皂角刺中黄酮提取及抗氧化性研究答辩.ppt

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1、2023/8/21,皂角刺中黄酮提取及其抗氧化性研究,2023/8/21,二、皂角刺概述,一、引言,三、实验中所用到的仪器,四、皂角刺中黄酮的测定,六、结论,五、皂角刺中黄酮的抗氧化性研究,目录,七、致谢,2023/8/21,一、引言,皂角刺中是一种传统的中药，在临床上有着大量的应用。它含有大量的黄酮，黄酮是一种很强的抗氧化剂，可有效清除体内的氧自由基，这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。因此本文将对皂角刺中黄酮的含量进行了测定，并对其氧化性进行研究，以期对皂角刺药理作用的开发提供提供有用的资料。,2023/8/21,二、皂角刺概

2、述,皂角刺（Chinese honeylocust spine），又称皂角针，为豆科落叶乔木植物皂荚树的棘刺。分布较广。,2023/8/21,皂角刺概述,皂荚皂甙,黄酮,氨基酸,棕榈酸,硬酯酸,油酸,酚类,多元醇,抗菌、抗炎作用,免疫调节与抗过敏作用,皂角刺药理作用,抗凝血作用,2023/8/21,三、主要仪器,电子天平,HCR-3018高速离心机,恒温水浴锅,2023/8/21,三、主要仪器,超波清洗器,循环水真空泵,DJZ型粉碎机,2023/8/21,四、皂角刺中黄酮测定,芦丁标准曲线绘制,皂角刺中黄酮测定实验流程,称取2.00g皂角刺（加入20mL60%乙醇）,超声30min,抽滤,定容

3、过夜,离心取上清液,加入药品定容,测定,移取1ml,40,2023/8/21,皂角刺中黄酮测定数据,2023/8/21,五、皂角刺中黄酮抗氧化性研究,1、脂质体系中抗氧化能力测定2、Fe3+还原能力测定3、OH清除能力测定4、DPPH清除能力,2023/8/21,1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率）,实验步骤,1mL LLS+1mLFeCl3+1mLVc+1mL样品,混匀,避光 37水浴 1h,加入TCA-TBA-HCl混合液,避光 沸水煮 15min,迅速冷却,离心取上清液,在532nm处测定吸光度As以1mL蒸馏水为空白测定吸光度Ac,2023/8/21,1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑

4、制率）,测定数据以及抑制率,抑制率%=(Ac-As/As)100,2023/8/21,1、脂质体系中抗氧化能力测定（抑制率）,以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，抑制率为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制率）也增加。,2023/8/21,2、Fe3+还原能力测定,实验步骤,1mL样品+2.0mL PBS缓冲液+2.0mL铁氰化钾,摇匀50水浴20min,迅速冷却,加入2mLTCA,混匀,3000r/min离心10min,取2mL上清液+0.4mLFeCl3+2.0mL蒸馏水,以蒸馏水调零 以Vc代替样品作为阳性对照 在700nm测定吸光度,2023/8/21,2、F

5、e3+还原能力测定,Fe3+还原能力测定表格.doc,以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，样品吸光度为纵轴作的曲线如下图,随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大，即Fe3+还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强,2023/8/21,3、OH清除能力测定,实验步骤,硫酸亚铁铵、水杨酸-乙醇溶液和样品各1mL+0.03mLH202,摇匀,37水浴30min,510nm测定吸光度Ax以蒸馏水代替样品作空白对照测吸光度A0 以Vc作为阳性对照样品本底吸光度用蒸馏水代替双氧水测定吸光度Ax0 每个浓度平行测定3次,2023/8/21,3、OH清除能力测定,OH清除能力测定表格.doc,以黄酮浓度/（ug/

6、mL）为横轴，清除率%为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加，皂角刺的OH清除能力越来越弱。,2023/8/21,4、DPPH清除能力,DPPH清除能力数据及计算,DPPH清除率=（1-（Ai-Aj/Ae）100,2023/8/21,DPPH清除能力,以黄酮浓度/（ug/mL）为横轴，DPPH清除率%为纵轴作的曲线如下图,随着黄酮浓度的增加，皂角刺的DPPH的清除率越来越强。,2023/8/21,六、结论,根据芦丁标准曲线A=0.0379C+0.0003稀释倍数为25，黄酮含量为3.48mg/mL；算出皂角刺黄酮提取率为8.70%。,1、皂角刺中黄酮的提取,2023/8/21,六、结论,1）随着黄酮浓度的增加脂质体系中抗氧化能力（抑制率）也增加2）随着皂角刺黄酮浓度的升高样品吸光度逐渐增大，即Fe3+还原能力随着黄酮浓度的增加越来越强；3）随着黄酮浓度的增加，皂角刺的OH清除能力越来越弱4）随着黄酮浓度的增加，皂角刺的DPPH的清除率越来越强。,2、皂角刺黄酮抗氧化性研究,2023/8/21,七、致谢,感谢老师百忙之中给予指导,