个人防护和操作规范加兴.ppt

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1、生物安全实验的个人防护和操作规范,个人防护装备,是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。,个人防护装备,所涉及的防护部位：1、眼睛、2、头面部、3、躯体、4、手、5、足、耳（听力）6、呼吸道,个人防护装备,装备包括：1、眼镜（安全镜、护目镜）2、口罩、面罩、防毒面具 3、帽子 4、防护衣(实验服、隔离衣、连体衣、围群)5、手套 6、鞋套 7、听力保护器等。,个人防护装置选择原则,实验室工作人员根据不同级别的生物安全水平操作选择个人防护装置。结

2、合工作的性质选择个人防护装备,个人防护装备,要求工作人员应掌握的要点：1、必须十分了解和掌握自己工作性质和特点 2、所涉及的实验工作需要使用个人防护装备 的类型 3、正确的使用方法,个体防护的配备原则,BSL1实验室工作人员在实验时应穿工作服，戴手套必要时佩戴防护眼镜。完成实验，工作服必须脱下留在实验室并定期消毒洗涤。,个体防护的配备原则,BSL2实验室除符合BSL1的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下留在实验室内。先消毒，然后统一洗涤或丢弃。戴帽子和口罩。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。工作完全结束后方可除去手套。不

3、得戴着手套离开实验室。,个体防护的配备原则,当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。,个体防护的配备原则,BSL3实验室除符合BSL2的要求外，还应该符合下列条件：在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备（两层防护服，两层手套，生物安全专业防护口罩）。当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置、佩戴眼罩等。,个体防护的配备原则,工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服

4、。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。应配备应急药品。,个体防护的配备原则,在使用已被传染性物质污染的仪器时，需戴手套。在使用电话、计算机等设备进行文书工作前，必须脱掉手套。谨记不能带着手套离开BSL-3实验室。所有离开BSL-3实验室的物品必须正确消除污染，并放在干净的容器或袋子中。,个体防护的配备原则,BSL4实验室除符合BSL3的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中所有感染性材料的操作，都必须在III级生物安全柜中进行。如果工作人员穿着整体的由生命维持系统供气的正压工作服，

5、则相关操作可在II级B型生物安全柜中进行。所有工作人员进入BSL4实验室时都必须换上全套实验室服装，包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等。所有这些实验室保护服在淋浴和离开实验室前均必须在更衣室内脱下。,个体防护的配备原则,在危害评估的基础上使用个体防护设备。室内有传染性灵长类动物或与灵长类动物接触时应考虑其粘膜暴露对人的感染危险，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。,个体防护的配备原则,进行容易产生高危险气溶胶的操作时，包括对感染动物和鸡胚的尸体、体液的收集和动物鼻腔接种，都要同时使用生物安全柜或其它物理防护设备和个人防护器具（例如口罩和面罩）当不能

6、安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。,注意事项,1、个人防护用品应符合国家规定的有关标准 2、在危害评估的基础上，按不同级别的防护要 求选择适当的个人防护装备 3、对个人防护装备的选择、使用、维护应有明 确的书面规定、程序和使用指导 4、使用前应仔细检查，不使用标志不清、破损 或泄漏的防护用品,（一）眼睛防护装备,1、安全眼镜和护目镜 A）在所有易发生潜在眼睛损伤（物理、化学和生物因素引起）的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施 B）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度。建议：工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐型眼镜 不得戴眼镜防护装备离开

7、实验室区域！,眼睛防护装备,a、安全镜 大多数情况,佩戴侧面带有护罩的安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害.,佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目的。当在进行有可能,b、安全护目镜,只有在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，必须佩戴护目镜。,d.眼镜配戴和卸下方法示意图,对某些特殊的操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时佩戴安全眼镜是不够安全的！1）用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿、碾磨物品.2）或在使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害（例如在压力或温度突然增加或降低的情况下）的实验室操作时。-在这些情况下，有必要保护整个面部和喉部，应该佩戴面罩。,眼睛防护装

8、备,2、洗眼装置 如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。事后必须立即填写事故报告单并立即报告主管领导。,（二）淋浴装置和应急消毒喷淋装置,1、规定：-BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置-BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。2、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋 装置的摆放位置、培训其操作方法。,-应急消毒喷淋装置 在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使

9、用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导,（三）头面部防护装备,口罩 普通口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染 适用于-BSL-1或BSL-2实验室中使用,一般在使用时可同时佩戴面罩，以组合使用的方法 保护整个面部,单独使用不能对工作人员提供呼吸保护。,正确佩戴和卸下外科口罩示意图,防护面罩,一次性面罩,一次性简易防护帽,防护帽,在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。,要求：工作人员在实验操作时应佩带防护帽,无纺布制成的一次性简易防护,（四）呼吸防护装备,1、当实验室操

10、作不能安全有效的将气溶胶限定在一定的范围内 要求使用呼吸防护装备。2、呼吸防护的有效装备-防护面具（正压面罩、个人呼吸器和正压防护服）使用：1、在进行高度危险性的操作（清理溢出的感染性物质和气溶胶）时，可以采用防护面具来进行防护。2、根据危险类型来选择防护面具。,一次性防护面具,一次性防护面具,特点：1、在防毒面具中装有一种可更换的过滤器，它可以保护佩戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物及气溶胶损害的影响。2、过滤器必须与防毒面具的正确类型相配套。3、为了达到理想的防护效果，每一个防毒面具都应与操作者的面部相吻合。,正压防护服,使用中的全罩式防毒具,正压面罩,头盔式正压呼吸防护系统,正确佩戴一次性

11、防护面具,使用要点：（1）佩戴时选择合适和合格的防护面具（2）遮盖住鼻子、口和下颚（3）用橡皮筋（松紧带）固定在头部（4）调整在合适的面部位置并加以检验（5）吸气时防毒面具应该有塌陷状（6）呼气时在面具周围不应该漏气,卸下口罩时：首先提起面具下方橡皮筋（松紧带）越过头部，然后提起面具上方橡皮筋（松紧带）使面具脱离面部，值得注意的是：一次性防毒面具使用完毕后应先消毒再丢弃,卸下一次性防护面具,（六）手部防护装备 手套,1、手套应在实验室工作时使用。2、在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造

12、成的损害。3、手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。4、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。5、对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训。6、一次性手套不得重复使用,必须先消毒后丢弃。,规范使用手套的几个要点：手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护 手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，将其浸入水中观察是否有汽泡来检查手套的质量 聚氯乙烯手套,乳胶手套,聚脂手套,3、手套的使用：a

13、）一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1和BSL-2实验室)b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-3实验室）应 佩戴两副手套。c）在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服衣袖。,4、手套的清洗和更换：a)使用一次性手套，不可重复使用。用后立即进行高压灭菌 消毒然后丢弃。b)不得戴着手套离开实验室区域.C)工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜之前,应 该脱去外层手套丢入生物安全柜内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套，以避免污染门捏手、电灯开关、电

14、话等（BSL-2和BSL-3实验室）。,5、避免手套“触摸污染”a)戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）b)避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏手等c)如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部d)注意尽量不去触摸工作台面和其他物品,戴手套注意要点:1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部。,脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下该手套使其

15、内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。,洗手,根据(GB 19489-2004）要求:1、应该安装洗手装置，该装置可以是脚控或红外控制 的洗手池，或者配置一个酒精擦手器。2、洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常 洗手。a）在处理活体病原材料或动物等生物危害物质后，b）在脱去手套之后和离开实验室之前，c）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时，洗手后再继续脱卸其他个人防护设备之前。洗手一般用肥皂和水或使用酒精擦手器。,（五）身体防护装备,防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服

16、应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁 5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换6、离开实验室区域之前应脱去防护服。,实验服,隔离衣,连体防护,实验服（BSL-1 实验室）-前面应该能完全扣住隔离衣和连体衣（BSL-2和BSL-3实验室）-比实验服将更适合于在微生物实验室以及生物安全柜中的操作工作。当有可能发生危险物质（血液或培养液等化学或生物危害物质喷溅）到工作人员身上时，应该在实验服或隔离衣外面再穿上塑料高颈保护的围裙。禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙,.隔离衣穿戴方式,隔离衣,解开颈和腰部的系带，将隔离衣从颈处和肩处脱下

17、。把外面污染面卷向里面，将其折叠或卷成包裹状。丢弃在消毒箱内,隔离衣脱去方式,正压防护服：（BSL-4实验室）1、具有生命支持系统（提供超量清洁呼吸气体的正压供气装置,内气压相对周围环境为持续正压）2、正压防护服的生命支持系统（内置式和外置式）一般在BSL-4实验室中使用（如埃博拉病毒等）,(六）足部防护装置,当实验室中存在物理、化学和生物危险因 子的情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套。可以防止实验人员足部（鞋袜）避免受到 损伤。BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋。禁止在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋、露趾和机织物鞋面的鞋。,使用方法示意图,

18、靴套使用方法示意图,鞋套使用方法示意图,(七)听力防护装备,御寒式防噪音耳罩,一次性防噪音耳塞,穿戴个人防护装备的顺序,戴口罩戴帽子穿防护服戴防护眼镜穿鞋套戴手套,脱卸个人防护装备的顺序,外层手套防护眼镜隔离衣口罩和防护帽鞋套内层手套,从事病原微生物操作遵循原则,、所有操作人员必须经过培训，通过考核，获得上岗证书。、对所从事的病原微生物及相关操作进行危险评估并制定防护措施。、熟悉实验室运行规则，正确操作和使用仪器和设备。、掌握各种感染性物质操作准则和技术要点。,病原微生物实验室的生物危险,气溶胶(aerosol)：固体或和液体微粒稳定地悬浮于气体介质中形成的分散体系，粒径一般为0.001100

19、m。微生物气溶胶(microbial aerosol)：微粒中含有微生物。感染性气溶胶(infectious aerosol)：微粒中含有致病微生物。飞沫(droplet)：由于动物打喷嚏、咳嗽和呜叫等产生的以唾液、粘液和微生物等为主要成分的气溶胶。飞沫核(deoplet core)：当飞沫中的水分蒸发后剩余的粘液蛋白和微生物等。飞沫有90以上的直径小于5m，飞沫核的直径一般为12m，均能长期飘浮在空气中，是引起动物疾病传播的重要途径。,气溶胶粒子的大小不同，经呼吸道到达体内的深度和归宿不同,粒径10m，一般被阻留在鼻腔内；510m，可到达支气管；5m，可进入细支气管和肺泡。气溶胶粒子越小，进

20、入的部位就越深：1m的在肺泡内沉积率最高；0.4m的粒子能较自由地进出肺泡并可随呼气排出体外，沉积较少。,实验室中有可能产生微生物气溶胶的操作,离心 组织研磨 混合培养液 真空抽滤 使用匀浆器、摇床和超声处理器（推荐使用塑料容器）,实验室中有可能产生微生物气溶胶,打开装有冻干物的安瓿管 收集微生物培养物 热的接种环放在菌液或菌苔上（推荐使用一次性接种环）在玻璃片上做触酶试验（推荐使用试管和毛细管等法）液体从吸管掉落到工作台面上 从吸管中将最后一滴液体吹出（推荐使用不需要吹出最后一滴液体的移液管）用移液管反复吹吸混合 磨口瓶子打开瓶塞时（推荐使用螺口瓶）快速地脱实验服,生物安全实验室运行规范,基

21、础实验室：BSL-1和BSL-2准入规定安全操作规程实验室工作区管理原则生物安全管理指导原则,准入规定,1.实验室的门应保持关闭。2.只有经过批准的人员方可进入实验室工作区域。3.BSL-2级和以上级别实验室房间门上应标有国 际通用的生物危害警告标志。4.进入动物房应当经过特别批准。5.应在实验室内外清楚地张贴“禁止吸烟”、“禁止 进食”和“禁止喝水”的标志。,安全操作规程,1.严禁用口吸移液管。2.严禁将实验材料置于口内，严禁舔标签。3.所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和液滴形成的方式来进行。生成气溶胶的可能性增大时，应在生物安全柜中进行操作。,安全操作规程,4.应限制使用注射针和注射器。除

22、了进行动物注射或抽取动物血液等，注射针和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。5.出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室主管报告。实验室应保存这些事件或事故的书面报告。6.必须制定关于如何处理溢出物的书面操作规程，并遵守执行。,实验室工作区管理原则,1.实验室应保持干净整洁，和实验无关的物品严禁摆放在内。2.发生具有潜在危险性的材料溢出，以及在每天工作结束之 后，都必须要消毒工作台面。3.所有受到污染的材料、样品和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须消毒。4.在进行包装和转运时必须要遵循国家和/或国际的相关规定。5.如果窗户可以打开，则应安装可防止节肢动物进入的纱窗。,生

23、物安全管理指导原则,1.实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制定和采用生物安全管理计划、安全或操作手册。2.实验室主管应当保证提供常规的实验室安全培训。3.要将生物安全实验室的特殊危害告知实验人员，同时要求他们熟读生物安全或操作手册，并遵循标准的操作和规程。实验室内应备有安全或操作手册。,生物安全管理指导原则,4.在适当的情况下，应制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。5.如需要，应当为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗，应当保存相应的医学资料。6.对于实验室人员和其他存在危险的人员，应当采集本底血清样品，同时按照国家和地方的相关规定加以适当保存。根据所操作的微生物和实验室的运行情况

24、，可定期收集其他样品。,3级生物安全实验室(BSL-3)：BSL-3操作规程,1.满足基础实验室的各项操作规程。2.实行双人工作制，任何情况下严禁单独在实验室内工作。3.实验室门上张贴国际通用的生物危害警告标志，并注明所操作的微生物、管理实验室出入的负责人姓名以及进入该区域的所有特殊条件，如人员免疫情况等。,3级生物安全实验室(BSL-3)：BSL-3操作规程,4.实验室防护服必须是正面加固的或 反背式的、洗净的、连体的、带帽 的隔离衣，穿着鞋套或专用鞋。前 系扣式的标准实验服不适用。实验 室防护服不能穿离实验室，且必须 在清除污染后清洗。5.适当时，在有感染性动物的房间内 必须佩戴呼吸防护装备。6.在生物安全柜的工作台面上最好铺 上带有塑料背衬的纸，以方便清理。,感染性材料的操作与防护规范,一、实验室内标本的安全操作标本容器标本运输标本接收包装的打开,感染性材料的操作与防护规范,二、避免感染性物质扩散的要领 正确使用接种环 避免气溶胶的产生 废弃物品放在防渗漏容器，高压消毒 实验室定期终末消毒,感染性材料的操作防护规范,三、避免感染性物质的吸入、接触和接种的规范四、血清分离的实验技术规范五、冻干感染性物质安瓿的技术储藏规范,感染性材料的操作防护规范,六、对血液、体液、组织和排泄物的防护规范 标本的收集 用于显微观察的涂片操作 组织标本的操作 消毒,谢谢！,