检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.ppt
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1、,具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2反应生成络合物,含醛基的可溶性还原糖将Cu(OH)2还原为Cu2O沉淀,反应原理,0.01 g/mL CuSO4溶液,0.1 g/mL NaOH溶液,0.05 g/mL CuSO4溶液,0.1 g/mL NaOH溶液,B液,A液,乙液,甲液,成分,双缩脲试剂,斐林试剂,比较项目,都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL,相同点,样液变紫色,样液浅蓝色棕色砖红色,反应现象,不需加热,5065水浴加热,反应条件,先加入A液2 mL摇匀,再加34滴B液摇匀,甲、乙两液等量混匀后立即使用,添加顺序,双缩脲试剂,斐
2、林试剂,比较项目,化学物质的检测方法,第10 d有可溶性糖,不排除有还原糖的可能,故加入斐林试剂,水浴加热后可能出现砖红色沉淀;,种子中一定有蛋白质,加入双缩脲试剂后会出现紫色反应;,第30 d种子中有脂肪,与苏丹染液发生反应,呈现橘黄色;,第40 d种子中无淀粉,加入碘液后不会呈现蓝色。,发芽的小麦种子匀浆中含有淀粉酶,淀粉酶能使小麦种子中的淀粉水解产生麦芽糖等还原糖。,14号试管中加入斐林试剂后,因1、3号试管中是蒸馏水而无还原糖,故显示斐林试剂本身的蓝色,2号试管中虽含还原糖,但未水浴加热,故仍呈蓝色,4号试管进行水浴加热后出现砖红色沉淀。,用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液,必须混合均匀后再使用,而鉴定蛋白质时需先加A液,再加B液,且两者CuSO4溶液浓度也不同;,用双缩脲试剂鉴定蛋白质时,不需要加热。,根据溶液甲中的颜色变化可知其含有蛋白质;,根据乙溶液中的颜色变化可知其含有淀粉;,甲、乙混合后,两溶液中的物质发生反应产生了还原糖,由此可知,甲溶液中含有淀粉酶,乙溶液中含有淀粉。,20和30培养条件下相比较,30时淀粉酶的活性相对较高,淀粉酶催化淀粉水解成麦芽糖的速率更快,相同条件下产生的麦芽糖更多。,麦芽糖属于还原糖,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀,麦芽糖越多显色越明显,斐林试剂本身为蓝色,可得出甲试管呈浅砖红色,乙试管呈砖红色,丙试管呈蓝色。,谢 谢 观 看,
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