,-醋酸萘酚（基质液中）,-萘酚,重氮盐（坚牢蓝B）,胞浆不溶性灰黑色 或棕黑色沉淀,水解,【原理】,【结果判断】胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状沉淀为阳性。,-醋酸萘酚酯酶染色(灰黑色、棕黑色),-醋酸萘酚酯酶染色,a:单核 b:BPC c:巨核 d:LC(+)e:幼红(-),氟化钠抑制试验 在基质液中加入适量NaF,其余染色方法同上。两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率或阳性积分。,氟化钠抑制率=,抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分,抑制前阳性率或阳性积分,100

15、%,A图：急性单核细胞白血病-NAE染色 原始、幼稚单核细胞多呈强阳性,B图：急性单核细胞白血病-NAE氟化钠抑制染色原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制（与A图为同一标本）,A,B,【临床评价】,急单 急粒 急性早幼粒 急粒单 急淋-NAE+或-或+阳性-+弱+NaF 被抑制 不被 不被抑制 部分被抑制 抑制 部分未被抑制,主要用于鉴别急性白血病类型,2.临床意义,辅助鉴别急性白血病细胞类型 急单：单核细胞阳性，能被NaF抑制。急粒：粒细胞弱阳性，不被NaF抑制。,M3：强阳性，不能被NaF抑制。M4：部分阳性细胞能被NaF抑制，部分阳性细胞不能被NaF抑制。ALL：原幼淋阴性或阳性，不能

16、被NaF 抑制。,【正常血细胞染色反应】,1.单核细胞系统 原始单核细胞 分化差 阴性 分化好 阳性 幼稚及成熟单核细胞 阳性,被氟化钠抑制,2.粒细胞系统 原粒细胞阴性或弱阳性 以下阶段为弱阳性 3.淋巴细胞系统 多数阴性，少数弱阳性,不被氟化钠抑制,2.-丁酸奈酚酯酶染色-NBE,原理：血细胞中-NBE在碱性条件下，基质液中的-丁酸奈酚水解，产生-奈酚，后者与坚牢酱紫GBC偶联，形成不溶性红色沉淀，定位于胞质内。,-NBE染色反应,1.粒系：各期（-）2.单核系：分化差的原单（-）；分化好的原 单（+）幼单成熟单核（+），可被NaF抑制3.淋巴系：TC、非T非B（+）BC（+）4.其他细胞

17、：巨核、有核红细胞、浆细胞（-）或弱（+）组织细胞(+),不被NaF抑制,3.酸性-醋酸奈酚酯酶染色ANAE,原理：血细胞中的酸性-醋酸奈酚酯酶（ANAE）在pH弱酸性（pH5.8）的条件下，可水解基质液中的-醋酸奈酚，产生-奈酚，进而与重氮盐六偶氮付品红形成不溶性红色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。,酸性-醋酸萘酚酯酶染色（弥漫性棕红色）-M5,ANAE染色反应,1.单核系：强（+）可被NaF抑制2.淋巴系：TC（+）BC（-）3.其他细胞：粒系（-）或弱（+）不被NaF 抑制 红系、巨核系（-）,4.酯酶双染色,在同一张涂片上进行两种酯酶染色,特异性酯酶+非特异性酯酶,对诊断急性粒-单细

18、胞白血病有独特价值,-NAE 与NAS-DCE 红色(单)-NBE 与 NAS-DCE 兰色(粒),骨髓涂片特异性酯酶（CE）和非特异性酯酶（NAE）的双酯酶染色显示，原始粒细胞胞浆呈蓝色CE阳性反应；而原始单核细胞胞浆呈棕色的NAE阳性反应。,NAS-DCE：M1弱(+)/M2(+)/M3强(+)，M5/ALL()；-NBE：M5(+)NaF抑制，M1/M2/M3/ALL()；-NAE/NAS-DAE：M5强(+)NaF抑制 M3强(+)/M1M2a/ALL(+)NaF不抑制。,五、过碘酸-希夫反应(糖原染色)（periodic acid-Schiff reaction，PAS）,双醛基,过

19、碘酸,希夫试剂中的无色品红,紫红色化合物(附于含多糖类 的胞浆内),乙二醇基(多糖类物质含有),氧化,【原理】,过碘酸是氧化剂，使含有乙二醇 基的多糖类物质(糖原、糖蛋白、糖脂、粘多糖等)氧化，形成双醛基。醛基与Schiff s液中的无色品红结合，使无色品红变成紫红色化合物，定位于含多糖类的细胞内。,一、原理,【结果判断】,阳性 胞浆内红色阳性物呈弥散状、颗 粒状或块状。阴性 胞浆内无色或无颗粒,核淡绿。,1.粒细胞系统：（阳性逐渐增强）原始粒C（）或（+）早幼粒C成熟中性粒C（+）：细颗粒均匀红色 嗜酸粒C：颗粒不着色，胞质呈红色。嗜碱粒C：颗粒阳性，胞质不着色。,二、正常血细胞的染色反应,

20、2.单核细胞系统：分化差（）其他（+），粗颗粒状。3.淋巴细胞系统：多数（）少数（+），粗颗粒或块状。4.红细胞系统：（），病理情况可（+）。5.巨核细胞系统：（+），颗粒状或块状。6.其它细胞：浆细胞（），巨噬细胞（+）,a 粒细胞、b 巨核细胞、c 单核细胞、d 幼红细胞,三、结果判断,1.粒细胞系统：红色、弥散状。,各种细胞阳性反应强弱不同,2.淋巴细胞系统：粗颗粒状、小块状、大块状红色。,1、+2、+3、+4、+5、,3.红细胞系统：均匀红色或块状,4.单核细胞系统：粗颗粒状,5.巨核细胞和血小板：颗粒状、块状。,1.巨核细胞和血小板阳性,1.帮助鉴别巨幼细胞性贫血和骨 髓增生异常综合

21、征、红白血病:前者（），后两者（+）。,四、临床意义,急性淋巴细胞白血病PAS染色原始、幼稚淋巴细胞均阳性，呈粗颗粒状阳性,109,急淋PAS阳性细胞,110,PAS阳性的幼红细胞,2.帮助鉴别急性白血病的细胞类型：急淋：（+）呈粗颗粒状或块状。急粒：（+）细颗粒状或均匀红色。急单：（+）细颗粒状，均匀分布，有时胞质边缘颗粒较粗大。,3.其他细胞：骨髓转移性腺癌细胞细胞呈强阳性 霍奇金淋巴瘤RS细胞多呈阴性或弱阳性 戈谢细胞呈强阳性 尼曼-皮克细胞多呈阴性或弱阳性,CLL,ALL,六、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（neutrophilic alkaline phosphatase，NAP）,磷酸萘

22、酚钠（基质中）,中性粒细胞胞浆中NAP,磷酸钠,-萘酚,重氮盐（坚牢蓝盐RR）,紫黑色偶氮染料（胞浆中）,水解,【原理】Kaplow偶氮偶联法,【结果判断】胞浆中有紫黑色颗粒为阳性(+）,【正常血细胞染色反应】,中性成熟粒细胞阳性反应NAP主要存在于成熟的中性粒细胞胞质中。严重的化脓性感染时，晚幼阶段粒细胞也可见有阳性反应。2.其他细胞基本呈阴性反应,NAP染色反应强度标准：（）：胞质中无颗粒；（）：胞质含少量颗粒，约占1/4；（）：胞质含中等量颗粒，约占1/2；（）：胞质含较多颗粒，约占3/4；（）：胞质充满颗粒，无空隙。,2.NAP积分值 计数100个成熟中性粒细胞（杆状和分叶）,分别记录

23、其分级情况：,(-)0分(+)1分(+)2分(+)3分(+)4分 阳性率 全部阳性反应细胞之和 积分值 各种阳性程度细胞的分值之和,NAP染色结果报告包括阳性率和积分值。阳性率：指计数100个中性成熟粒细胞，其阳性细胞的数量即为阳性率；积分值：指计数100个中性成熟粒细胞，不同阳性程度细胞数量乘以其阳性程度之和即为积分值，其计算公式为：积分值=()数量1+()数量2+()数量3+()数量4。,2.NAP染色结果报告：,例：,4分 占20%4 20=80分3分 占40%3 40=120分2分 占18%2 18=36分1分 占10%1 10=10分0分 占12%0 12=0分阳性率88%积分=24

24、6分,0级 0 胞浆呈原色，无颗粒。级+胞浆呈浅灰色，细小蓝黑色颗粒占胞浆面积的25%50%。,级+胞浆呈棕色片状沉淀，小到中等颗粒约占胞浆面积的50%75%。,级+胞浆充满棕黑色沉淀，分布均匀，中到大颗粒占胞浆面积的75%100%。,级+胞浆充满深黑色致密的团块状沉淀，甚至遮盖胞核，中到大颗粒占胞浆面积的l00%。,3.参考范围：中性粒细胞NAP阳性率：40%NAP积分为：30130分,【临床评价】（1）细菌性感染与病毒性感染（尤其是化脓性感染）明显增加 无明显变化,四、临床意义,1.生理性变化：应激状态、妊娠、新生儿等。,2.病理性变化：(1)NAP：细菌性感染、慢粒(加、急)、急 淋、慢

25、淋、恶性淋巴瘤、转移癌、骨纤、真红、再障、原发性血小 板增多症、使用糖皮质激素等。,3.疾病的鉴别：,(1)类白与慢粒:前者 后者(2)慢粒慢性期与慢性中性粒细胞白血病：前者 后者(3)细菌性感染与病毒性感染/寄生虫感染：前者 后两者正常或,(2)NAP：慢粒(慢)、PNH、MDS、恶组等。,(6)恶组与反应性组织细胞增多症：前者 后者常(7)急性白血病类型：急性髓细胞 急淋,(4)慢粒病情观察：(5)再障与阵发性睡眠性血红蛋白尿：前者 后者,CML,类白,(2）类白血病反应与慢性粒细胞白血病 明显增加 明显下降且常为零分，缓解时又上升到正常,五、应用评价,NAP染色有多种检测方法，国际标准化

26、委员会推荐 Kaplow萘酚AS-BI磷酸钠法和Tomonaga萘酚AS-MX 磷酸钠法。钙-钴法试剂成本低廉，操作繁琐，反应 时间长，临床上逐步被偶氮偶联法取代，阳性产物色 泽鲜明、定位精确，尤其以萘酚AS-BI磷酸钠法最为 广泛使用，利于评定NAP活性强度的分级。常用重氮 盐有坚牢蓝RR、坚牢蓝BB、坚牢紫酱等，不同偶联 有不同的灵敏度。,七、酸性磷酸酶染色(acid phosphatase，ACP),一、原理,1.Gomori 硫化铅法,棕黑色,pH5.0,2.偶氮偶联法(常用)六偶氮付品红棕红色沉淀,磷酸萘酚AS-BI 萘酚AS-BI 棕红色沉淀,ACP,Ph5.0,重氮盐,3.抗酒石

27、酸酸性磷酸酶染色（一组同工酶）,两张相同标本涂片+两份基质液(加L-酒石酸，不加 L-酒石酸),ACP染色,耐L-酒石酸两份（+）,不耐L-酒石酸不加 L-酒石酸（+）加L-酒石酸（）,二、正常血细胞染色反应,粒细胞、单核细胞、淋巴细 胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞均呈阳性反应。,三、临床评价,1.诊断多毛细胞白血病 多毛细胞白血病：（+），不被L-酒石酸抑制。慢淋和恶性淋巴瘤细胞:（+），被L-酒石酸抑制。,多毛细胞白血病,慢性淋巴细胞白血病,抗酒石酸酸性磷酸酶染色,酸性磷酸酶染色,多毛细胞白血病,多毛细胞白血病 抗L-酒石酸ACP阳性,2.鉴别戈谢(Gaucher)细胞和尼曼-匹

28、克(Niemann-Picks)细胞：前者（+）后者（）3.鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞：前者（+）后者（）,Gaucher s cell,八.细胞化学染色综合分析,四种常见急性白血病的细胞化学染色结果,项目 M3 M1/M2 M5 ALL,POX 强阳性 阳性/阴性 弱阳性/阴性 阴性 NAS-DCE 强阳性 阳性/阴性 多阴性 阴性-NAE 强阳性 阴性/弱阳性 阳至强阳性 阴性/阳性-NAE+NaF 不抑制 不抑制 抑制 不抑制-NBE 阴性 阴性 阳性 阴性-NBE+NaF 抑制,急非淋 脂酶染色NAP：类白与慢粒、感染类型、再障与 PNH、慢粒分期；ACP：毛白、T细胞/B细胞、脂代谢

29、障碍；PAS：巨幼贫与MDS-RA、红白血病；铁染色：缺铁贫、铁粒幼贫、MDS-RAS。,急淋,POX,急性白血病,151,PAS:阳性，颗 粒状NAP:积分增高,PAS:大小不 定块状阳性NAP:积分增高,L1、L2、L3形态区分,M7，可做免疫分型,ANAE+NaF抑制,M5：阳性强阳性，抑制率50M4:阳性，抑制率50（形态、做酯酶双染）NAP:积分减低,涂片可见较多幼稚细胞,POX染色,阴性（阳性率3%),阳性，强阳性,阴性或弱阳性（部分阴性，部分阳性）,PAS+NAP,M2、M3最强M1、M5最弱（CE阳性，形态区分）NAP:积分减低,CE,1.常用的化学反应种类不包括下列哪种A.偶

30、氮偶联法 B.联苯胺法C.普鲁士蓝反应 D.中和反应 E.希夫反应2.临床上辅助判断急性白血病类型首选最重要的细胞化学染色是A.特异性酯酶 B.非特异性酯酶 C.过氧化物酶D.中性粒细胞碱性磷酸酶 E.酸性磷酸酶3.特异性及非特异性酯酶的染色方法是A.偶氮偶联法 B.联苯胺法C.普鲁士蓝反应 D.中和反应 E.希夫反应,4.鉴别小原粒白血病与急淋，下列首选试验是A.酯酶染色 B.糖原染色 C.过氧化物酶染色D.碱性磷酸酶染色 E.酸性磷酸酶染色5.非特异性酯酶染色阳性，且阳性反应能被氟化钠抑制见于A.急性粒细胞白血病 B.急性淋巴细胞白血病 C.急性单核细胞白血病 D.急性早幼粒细胞白血病E.慢性粒细胞白血病 6辅助判断急性白血病类型的细胞化学染色不包括A.过氧化物酶染色 B.酯酶染色C.中性粒细胞碱性磷酸酶染色D.铁染色 E.糖原染色,1掌握常用细胞化学染色方法的结果判断和临床意义。2熟悉常用细胞化学染色方法的原理。,本章目的要求,思考题：,1.铁染色的临床意义 2.POX染色的原理及临床意义 3.PAS染色对不同类型急性白血病的鉴别 4.NAP积分增加和减少的临床意义 5.酯酶染色的临床应用,完,