槐米中芸香苷提取分离及检识.ppt

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1、槐米中芸香苷提取分离及检识,实验原理：1.芸香苷分子中含具有酚羟基，能与碱成盐而溶于碱液中，加酸酸化后又可沉淀析出，可用碱溶酸沉法提取芸香苷。2.在热水中溶解度大,冷水中溶解度小，采用沸水提取法。芸香苷的精制可根据其在冷、热水（或冷、热乙醇）中溶解度相差悬殊的性质进行。3.芸香苷可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，并可通过色谱及化学反应鉴定。,冷热溶解度差别大，可在酸水中发生水解。含有糖，极性大。,冷、热水中均不溶解，不含有糖，极性小于芸香苷。,芸香苷的提取,称取槐米粗粉20g（压碎），置于500ml烧杯中，加0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加入石灰乳调至pH89，加热微沸30min

2、，随时补充失去的水分和保持pH89，趁热用棉花滤过，残渣加150ml0.4%硼砂水溶液同法操作再提取20min，合并两次滤液，用浓盐酸调pH34，搅拌，静置过夜（沉淀下来的是什么？）。,芸香苷的精制,将上次实验静置液减压抽滤，在6070烘干，得粗品芸香苷，称重，计算得率。将粗制芸香苷悬浮于300ml蒸馏水中，煮沸至芸香苷全部溶解，趁热抽滤，滤液放冷析晶。,芸香苷冷热溶解度差别大,芸香苷的水解,将上次实验所得溶液抽滤，在6070烘干，得精制芸香苷。取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸80ml，加几粒沸石，加热回流1h，瓶中浑浊液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀（为什

3、么出现如此现象？）。放冷，抽滤，丢弃滤液（应为澄清无色液体），沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，烘干，称重。得槲皮素。,芸香苷,槲皮素,葡萄糖,鼠李糖,芸香苷,芸香苷的水解,将上次实验所得溶液抽滤，在6070烘干，得精制芸香苷。取精制芸香苷1g，置250ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸80ml，加几粒沸石，加热回流1h，瓶中浑浊液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。放冷，抽滤，丢弃滤液（应为澄清无色液体），沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用蒸馏水洗至中性，抽干水分，烘干，称重。得槲皮素。,槲皮素,葡萄糖和鼠李糖,芸香苷,槲皮素,葡萄糖,鼠李糖,芸香苷和槲皮素的检识,

4、色谱检识：聚酰胺色谱化学检识1.盐酸-镁粉反应：黄酮 2.三氯化铝反应：黄酮3.三氯化铁反应：酚羟基4.Molisch反应：糖、苷类,芸香苷和槲皮素的色谱检识,样品：自制1%芸香苷乙醇溶液 自制1%槲皮素乙醇溶液对照品：1%芸香苷对照品乙醇溶液 1%槲皮素对照品乙醇溶液色谱方法：聚酰胺色谱 展开剂：乙醇:水:乙酸乙酯（3:1:0.5）约4ml，上行展开。展距：6cm。显色剂：在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色。用氨水熏，记录斑点颜色和位置。结果：记录图谱，斑点颜色，并计算芸香苷和槲皮素的Rf值。,聚酰胺色谱法是利用作为固定相的聚酰胺分子内存在的许多酰胺基，能与酚类的羟基、酸类的羧

5、基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附，是混合物中各成分得到相互分离的方法。,聚酰胺与各种化合物形成氢键的能力不同，决定了聚酰胺对其吸附力的强弱。形成氢键的能力首先与溶剂的种类有关，在水中最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱。在聚酰胺色谱中常用作洗脱剂的各种洗脱能力顺序如下：水 甲醇或乙醇 丙酮 稀氢氧化钠溶液或稀氨溶液 甲酰胺或二甲基甲酰胺 尿素水溶液,与在含水溶剂中，化合物分子结构对氢键缔合的影响有关，大致如下：,化合物分子中能形成氢键的基团数目越多，被聚酰胺吸附越强。形成氢键的基团所处位置不同，被吸附的强度也不同。分子中芳香核、共轭双键越多，被吸附强度越大。化合物若能形成分子内氢键，则被吸附强度减小。,薄层色谱,play,