验研究的设计及实施中应注意的问题.ppt
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1、2023/8/8,1,药理实验研究的设计及实施中应注意的问题,2023/8/8,2,药理实验研究中,为避免今后不出现不必要的麻烦,应该充分考虑以下几方面的问题:(一)确定目标和撰写好开题报告(二)实验方法与观察指标的选定原则(三)动物实验和实验动物的基本要求(四)掌握实验设计中重复、对照、随机的原则(五)作好预实验(六)实验记录中的问题(七)撰写好论文的要点,2023/8/8,3,(一)确定目标和撰写开题报告的重要性:1.目标 进行实验设计时,首先必须明确实验研究的目标(这一目标必须集前沿性、开创性、实用性和可行性为一体)。然后,始终围绕这一目标来设计实验,切忌目标不明、贪大求全、胸中无数。大
2、量阅读文献,始终做到胸中始终有数、有的放矢。,2023/8/8,4,要明确科学研究的目的是:形成和证实予期的结论(假说),并形成进一步研究的新框架,而不是简单的收集数据。如果没有结论,数据何用?同时,你还得把所获得的结论让别人接受,并传授给别人。所以,目标和结论始终是科研工作的核心。必须始终要有明确的目标,这对于开展你的研究工作是大有益处。,2023/8/8,5,所以研究中:开始时,应有目标和完善的计划;工作结束时,应有充分的总结。但最有效率的做法是:在实验中,始终围绕目标,并及时地、不断地分析、总结。并可以随时调整实验目标,而不是等到实验完成时,才开始收集、整理数据和总结。,2023/8/8
3、,6,2.开题报告的撰写:开题报告的重要性 开题报告是研究的计划及论文的提纲,应十分重视,不应掉以轻心。开题报告不仅仅要列出各分题研究的内容,而是应按照实验研究的目的、假说、结论来精心组织。,2023/8/8,7,分成三大类:(1)引言:为什么我要做这件工作?别人巳作了哪些工作?我的主要的目的和假设是什么?(2)结果和讨论:结果可能是什么?实验和测试方法是什么?(3)结论:我所作的一切意味着什么?是否能证实或否定了什么假设?我的结论可能是什么?结果与他人不同之处何在(价值)?接下来,把每一部分再仔细组织,尽可能以 清晰、紧凑的流程图或图表来展示。,2023/8/8,8,另外须注意:如果在实验进
4、行中,你发现你得到的数据似乎可以更好的验证其他假设时,也不必担心,把它们都作出来后,再进行假设、目的和数据的其它组合。有时,当一篇论文完成时,它的目的和开始时已完全不同了。,2023/8/8,9,(二)实验方法与观察指标选定原则 1.观察指标要有专一性和可靠性,能反映被研究问题的本质:例如:用实体瘤筛选抗癌药,常以瘤重量变化作指标;而用腹水癌筛选时,则常以动物存活日期、腹水、癌细胞数作指标。又例如:动脉血压,在研究抗高血压药时,它是个特异性药理指标;但研究治疗急性肾炎的药时,则并非所有急性肾炎病人特异性指标(约20、30病例血压不升高),而应选择尿常规和肾功能等作为重点指标。,2023/8/8
5、,10,2.观察指标必须尽量是可用客观方法定性、定量地测量的:如血压、血糖、心率、血细胞数目、体重等都是客观准确的定量数据,应尽量多用。而抑郁、愉快、麻木、头昏、疼痛等主观感觉,应尽量少用。,2023/8/8,11,(三)动物实验和实验动物要求:1.动物实验的基本要求:当前,动物实验和实验动物都要求达到实验室操作规范(good laboratory practice,GLP)和标准操作程序(standard operating procedure,SOP)。即对实验动物、实验室的条件、工作人员的素质、技术水平、操作方法,都要求标准化和规范化。,2023/8/8,12,2.国际动物实验工作的新要
6、求(3R)要求:Reduction(减少):是指应尽量减少实验用动物数和实验的次数。Replacement(替代):是指尽可能采用其它的方法替代动物实验,如用细胞组织培养、物理、化学等方法代替实验动物的使用。Refinement(优化):是指对待实验动物和动物实验的工作,应尽量做到尽善尽美。,2023/8/8,13,3.微生物学和寄生虫学标准:要求选用三级实验动物:排除人兽共患病 排除实验动物本身的传染病,排除影响实验研究的相应微生物和寄生虫 使实验研究始终没有或很少有外源干扰,以有 利于实验获得可靠的数据。,2023/8/8,14,4.从实验有效性来选择实验动物:应选择合适的实验动物进行实验
7、,才能证明其阳性存在的有效性。因不同种类的动物对同一药物的反应,一般是相似的;但有的不仅有量的差异,甚至还可有质的不同。如组胺对狗,猫等可使血压;而对家兔则可使血压。因此一个药物的研究往往需要应多用几种动物,其中至少应有一种哺乳类。,2023/8/8,15,又如以高胆固醇膳食饲喂鸡、鸽、猪、兔、狗、猴,均可以诱发的高脂血症或动脉粥样硬化。但家兔主动脉粥样硬化明显,而心肌冠状动脉只有粥样小斑块,只引起小灶性心肌梗塞。而猴、猪情况与人较类似,其心冠状动脉前降支可形成较大斑块,较易引起大片的心肌梗塞。所以一般应选择一种以上的实验动物进行实验,才能证明其阳性的普遍性。,2023/8/8,16,5.有了
8、实验结果还必须反复推敲:是偶然?还是必然的?还需进一验证或重复试验,结果才具有说服力,有依据。最后,动物实验的效果还须要要与人比较,是否接近于人?如猕猴和猩猩都是灵长类,猩猩是猩猩属,猕猴是猕猴属;而人是人科人属。但因猩猩和猴在解剖学上、组织器官功能上、白细胞抗原上、染色体带型上与人都比较相似。其试验结果一般是较有说服力的。其它动物就不一定了。,2023/8/8,17,6.动物的年龄、性别、机能状态及生活环境:应根据实验目的要求,选择和安排动物,使实验更符合临床要求。如抗前列腺肥大药应选老年动物 避孕药应选性成熟的动物等 即符合代表性的原则,2023/8/8,18,7.其它因素:如动物性别、年
9、龄、体重、营养状况、饲养环境、饲养人员的素质和责任心等都可影响实验结果。,2023/8/8,19,三.各种动物或标本的特点:(一)小鼠:小鼠个体小,饲养管理方便,生产繁殖快,质量控制严格,价廉可以大量供应。全世界科研工作者均采用国际公认的品系的小鼠和按标准的条件进行试验,其实验结果的科学性、可靠性、可重复性均较高,易得到国际认可。因此,小鼠被广泛应用于种类科研实验中,其用量最大,用途最广。,2023/8/8,20,药品的药理学试验的初筛,药物的实验治疗等,一般可选用小鼠。毒理学试验:包括急性、亚急性和慢性毒性试验、三致(致癌、致畸、致突变)试验、LD50测定等都可选用小鼠和大鼠。,2023/8
10、/8,21,二、大鼠:也是医学上最常用的实验动物之一,价格较廉,可以大量供应。其用量仅次于小鼠,大鼠体型比小鼠大,且已育成近交系,突变系和封闭群。它们还可用于生物学和遗传学特性研究。,2023/8/8,22,生理学研究:大鼠可用于垂体、肾上腺系统的研究。利用手术摘除某些内分泌器官,可以了解各腺体的作用和它们之间的互相关系。也可用作生殖生理、胚胎学、畸胎学的模型动物。大鼠无胆囊,胆管相对较粗大,可采用胆总管插管收集胆汁进行消化功能的研究。,2023/8/8,hujinguan,23,药理学和毒理学研究:常用的高血压大鼠(SHR)和中风型(SHRSP)大鼠,作心血管药物药理和药物筛选。大鼠还可作长
11、期毒理学试验研究。大鼠还可用于核医学、计划生育、胃溃疡、中毒性肝炎、肝坏死、肝硬化、实验性腹水、关节炎和老年病学、龋齿、慢性支气管炎等疾病的实验模型。,2023/8/8,24,三、兔:免疫学研究:由于抗原刺激机体后,体液免疫应答反应强烈,因此,家兔被广泛应用于制备高效价、特异性强的免疫血清。毒理学实验:利用家兔的皮肤和眼睛对化学试剂的敏感反应做化妆品、致畸因子的研究。,2023/8/8,25,生殖生理和避孕药的研究:家兔可诱发排卵,所以能准确地计算排卵时间,获得不同时间的胚胎学资料。眼科研究:新西兰兔中出现的遗传性青光眼,是很好的青光眼模型,为研究人的青光眼发病及治疗提供了理想的实验动物。也用
12、于角膜瘢痕和角膜移植研究。,2023/8/8,26,心血管疾病研究:家兔实验性动脉粥样硬化是20世纪初形成的模型,沿用至今。家兔可形成高血脂症、弥漫性血管内凝血、急性循环障碍、心肌梗塞、心律失常、高血压、肺原性心脏病、慢性肺动脉高压、肺心病和一过性高血压等模型。热原试验:SPF家兔对热原物质反应灵敏。常规应用于制药和药检部门检查制品的热原性。,2023/8/8,27,四、豚鼠:感染和变态反应试验:豚鼠与人肾上腺分泌产物的效应反应相似;与人的补体系统几乎可以相互转变,皮肤的迟缓过敏反应,过敏反应,皮质醇的主要成分为糖皮质激素均与人近似。豚鼠还可作许多传染病试验。如布鲁氏杆菌、炭疽杆菌、结核分枝杆
13、菌、假结核杆菌、鼠疫杆菌试验。,2023/8/8,28,维生素C的研究:豚鼠体内不能合成维生素C,当饲料缺乏维生素C时则出现坏血病。豚鼠可作为这方面的模型用于实验研究。听力试验:豚鼠的耳蜗对声音很敏感,可用于如链霉素毒性试验。,2023/8/8,29,五、狗:实验外科学研究:狗主要应用于实验外科学研究,临床医学在研究探索新的手术或麻醉方法时,如心血管外科、胸外科、断肢再植、器官和组织移植等等,常须首先选用狗作动物实验,取得经验与技巧以后才试用于临床。药理、毒理学研究:狗可选用于各种化学物品及药品的临床前毒理学实验。,2023/8/8,30,六、猫:猫的用量相对较少,主要应用于以下几个方面的研究
14、工作。生理学研究:猫具有极为敏感的神经系统,头盖骨和脑的形状固定,是脑神经生理学研究的较好实验动物。药理学研究:猫可用于脑室灌流研究药物的作用部位,药物通过血脑屏障的机理和过程。猫血压稳定,血管壁韧,心搏力强,便于手术操作,能描记出完好的曲线 故猫适用于进行药物对血液循环系统作用机理的分析研究等。,2023/8/8,31,七、灵长类:灵长类和人类的分类学地位最为接近,在形态和功能上有很多与人相似之处,因此是生物医学研究中的最佳模型。生理学研究:用于脑功能、血液循环、呼吸生理、生殖生理、内分泌及老年医学方面的研究。,2023/8/8,32,传染病和疫苗的研制:某些灵长类动物可感染人类所特有的传染
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