药典动态对药品制剂研发影响及原始记录常见问题讨论.ppt

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1、药典动态与药品制剂质量研究及原始记录常见问题讨论,余立,辅料、其他成分干扰,降解产物,剂量、包装、稳定性,药品制剂研究的特点,制剂学特点,1,4,3,2,建立标准时要考虑的问题,Growth,200820072006,200520042003,200220012000,常见研究误区以及供参考的经验和体会,新版药典动态对药品制剂质量研究的影响,研发原始记录中常见问题及改进建议,主要讨论内容,药用辅料的增修订情况及要求,1、新增附录附录 药用辅料 对药用辅料进行定义、分类，对其生产、贮存、应用等提出原则性要求 2、正文收载的药用辅料 共收载132个品种（新增62个、修订52个）05版收载的三氯甲烷

2、为二类毒性有机溶剂，删除3、注射用辅料质量、未收载的药用辅料 附加标准,辅料对测定的干扰,1、避免使用 2、排除辅料干扰方法要明确3、不排除可以默认为杂质,辅料影响的排除,无影响有影响，可定位有影响，难定位,制剂通则变化几个重点提示,修订的12种制剂通则（共20种）注射剂 片剂 眼用制剂酊剂 胶囊剂 丸剂 颗粒剂 糖浆剂气雾剂 粉雾剂 喷雾剂 凝胶剂 鼻用制剂 搽剂 涂剂 涂抹剂,片剂制剂通则变化几个重点提示,1）含片定义：系指含于口腔中缓慢溶化（解）产生（持久）局部或全身作用的片剂含片的溶化性照崩解时限检查法（附录 A）检查，除另有规定外，10分钟内不应全部崩解或溶化。2005年版：含片照崩

3、解时限检查法（附录 A）检查，除另有规定外，30分钟内应全部崩解。但标准正文中仍然是：其他 应符合片剂项下有关的各项规定（附录 A）。,片剂制剂通则变化几个重点提示,2）分散片的【分散均匀性】：检查法：取供试品6片，置250ml烧杯中，加1525的水100ml，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。2005年版：取供试品2片，置201 的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。,眼用制剂通则变化重点提示,1）定义：系指直接用于眼部发挥治疗作用的无菌制剂。2）基本分类等文字修改3）【渗透压摩尔浓度】【无菌】均为必检项目 删去了【微生物限度】检查产品的工艺处方设计、生产环境的升级、供检样

4、品的数量都要随之改变,注射剂品种收载及增修订品种数量,未修订品种,2005年版收载346个（248注射液98粉针）,注射剂品种增修订项目,增订HPLC鉴别：64个品种 增订TLC鉴别：11个品种 增订IR鉴别：6+1个品种(+1原有)增订细菌内毒素检查：86个品种 热原改细内：27个品种增加降压物质的品种：3个增加过敏反应的品种：4个增加异常毒性的品种：9个增订渗透压：25个品种增加颜色或溶液的颜色的品种：9个增加澄清度或溶液的澄清度的品种：7个头孢类增订高分子聚合物的品种：6个（老品种）增订5-羟甲基糠醛的品种：7个,注射剂制剂通则变化重点提示,1）除另有规定外，静脉输液应尽可能与血液等渗。

5、之前为静脉输液的一般要求，新版要求此项为静脉输液品种必设必检项目，包括氯化钠注射液（例外：葡萄糖注射液不检）【渗透压摩尔浓度】除另有规定外，静脉输液及椎管注射用注射液按各品种项下规定，照渗透压摩尔浓度测定法（附录 G）检查，应符合规定。,【渗透压摩尔浓度】的表述形式,例1：己酮可可碱葡萄糖注射液（等渗）渗透压摩尔浓度 取本品，依法测定（附录 G）毫渗透压摩尔浓度应为260320mOsmol/kg。例2：甘油果糖氯化钠注射液（高渗）渗透压摩尔浓度 取本品，依法检查（附录 G），本品的渗透压摩尔浓度比应为6.57.5。,渗透压摩尔浓度检查项的研究与标准制订,注意仪器的线性范围 浓溶液可以适当稀释但

6、结果不能简单乘以稀 释倍数 出具报告要注明稀释情况！小容量注射液增订渗透压的目的？胶体渗透压 滴眼液的渗透压,注射剂制剂通则变化重点提示,2）注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求（热原或细菌内毒素、无菌等应符合要求）。纯度要高、杂质要少、生物负荷要低从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素,Click to edit title style,杂质控制,微粒控制,安全性控制,注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求。,标准增项,杂质谱的比较,供注射用原料质控重点应在制剂申报资料中体现！,供注射用原料可见

7、异物检查,头孢他啶：取本品5份，每份3.0g，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解，依法检查（附录 H），应符合规定。头孢地嗪钠：取本品5份，每份2.0g，分别加微粒检查用水溶解，依法检查（附录 H），应符合规定。,有些品种如碱性药物与玻璃容器久置起反应，产生白点、白块和玻璃屑有些品种如甲硝唑等与重金属发生反应产生不溶物有些品种如喹诺酮类药物对金属设备产生腐蚀，易有金属屑有些品种如胰岛素等提取的生化大分子易产生蛋白沉淀有些品种如头孢噻肟钠等成盐不完全，溶解度太低，产生白点、白块,引发不合格的部分原因,控制生产环境和过程中的污染-外源异物考察药物与容器的兼容性-内源异物考察活性成分的稳定

8、性以及与溶剂/添加物的稳定性-内源异物深刻理解“药品的质量源于设计”认真做好处方研究/工艺验证和稳定性考察！,可见异物检查的目的,供注射用原料不溶性微粒检查,头孢他啶：取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。头孢曲松钠：取本品3份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。,供注射用的原料药增加不溶性微粒检查以保证制剂能符合注射剂的

9、要求由于光阻法测定结果仅与一定浓度范围内样品溶液成正比，故标准给出了不溶性微粒检查供试品溶液浓度制剂最多有11个规格，均按每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000粒，含25m以上微粒不得过600粒；,强化不溶性微粒等项目控制,强化不溶性微粒等项目控制,供注射用原料不溶性微粒检查,可见异物/不溶性微粒检查,原始记录问题不详细无趋势缺方法摸索及分析原始记录建议,注射剂制剂通则变化重点提示,3）供注射用的非水性溶剂，应严格限制其用量，并应在品种项下进行相应的检查。除植物油外，其他还有乙醇、丙二醇和聚乙二醇等2010年版药典中收载了几十个非水性溶剂注射剂，仅有几个在标准中增订了非水性溶剂的含量测定

10、,注射剂制剂通则变化重点提示,比如：依托咪酯注射液为依托咪酯加1，2-丙二醇制成的灭菌水溶液。标准中增订“1，2-丙二醇”检查项，采用GC法测定含量，规定“每1ml中含1，2-丙二醇应为315mg385mg”。硝酸甘油注射液为硝酸甘油的灭菌无水乙醇溶液。标准中增订：“乙醇量”检查项。按一部附录 M方法测定，规定“应为90.0%110.0%（ml/ml）”,增设有效项目指标-甲氧基苯胺值,含不饱和脂肪酸的品种增加甲氧基苯胺值检查多烯酸乙酯（P272）含有不饱和脂肪酸的药物在生产和贮藏过程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，又可进一步生成醛类等化合物，而甲氧基苯胺值（也称p-茴香胺值）就是ISO推

11、荐的一种对此类降解产物进行评价的手段，欧洲药典附录收载了此测定方法。药物的甲氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重。测定原理：甲氧基苯胺与醛反应生成醇胺，醇胺脱水生成的醛亚胺可采用紫外-可见分光光度法在350nm波长处测定。,增设有效项目指标-甲氧基苯胺值,注意：甲氧基苯胺试剂为无色结晶，具有一定毒性，使用时应避免接触皮肤，一旦失误，需用水冲洗15分钟以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不稳定，需当天配制使用。以异辛烷作空白做基线校正时，如果测得的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超过了0.2，则需重新配制试剂。供试品溶液中加入0.25的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液后应注意避光，在350nm波长处的吸光度随时间的

12、延长缓慢增加，需准确放置10分钟后测定，尽量减小误差。本试验受水分影响较大，样品及试剂中水分的存在会导致反应不完全，测定值偏低，当样品中水分含量超过0.1%时，可按10g样品加12 g无水硫酸钠的比例脱除水分后测定。另外，应取用新开启包装的供试品。,注射剂制剂通则变化重点提示,4）配制注射剂时所用附加剂使用浓度不得引起毒性或明显（过度）的刺激。注射剂所用辅料，在标签或说明书中应标明其名称，抑菌剂还应标明浓度；注射用无菌粉末，应标明注射用溶剂（加有抑菌剂的注射剂，在标签中应标明所加抑菌剂的名称与浓度；注射用无菌粉末，应标明所用溶剂）,例如：盐酸林可霉素注射液中添加苯甲醇人类红血球悬浮液接触到浓度

13、低于80 mM（约为8.6512 mg/ml）的苯甲醇时，在37，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80 mM 时，溶血作用则会增加。对于体内醇类脱氢酶水平低下者、因基因多态性而显性表达醇类脱氢酶2（ADH2）为3个等位异构体ADH21;ADH22;ADH23者均很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积增高并使其毒性随之增加。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,人类红血球悬浮液接触到浓度低于80 mM（约为8.6512 mg/ml）的苯甲醇时，在37，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80 mM 时，溶血作用则会增加。对于体内醇类脱氢酶水平低下等个体很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积

14、增高并使其毒性随之增加。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,体外试验显示：凡是含有超过9.45mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液在加入到2%普通级家兔血红细胞混悬液中后，在2.5小时3小时内，至少会引起血红细胞变性。4小时后则会出现溶血，尤以含有20mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液为甚，凡是未加苯甲醇者则均不会出现红细胞变性和溶血现象。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低的有效剂量，且最终包装容器中的抑菌剂有效浓度应低于对人体的有害浓度。中国药典2010版首次在附录中收载了“抑菌剂效力检查法指导原则”，用于测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的

15、活性，以评价最终产品的抑菌效力，同时也用于指导生产企业在制剂研发阶段进行抑菌剂的筛选。为保证添加到制剂中的抑菌剂的量在规定范围，2010年版药典一些品种参照USP等国外药典一般将其含量控制为其处方量的80%120。,注射剂中添加物（如防腐剂）的控制,美国FDA继1982年发布了禁止给新生儿使用苯甲醇或应调整配方的警示之后，又于2008年12月在其工业指南中要求生产厂商必须依照规定，将苯甲醇等非活性成分按其在处方中作用的显著性的顺序列出并明确标示于药品标签上。2010年版药典中盐酸林可霉素注射液（二部P729）增订苯甲醇检查项，规定“每1ml中含苯甲醇不得过9.45mg”。,注射剂中添加物（如防

16、腐剂）的控制,注射剂制剂通则变化重点提示,5）容器用胶塞要有足够的弹性和稳定性，倒置试验结果显示：多个头孢类抗生素粉针品种可与丁基胶塞中成分相互作用形成不溶性物质比如：注射用头孢唑啉钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢拉定温度越高，溶液浑浊越快，溶液的澄清度超过号就易引起过敏反应,包材释放物（BHT对头孢曲松钠澄清度的影响）,包材释放物头孢曲松钠溶液的澄清度过敏,溶液澄清度不合格样品中皮肤被动过敏试验的阳性率(31.6%)远远超出合格样品的过敏试验阳性率(0%)。过敏反应主要集中在浊度浓于2 号标准比浊液的样品中，澄清度介于1 号和2 号标准比浊液之间的样品均未引起过敏反应。因此，溶液的澄清度检查

17、规定“不得比1 号浊度标准液更浓”是必要的、合理的、有科学依据的。,2009年湖北所评价性抽验结果,注射剂制剂通则变化重点提示,6）除另有规定外，容器应足够透明，以便内容物的检视。因为注射剂出厂检验可见异物会有漏检，或某些品种在出厂后还会产生内源性可见异物，需要临用前在自然光下进行目视检查（避免阳光直射），如有异物，不得使用。,注射剂制剂通则变化重点提示,7）必要时应增设相应的安全性检查，如异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚、降压物质、热原或细菌内毒素等因为有些药物成分复杂、组分结构不清晰（如多组分抗生素动物来源提取的生化药等）、采用化学手段难于监控杂质异常毒性：有可能污染生物毒性物质的品种（发酵

18、）过敏反应：有可能污染异源蛋白或未知过敏反应物质的品种降压物质：有可能污染组胺、类组胺样物质的品种（腐败）,注射剂安全性检查,增设安全性监控项目,用化学手段不能控制组成、杂质无法控制的生物来源品种均增加了异常毒性、过敏反应等动物试验：如硫酸鱼精蛋白等,硫酸鱼精蛋白,鱼精蛋白主要存在于鱼类的成熟精巢组织中，与DNA紧密结合在一起，以核精蛋白的形式存在。它是一种小而简单的球形碱性蛋白质，分子量在1万以下，由30个左右的氨基酸组成，其中2/3以上是精氨酸，几乎不含芳香族氨基酸。吸光度 参照BP2008/EP6.0增订。根据本品组成，如果纯化步骤将核酸和杂蛋白均去除的话，在260280nm的波长范围内

19、吸光度应很小，但考察结果远远超过BP2008/EP6.0所规定的0.1。,增设有效项目指标加强安全性监控,结合药品的制法和工艺特点，以及杂质的特殊性设立特色有针对性检测项目。人尿制品增加乙肝表面抗原检查：如尿激酶、尿促性素、绒促性素、乌司他丁等重组品种增加菌体蛋白残留量、外源性DNA残留量、生物活性检测，如重组人生长激素、重组人胰岛素等。对含有皂甙的植物提取注射剂等增加溶血与凝聚检查：如去乙酰毛花苷注射液等。,按照凡例要求，在标准中增订【制法要求】,来源于人尿或动物组织，采用提取工艺制备的供注射用的原料药或直接与伤口接触的制剂应在质量标准中增加【制法要求】，重申其生产过程的安全性要求。供其他剂

20、型用原料（如口服制剂）暂未在质量标准中制订【制法要求】，而由凡例作统一规范。,【制法要求】的表述形式,例1：肝素钠（动物组织提取）本品应从检疫合格的猪或牛肠粘膜中提取，生产过程均应符合现行版药品生产质量管理规范要求。生产工艺要经病毒灭活验证，并能去除有害的污染物，生产过程中应确保不被外来物质污染。例2：尿促性素（人尿提取）本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版药品生产质量管理规范要求。本品在生产过程中需经适宜的工艺方法处理，以使任何病毒如肝炎病毒和人免疫缺陷病毒等灭活。例3：凝血酶冻干粉（直接与伤口接触的制剂）本品应从检疫合格的牛或猪血中提取，生产过程应符合现行版药品生产质量管理规范

21、要求。,2-乙基己酸-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2010年版药典二部（附录 L）；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。,2-乙基己酸 勘误：-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录2010年版药典二部（附录 L）；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。勘误：,高聚物凝胶色谱法（2010年版新增的19个标准）,高聚物2010版：品种增加,方法多元化 1、自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝胶G-10（Sephadex G

22、 10）；短柱子的使用，减少分离时间 2、商品凝胶柱TSK-GEL G2000SWXL：头孢地嗪（北京所）3、ODS柱，聚合物-氨苄西林钠舒巴坦钠（浙江所)4、柱切换（中检所），实现凝胶色谱与反相色谱的统一,高聚物盐酸头孢替安聚合物分析方法的比较,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,头孢羟氨苄高分子杂质分析图谱,Sephadex G-10系统,TSK-Gel G2000swxl系统,0.8ml/min,1-头孢羟氨苄；2-高分子杂质,标准统一、规范、明确、严谨典型项目-无菌检查方法,无菌检查是药物安全性风险控制的重要项目之一，但具体检查方

23、法以前标准中均不给出，由检验者自己摸索。抗生素阳性菌选用不注意抗菌谱，存在试验的有效性、一次成功率等问题对每个品种均要求经过验证，确定样品使用的最适宜方法（直接接种法？薄膜过滤法），最佳溶解方式、最佳冲洗液、冲洗方式、敏感的阳性对照菌等操作关键因素，并将上述内容按统一规范格式在质量标准中单独立项表述详细。,供注射用原料无菌检查,供注射用原料无菌检查,头孢呋辛钠：取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45m滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。头孢曲松钠：取本品3份，加微粒检查用水溶解并

24、制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录 C），每1g样品中含10m以上的微粒不得过6000个，含25m以上的微粒不得过600个。,无菌检查方法规范表述方式举例,氧氟沙星氯化钠注射液：无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于500ml），每管培养基中加入0.1mol/L硫酸锰溶液1ml，以大肠埃希菌为阳性对照菌，依法检查（附录 H），应符合规定。乙酰谷酰胺注射液：无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于100ml），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（附录 H），应符合规定。,注射剂制剂通则变化重点提示,纯度

25、要高、杂质要少、生物负荷要低从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素重点品种为营养性、无抑菌性、制剂有注射剂型注射剂用原料注重数量口服原料也要限定菌属种类（沙门氏菌）,原料药微生物限度检查,注射剂制剂通则变化重点提示,胰岛素（制剂为注射剂）取本品0.2g,依法检查（附录 J），每1g中含细菌数不得过300个。胰酶（制剂为口服制剂，来源于动物提取）取本品,依法检查（附录 J），每1g供试品中细菌数不得过10000个，霉菌和酵母菌总数不得过100个。并不得检出大肠埃希菌；每10g供试品中不得检出沙门菌。,原料药微生物限度检查,增设有效项目指标加强安全性监控,成分复杂、杂质无法控制但质

26、量与颜色相关度高的品种增加溶液的颜色，如糜蛋白酶等。,溶液颜色检查的目的,溶液颜色,自身性质,纯度,杂质含量,-简易、直观、快速、综合的对有色杂质进行检查,稳定性差,质量与颜色联系紧密的,安全性要求高,用仪器定量测杂质困难,注射剂用原料,仅在紫外区查杂质,成分复杂,变质就变色,检查颜色的品种,适宜进行溶液的颜色检查的原料,建立方法时要考虑的问题,溶剂,浓度,稳定性,临床安全性需要工艺生产能力同类产品水平,溶液的颜色,制订限度时要考虑的问题,主成分纯度,杂质的含量,稳定性数据,临床安全性需要工艺生产能力同类产品水平,颜色的限度,应用色差计转换进口药注册标准-举例,溶液的颜色 取本品0.5g，加水

27、10ml溶解后，溶液应无色；如显色，与同体积的比色液（取棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水，混匀）比较（中国药典2010年版二部附录 A第一法），不得更深。,色差计法应用举例,说明：企业标准按EP检查，规定“与B5号标准比色液（EP第5版溶液的颜色）比较不得更深”。因EP标准比色液从三原色开始就与中国药典不同，如按此检查会有困难，故采用色差计进行了对比测定，结果EP的B5号标准比色液的色差值（E*=3.58）与中国药典BR3号（E*=3.19）和BR4号（E*=4.46）的中值（3.82）较为接近，约相当于BR3.5号。因BR3号是取棕红色贮备液1.5ml加8.5ml水，BR4号是取棕红色贮

28、备液2.0ml加8.0ml水配制而成，所以本次复核将棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水配制了专用比色液，该比色液的E*为3.64，与EP B5号标准比色液的色差值几乎一致，按此转换限度既不改变质控原有水平，又方便在国内检验。,应用色差计转换进口药注册标准-举例,药典采用现代分析技术举例,由于某些药物组成的复杂性，特别是一些生物大分子药物，使用传统的分析方法已经不能满足当前的质控需要，2010年版药典逐渐改用现代分析技术。首次运用毛细管电泳法 注射用抑肽酶：检查两个特定杂质 注射用盐酸头孢吡肟：方法1-毛细管电泳法 N-甲基吡咯烷 方法2-HPLC法（羧基柱，电导检测）,毛细管电泳法检查特定杂

29、质,抑肽酶由上海药检所起草，参考USP增订去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸抑肽酶检查项色谱条件：石英毛细管分离柱，毛细管温度：30，电极液：磷酸二氢钾溶液；分离压：12KV；波长：214nm结果：去丙氨酸抑肽酶RT为0.99，去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶RT为0.98，两相关物间分离度1.40，去丙氨酸-抑肽酶与抑肽酶间分离度1.24、抑肽酶拖尾因子1.8,抑肽酶SDS-PAGE凝胶电泳图,本品系自牛胰或肺中提取、纯化制得的肽酶抑制剂。采用SDS-PAGE凝胶电泳的方法抑肽酶的有关物质，结果如图所示，都只有一个条带。可能是抑肽酶和有关物质的分子量相差不大，使用凝胶电泳不能将其分离,药典采用现

30、代分析技术举例,首次运用柱串联技术-抑肽酶 参照USP32用三根TSK柱串联检查高分子蛋白质。采用分子排阻色谱法，用三根色谱柱串联（TSK-G4000SWXL柱）柱温35，流速1.0ml/min,二聚体RT0.9，与主峰分离度1.4，主峰拖尾因子0.91。,药典采用现代分析技术举例,柱串联技术适用于溶解度无明显差异但电荷上有明显差异的难分离物质，通过将一根SCX（阳离子交换）短柱与一根MGC18长柱串联就可以简单达到将其分离的目的。原理：有电荷差异的被分离物质进入色谱柱串联系统后，带正电荷的物质（通常是碱性物质）会由于SCX短柱的离子交换作用而被保留在短柱中，而带负电荷的物质（通常为酸性物质）

31、与中性物质则会毫无阻碍的通过短柱进入C18长柱中，从而成功分离；然后由于MGC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保留作用，但对带负电荷物质无强保留作用，这样带负电荷物质与中性物质也简单被分开了如果为了让峰形更好，各峰间分离更开，还可在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH2短柱（它可与阴离子发生交换作用），进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质达到更好的分离效果。,药典采用现代分析技术举例,首次运用肽图分析技术：根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶，一般为肽链内切酶，作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断，再通过一定的分离检测手段

32、形成特征性指纹图谱，用此法进行鉴别，专属性强，可鉴别仅相差一个氨基酸残基的不同种属来源的样品。如胰岛素-采用V8酶解+HPLC法；重组人生长激素-采用胰蛋白酶酶解+HPLC法获得肽图进行鉴别等。,胰岛素肽图,人胰岛素酶解-HPLC肽图,猪胰岛素酶解-HPLC肽图,电泳法-等电聚焦水平板电泳法,琼脂糖凝胶电泳法,醋酸纤维素薄膜电泳法,纸电泳法,等点聚焦水平板电泳法,聚丙烯酰胺凝胶电泳法,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,典型的等电聚焦图谱重组人生长激素（二部第566页）用此法做鉴别,附录通用检测方法中的变化提示,澄清度检查法：增加“几乎澄清”的定义：0.5号1号溶液颜色检查法 恢复“无色或几乎无色”

33、的定义 性状颜色描述与颜色检查项匹配：原有些液体制剂品种颜色检查项规定“与黄色2号标准比色液比较，不得更深”，但性状描述为“无色或几乎无色的澄明液体”，与附录定义不匹配，现修订为“无色至微黄色的澄明液体”。本版药典中极个别品种仍然存在此问题！尼莫地平注射液,药典附录变化提示 钠盐的鉴别反应,重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：,药典附录变化提示 锌盐的鉴别反应,重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：,重新做考察:取样量,辅料干扰,延伸-环境友好,吸收系数,物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml）,液层厚度为1cm时的吸

34、光度数值。研究意义及应用趋势的改变 原始记录问题,仿制药品研究的原则,主基调 比较研究研发目标 被仿制药参考文献 被仿药的标准 中国药典 局颁标准（成册标准、散页标准）包括 进口药注册标准 企业注册标准 四国药典,已有国家标准化学药品研究技术指导原则 在选择参比对照时一般遵循以下原则：如原发厂家生产的产品已在我国上市，一般首选原发厂产品作为参比对照；如不能获得原发厂产品，可以考虑选用研究基础较好、临床应用较为广泛的非原发厂产品作为参比对照；也可以对不同厂家生产的同品种进行质量对比，优选质量较好的产品作为参比对照。,比较研究的标尺问题-被仿制药品的选择原则,原研品,认可度高,首仿品,被仿品,注意

35、：可比性-贮存时间大致相同！包装条件相同！真实性 提供发票、标签、批号或照片,比较研究的标尺问题-被仿制药品的选择原则,比较研究的标尺问题-购买的对照品/标准品,对照品/标准品,权威性,真实性,准确性,-发票、标签、批号、分析报告单、盐基/碱基、水分,详细精制方法、质量检验报告标定方法与结果,详细提取精制方法、质量检验 报告、标定方法与结果,详细合成精制方法、质量检验报告、标定方法与结果,纯化精制,提取精制,合成精制,比较研究的标尺问题-非购买的对照品/标准品,标定者 测定结果（%）n 均值（%）RSD（%）1.98.82%，99.12%，99.18%，99.25%，99.17%5 99.11

36、%0.17%2.98.96%，99.04%，99.24%，98.98%，98.98%5 99.04%0.12%3.99.12%，98.94%，99.04%，99.04%，99.18%5 99.06%0.09%经Corchan检验，三位标定者的方差没有差异，均来自同一正态分布。用Dixon法检验15组数据中的最大值99.25%，最小值98.82%均非离群值。T1-0.05S置信区间=X=99.080.068 n1/2标定结果的置信区间为99.1599.01%，因此，本批对照品的色谱纯度总均值为99.08%。,对比研究对比检验研究项目 原执行标准考察方法 原法定标准,比较研究的范围与方法-考察项目

37、与方法的选择原则,物料不同原料、辅料分析对象 工艺不同路线、中间体 设备不同质材、参数精度 不全面没的学（复方无有关物质）已有标准不完善不应学（地标升国标标准）不适用不能学（厂送设备）,为什么呢？,产品生产个性应关注 标准隐性变化 同类最新动态,如何在已有标准基础上变化拓展,如何借鉴进口药注册标准,读懂,取长补短,更上一层楼,学到位,+,先进性,完成时应该是当时最为严格的同品种标准,专属性,仅属于某个企业专有,个性化,某些项目的适用性及推广性较差,保密性,非公开的，仅在CDE，中检所和口岸所等部门存档,进口药注册标准的特点,弃去5ml初滤液用xx膜过滤，机械振摇xx分钟等等用聚四氟酰胺小瓶柱温

38、25,借鉴进口药注册标准读懂、学到位,对于不该学的、不方便学的、学不了的、需转换的要尽量不降低质控水平替换例如:某季铵盐片可能具有食道刺激性，所以选用了在酸性条件下可溶、但在碱性条件下仅膨胀而不溶解的材料进行包衣，以保证服用后在食道中不破裂但在胃液中仍可快速崩解，包衣的质量与服用后的刺激性相关,借鉴进口药注册标准 取长补短、更上一层楼,耐水时间：取本品20片，分别置2只装有200ml水的烧杯中，每只烧杯中放置10片，在370.5水浴中保温，观察各片破裂，崩解时间，20片的耐水时间平均值应超过45分钟，小于20分钟的不得多于2片，小于10分钟的不得多于1片,借鉴进口药注册标准 取长补短、更上一层

39、楼,该检查项立意虽好，但实验设计和限度制订还不够科学合理。比如，根据破裂还是完全崩解记录时间标准中没有明确，而通常从破裂到完全崩解是需要一段时间的，现在静态检验间距就会更大；还有，如果耐水时间平均值规定应超过45分钟，还允许有小于10分钟的样品出现，那么样品间存在的质量差异就过大。,借鉴进口药注册标准 取长补短、更上一层楼,耐水时间 取本品20片，分别置2个装有200ml水的烧杯中，每个烧杯放入10片，在370.5水浴中保温，观察各片的破裂情况，45分钟内各片均应完整不破裂，如有破裂，20片的耐水时间平均值应不低于45分钟，在20分钟内破裂的片子不得多于2片，且在10分钟内不得有片破裂。,借鉴进口药注册标准 取长补短、更上一层楼,Thank You!,谢谢大家！,