疑难血型鉴定的最妙之法兰炯采.ppt
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1、大量输血,大量输血:是指在12小时内快速输入相当于受血者本身全部血容量或更多血液的输血。速度:可以快到100毫升/分相当于一位体重70Kg的人在24h内输入5000ml的血大创伤、大出血及大手术(如开胸术、气管移植等)常需要大量输血,换血术也是大量输血。,大量输血,随着现代外科手术和治疗范围的扩大,不仅要求输血的数量大,而且要求的质量高,品种多。大量输血即是外科临床常用的重要急救措施。也可以因施行不当给患者带来严重的危害。在进行大量输血时,临床医生和输血工作者必须具备丰富的临床经验,才能保证抢救取得成功。,大量输血,一、大量输血时血液制品的选择和o型血的应用(一)、血液制品的选择1、全血以前大
2、量快速输血一概用全血,现在主张采用成分输血,适当输血全血,不一定输最新的全血。一般认为保存的全血中衰老红细胞将逐渐丧失2.3-二磷酸甘油酯,使血红蛋白和氧的亲和力增加,理论上可以减少对组织的供氧。但实际上血红蛋白和氧的增加是可逆的,2.3-二磷酸甘油酯减少仅是可暂时现象。输入体内24h多能恢复,所以保存的全血并不减少对组织的供氧实验证明4,红细胞无效输血及有关问题,一,红细胞有“无效输血”吗?二,国外”无效输血”的权威文献三输入红细胞的去向四输血的理论效果五红细胞无效输血的慨念 六红细胞输血的临床效果调查 七.无效输血的原因和机理 八,无效输血的后果九,研究无效输血的意义十,减少/避免无效输血
3、的措施,临床输血实践中,不少医生早就发现,某些患者输注红细胞后,Hb升高不理想,个别患者甚至不升高或,但又未发现继续失血,溶血性输血反应等体征,临床(目前无法合理解释)输红细胞后Hb不升高的原因,输入体内的红细胞到那里去了?这是不争的客观事实 于提出红细胞无效输注(无效输血)的概念,三,输入红细胞的去向输入红细胞的去向 1.正常代谢,Hb 2.溶血(免疫破坏)3.继续丢失(注意隐性失血,内出血)4.渗出血管外 5.脏器(肝、脾)扣押 6.机械破坏 7.水肿(补液),稀释,四,输血的理论效果,输血的理论效果,或预期值:输血后,24h内Hb 供者Hbg/L输血量ml Hb(g/L)=90 患者血量
4、ml,粗略估计输血效果:献血员/正常人男:Hb 120-160g/L女:Hb 110-150g/L 输入400ml全血,或400ml全血分离的红细胞 应该,或者可以升高Hb 10g/L,五.红细胞无效输血的慨念,1.广义的无效输血 输入红细胞后,Hb升高不到预期值 包括两种情况:原因明确 未发现明确原因 2.目前研究的是狭义的无效输血 第二种情况,即临床上和实验室检查,不能对Hb升高不到预期值的原因作出合理解释者,3.单纯性Hb不升高性溶血无效输血 临床溶血性输血反应有三种:急性溶血 迟发性溶血/回忆反应 代偿性/单纯性Hb不升高性溶血,1.红细胞输血的临床效果调查 洛阳除外继续失血,输液稀释
5、,无溶血反应体征 输血例 量U 无效()无效U 省三甲1 710 2327 211(29)855 市三甲2 1490 4699 169(11.3)496 县二甲2 800 2838 49(6.1)172 合计 3000 9094 439(14.6)1523,2,红细胞无效输血协作组在兰州,乌鲁木齐、呼和浩特,柳州等地调查输血病历3000份,输血7500u,其中无效输血420例,无效频率14.0%,与洛阳地区的结果一致,七.无效输血的原因和机理,1,发生无效输血的原因 免疫因素 稀有血型误定/漏检,实验技术的限制,不规则抗体筛查/交叉配血漏检 自身抗体 非免疫因素 感染发热 非溶血性输血反应,如
6、过敏 肝脾肿大 未知因素(待研究),2,无效输血的机理?ABO亚型,RhD/其它血型不规则抗体 多为IgG抗体,抗原/抗体弱 IgG抗体引起的溶血,是血管外溶血 IgG抗体引起的溶血一般不会引起血压下降、休克,Hb尿、肾功能衰竭等,八,无效输血的后果,.浪费血源 2.延误治疗 3.增加医疗费,九,研究无效输血的意义,1.节约宝贵的血液资源 2.提高临床输血水平,3.节约医疗费,十,减少/避免无效输血的措施,)怎么预防无效输血?预防无效输血的方法,分为三大类 提高输血前试验技术,临床可以预防:预防ABO,Rh亚型误定/漏检 预防抗体筛选漏检 预防配血漏检 科学输血,临床可以减少 AIHA科学输血
7、 预防非溶血性输血反应 预防方法有待研究 感染发热 肝脾肿大 未知因素,二)预防无效输血方法之一 预防ABO,RhD亚型误定/漏检 1.临床导致无效输血的原因复杂,初步探索,ABO,Rh亚型漏检是原因之一 2.临床输血常规只要求查ABO,Rh(D),因此临床常规输血中,通常只涉及:ABO亚型,Rh(D)亚型/变异体 人类血型(杰夫.丹尼尔)ABOA:A2(0.68%),A3(0.1%?),Aend(0.1%?),Ax(0.003%?),Am(0.0015%?),Ay(?),Ael(0.0015%?),Aw(?),Amos(?)B:B3(0.1%?),Bx(?),Bm(?),Bel(?),Bv(
8、?),Bmos(?)O及其它:孟买型(Oh,Ah,Bh,Ohm,AHm0.013%?)cisAB(0.012%?);RhD:Du,Del(汉族初筛Rh阴性者中占1/3,中国实验血液学杂志,05,(1);130;2005(3):509),部分D,以及:D,Da,Db,Dc55种(?)ABO亚型20多种,Rh Du,Del频率合计1%,3.中国只有A2型频率资料:A2 0.69%A2:医科院输血所陈稚勇,上海血站赵桐茂.我国十六个民族的血型调查报告.中华血液学杂1980,1(5):261 汉:0.69%(11/1606)蒙:0.99%(11/1112)维:2.71%(41/1513)各种ABO亚型
9、合计,不低于1,4.RhD有六个类型:增强D,正常D 弱D(Du),极弱D(Del),部分D D(-)弱D/极弱D具有“中国特征”,西方人弱D/极弱D少,中国汉族多(Rh阴性者之1/3(?),中国实验血液学杂志,2005;13(1):130/2005;13(3):509),5.ABO,Rh亚型误定/漏检为什么会导致无效输血呢?误定血型的现象,一般是两种情况:“少定”某抗原有定无,多定少 如:A2定O;Du定D-“多定”某抗原无定有,少定多 如:A2定A;D-定D+,1)对于患者,如果“少定”,一般情况 不会发生无效输血 不会发生无效输血(2)对于患者,如果“多定”,就可能会发生无效输血,(3)
10、对于供者,如果“少定”,可能发生无效输血(4)对于供者,如果“多定”,不会发生无效输血,临床输血遇到ABO,RhD疑难血型如AB/A?A/A2医院病人怕多定血站供者怕少定,6.实验不规范与ABO,Rh亚型误定/漏检(1)ABO,Rh亚型被误定,如果缺少临床或实验室”提示”:定 错血型,不一定被发现,以错当真,(2)常规实验中,ABO亚型的”提示”抗-AB与抗-A/抗-B凝集强度不平行正反定型不一致 凝集异常,与ABO”同型血”,交叉配血不合 与ABO”同型血”,交叉配血”相合”但输血发生反应 与ABO”同型血”,交叉配血相合 输血无反应,但Hb未升高,(3)常规实验中RhD亚型/变异体的”提示
11、”抗-D弱凝集,难判定+/-?(弱D,Del)与Rh“同型血”,交叉配血不合 与Rh“同型血”,交叉配血相合 但输血发生反应 与Rh“同型血”,交叉配血相合,输血无反应 但Hb未升高 初筛为RhD(-)者一律要排除弱D,极弱D,三)预防无效输血办法之二:预防抗体筛查漏检 什么是抗体筛查?检查病人体内(样本血清):有无不规则抗体,为什么必须做抗体筛查?临床输血技术规范第17条规定四种情况:()输血反应史;()妊娠史;()配血不合者;()短期内 需要多次 输血者 必须(!)做抗体筛查 安全输血 有效输血,抗体筛查中,AABB提醒五个被忽略的重要问题 A A B B TE C H N I C A L
12、 MANUA L,In the case of transfusion reactions,newly developed antibodies initially detectable only in the eluate are usually detectable in the serum after about 14 to 21 days ABO亚型抗体一律漏检 AABB.Technical Manual.16ed.Copyright 2008,469 下列抗原-抗体反应有”剂量效应”,D,C,c,E,e,M,N,S,s,Fya,Fyb,Jka,Jkb,AABB.Technical M
13、anual.16ed.Copyright 2008,465推荐低效价/低亲合力抗体筛查技术()筛查细胞浓度()血清:细胞()增强剂/技术()增加保温时间()吸收/放散法浓缩,每个医院都有条件立即开展抗体筛查 每个血库人人都会作抗体筛查 因为抗体筛查和主侧配血的操作完全一样,抗体筛查结果分析 抗筛(+)()如果直抗(-),有不规则抗体,做抗体鉴定 选不带对应抗原的红细胞配血()如果直抗(+),有两种情况 A.单纯自身抗体,B.自身抗体+不规则抗体 除理办法复杂 参照AIHA配血法,抗筛(-)()无不规则抗体()有不规则抗体,因筛选细胞抗原复盖面不全/或者是杂合子而漏检()有不规则抗体,因方法局限
14、而漏检()ABO亚型抗体,(四)预防无效输血办法之三:预防配血漏检 输血前实验三关:血型,ABO,RhD;不规则抗体筛查;配血任何一种配血方法都不是100准确,有假阴/假阳性 聚凝胺:漏检Kell抗体?漏检酶型Rh-D/E抗体?漏检效价 2/积分 5的抗体,酶:假阴/阳性?抗球蛋白:单价与多价的选择?最适稀释度?前带?漏检唯酶(Rh)抗体?配血卡:原理同抗球蛋白;,(五)预防无效输血办法之四:重视AIHA科学输血 AIHA 输血问题很复杂,要专题讨论,六)预防无效输血办法之五:减少非溶血性输血反应 临床发现,非溶血性输血反应,有时同时发生无效输血,原因有待研究(七)其它与无效输血有关的因素 感
15、染发热 肝脾肿大 未知因素 如何预防,有待临床研究,(九)疑难血型漏检与无效输血 1,为什么要研究疑难血型?临床无效输血达10%左右 导致临床无效输血的原因复杂 但是下列原因不容置疑,而且与血库工作有关 疑难血型漏检 ABO亚型漏检(理论上ABO亚型1%;供者与患者组合 2%)RhD亚型/变异体漏检 不规则抗体(特别是效价2者)漏检 配血漏检,2,疑难血型相关定义,概念 血型:血液中各种成分的遗传多态性标志 说明:通常所称血型,不加限定(如白细胞血型,血小板血型),则专指红细胞血型 疑难(ambiguous)血型:是指一种血型难以判定的”现象”,本质不是 一种血型,无定义 因为是否疑难,与血库
16、条件,水平,经验有关;例如,县医院认为AIHA血型难定,上海血液中心就认为很容易检定,ABO,Rh亚型,变异体,对于多数基层血站/血库来说,就属于疑难血型,人群中1%稀有(rare)血型:人群中1(American Rare Donor Program,ARDP,定义)极稀有(very rare)血型:人群中1/万(ARDP 定义),3,临床输血常规中通常涉及的疑难血型 临床输血常规只要求查ABO,Rh(D),因此临床常规输血中,通常只涉及:ABO亚型,Rh(D)亚型/变异体 虽然每个血型系统都有一些疑难血型,但是常规根本不检查其它血型系统,当然一般就不会涉及其它血型系统的疑难血型 例如,你跟
17、本不检查Fy血型,你怎么会知到某个病人的Fy血型/抗原,是否疑难或异常呢?,ABO与 Rh系统的亚型,或疑难血型人类血型(杰夫.丹尼尔)ABOA:A2(0.68%),A3(0.1%?),Aend(0.1%?),Ax(0.003%?),Am(0.0015%?),Ay(?),Ael(0.0015%?),Aw(?),Amos(?)B:B3(0.1%?),Bx(?),Bm(?),Bel(?),Bv(?),Bmos(?)O及其它:孟买型(Oh,Ah,Bh,Ohm,AHm0.013%?)cisAB(0.012%?)RhD:Du,Del(汉族初筛Rh阴性者中占1/3,中国实验血液学杂志,2005,(1);1
18、30;2005(3):509),部分D,以及:D,Da,Db,Dc55种(?)?”增强D”(?)?为非中国人资料*ABO亚型20多种,Rh Du,Del,频率合计,中国只有A2型频率资料:A2 0.69%A2:医科院输血所,上海血站.我国十六个民族的 血型调查报告.中华血液学杂1980,1(5):261 汉:0.69%(11/1606)蒙:0.99%(11/1112)维:2.71%(41/1513)数据绝对可信!各种ABO亚型,合计,应该1血库,血站作300例ABO定型发现ABO亚型吗?都漏检啦!,由于常规不检查ABO,Rh(D)以外的血型,因此,只有发现不规则抗体(如:抗-E,抗-M,抗-F
19、ya,抗-Jka.)要选用对应抗原阴性血,才检查其它血型系统(Rh(E),MN,Duffy,Kidd.)不规则抗体频率2-8;因此,临床输血中,涉及其它血型系统的机率2-8;某个血型系统中只有部分样本”疑难”;因此,涉及其它血型系统疑难血型的机率 2-8 如果不作抗体筛选,就不存在选用对应抗原阴性血的问题,涉及其它血型系统疑难血型的机率更是小了,疑难血型与无效输血的关系既称”疑难血型”,便容易误定血型误定血型的现象,一般是两种情况:”少定”某抗原有定无,多定少 如:A/A2定O;Rh+定-”多定”某抗原无定有,少定多 如:O/A2定A;Rh-定+不会不同血型之间误定,对于患者,如果”少定”,一
20、般情况 不会发生无效输血 例:ABO亚型(A2,Ax,Am;Bx,Bm)误定O型 接受O型红细胞;Rh弱D(Du,Del)误定Rh(-)接受Rh(-)红细胞 不会发生无效输血,对于患者,如果”多定”,就可能会发生无效输血 如:A2(可能含抗-A1)误定A 接受A型红细胞 Rh弱D(可能含某种D表位抗体)误Rh(+)接受Rh(+)红细胞 可能发生无效输血,对于供者,如果”少定”,可能发生无效输血 如:A2 误定O型 红细胞输给O型患者(含抗-A,B)Rh弱D 误定Rh(-),红细胞输给Rh(-)患者(可能含某种D表位抗体)可能发生无效输血,对于供者,如果”多定”,不发生无效输血 如:A2 误定A
21、型,红细胞输给A型患者(不会有抗A2抗体)Rh(-)误定Rh(+),红细胞输给Rh(+)患者(不会有 抗”Rh阴性抗体”)不会发生无效输血,5,供者/受者ABO,Rh亚型被误定 输血后可能表现(1)无效输血(2)输血反应(3)产生抗体,6,讨论 ABO,RhD亚型漏检/误定,是不是差错/事故?一种看法:临床输血技术规范规定检定ABO,RhD,没明确说明要检定亚型,漏检/误定亚型不是差错事故(法无明令,不承担责任)另一种看法:ABO,RhD血型检定就包括亚型漏检亚型,不管是否导致不良后果,都是差错事故 如果认为:ABO亚型漏检,但没有发生输血反应,就不是差错事故;那么A型人错输B型血,只要没反应
22、(临床上有这种案例),也不算事故吗?,医生与ABO/Rh(D)亚型漏检/无效输血 因为:ABO亚型,Rh(D)亚型/变异体不是常规检查项目医生不提,输血科 不会做 可能导致无效输血 输血有无效果,医生知道,输血科不知道 发生无效输血,医生必须与输血科沟通,在输血申请单上特别注明检查亚型/变异体,7,疑难血型的提示怎么发现稀有血型?某些疑难血型被误定,因无临床或实验室”提示”:定 错血型,不一定被发现,以错当真 如:供者,Ax型 误定O 型 与O受者(含抗-A,B)配血,因Ax抗原弱 交叉配血漏检输血仅表现无 效,无明显临床不良反应 临床对”无效”视而不见 根本发现不了定错血型,常规实验中,AB
23、O疑难血型的”提示”抗-AB与抗-A/抗-B凝集强度不平行 如:Ax抗-AB+/2+,抗-A w 正反定型不一致 如:A2 正定型抗-A+;反定型可能AC+Oh 正定型O;反定型可能OC+MF,弱凝集,难判定+/-?如:Am抗-A(vw+),抗-B(-),与ABO”同型血”,交叉配血不合 与ABO”同型血”,交叉配血”相合”但输血发生反应 与ABO”同型血”,交叉配血相合 输血无反应,但Hb未升高 不合遗传规律 如:AB O cisAB,RhD稀有血型的提示 抗-D弱凝集,难判定+/-?(弱D,Del)与Rh”同型血”,交叉配血不合 与Rh”同型血”,交叉配血相合 但输血发生反应 与Rh”同型
24、血”,交叉配血相合,输血无反应 但Hb未升高,8,分析疑难血型的注意事项 实验操作必须规范化 实验操作不规范 本来是疑难血型漏检”不疑难”了 如:常根据提示抗-AB与抗-A/抗-B凝集强度不平行,或凝集呈mf样进一步检查确定ABO亚型;倘若:正定型未采用抗-AB 抗-A/抗-B管离心看结果时,离心力过大,mf就会成为 2+没有”提示”,不进一检查(吸收放散,血型物质,抗-H,家系,DNA.)便会漏检ABO亚型,这具有临床输血的”中国特有现相”,我国目前许多基层单位:检定ABO血型不用抗-AB(国外焉有不用抗-AB之理也?)离心力不标准(有些地方只规定转速,要求不同大小的离心机采取同样转速和时间
25、,不管离心力)漏检ABO亚型导致”无效输血”就在所难免啦,本来不是疑难,人为造成”疑难”如:有些基层单位 用凝血块打下红细胞做正定型,可能红细胞悬液本来就有小凝块,似mf样,或误判凝集 用血浆作反定型,纤维蛋白析出,”网”住红细胞,误判凝集,这具有临床输血的”中国特有现相”,我国目前许多基层单位,甚至省市级医院血库:用凝血块打下红细胞做ABO正定型 用血浆作反定型 误定ABO亚型 导致”无效输血”就在所难免啦!,2,初筛Rh血型(IgM/IgM+IgG抗-D,盐水法)阴性者,一律进一步查/排除:弱D?IgG抗-D,AHG 极弱D?氯仿/三氯乙烯吸收放散 献血者如为弱D/极弱D,误定D(-)输血
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