【教学课件】第十四章唾液(斑)检验.ppt
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1、第十四章 唾液(斑)检验,一、唾液(斑)的特点唾液来源:唾液腺的分泌物-腮 腺、颌下腺、舌下腺、小唾液腺 浆液 粘 液唾液成分:水分占99.4%,有机物-粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、麦芽糖酶、血型物质 无机物-钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐 其余为固形物(口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣)唾液性状:无色、无味、接近中性(ph6.6-7.1),低渗粘蛋白多的时候 呈粘液状,粘蛋白少的时候较稀薄唾液分泌:L。,一、唾液(斑)的证明淀粉酶+口腔黏膜上皮细胞理由:唾液中含有大量的淀粉酶,是进行唾液斑斑痕种类鉴定的依据之一,但淀粉酶分布极广(人类粪便、几乎所有的植物、
2、真菌等都含有淀粉酶、人体的其他分泌液液含少量的淀粉酶),单纯检出淀粉酶不能确定唾液斑。方法:淀粉酶检测:淀粉+碘-蓝色(-)不含淀粉酶 淀粉酶(检材)糖+碘-无色(+)可能是唾液+碱性铜-棕红色沉淀 证明糖的存在 上皮细胞:检材离心-涂片-HE染色 如果检出食物残渣,更支持是唾液斑的检测结论,三、唾液斑的遗传标记检测ABO血型-漱口,自然流出唾液置于干净容器,水浴中煮沸10min。灭火血型分解酶 分 泌 型人的唾液斑-中和试验测定ABO血型 非分泌型人的唾液斑-酶标抗体免疫测定的方法蛋白/酶型-可以用特殊的双环杯提取腮腺液 多态性蛋白 Pa腮腺酸性蛋白 Pb 腮腺碱性蛋白 Pn腮腺中性蛋白 P
3、m 腮腺中带蛋白 Ph腮腺重蛋白 Pr 唾液富含脯氨酸蛋白 Db唾液双带蛋白 GL 唾液糖蛋白、多态性酶 唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液过氧化物酶等DNA分析-唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞-提取DNA-基因组DNA/线粒体DNA 唾 液:漱口水或口腔式子,提取DNA 唾液斑:烟蒂(注意:取有唾液的部分进行DNA提取),四、唾液(斑)的性别鉴定分子杂交-男性特有的Y染色体DNA片断作为探针检测性别 特异性高、但费时耗力、对DNA的含量及其完整性要求较高PCR技术-性染色体特异性片断-片断的有无 性染色体同源性片断-片断的数目 ZFP-锌指状蛋白基因:5ZFYX+3ZFY/ZFX,男340,女488 AMG-牙釉质蛋白基因:根据碱基缺失部位两侧的同源序列设计引物,
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