《溶菌酶的作用机制》PPT课件.ppt
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1、Determing the Mechanism of Lysozyme Action,溶菌酶的作用机制制作:靳晶,溶菌酶是如何被发现的?,亚历山大弗莱明(Alexander Fleming),1881年8月6日出生于苏格兰艾尔郡洛奇菲尔德。他是苏格兰低地农民的后裔,家境贫寒。因发现了青霉素以及它对多种传染性疾病的治疗作用,荣获1945年诺贝尔生理学或医学奖。,1922年的一天,正在感冒的英国细菌学家Alexander Fleming发现,把一些鼻粘液加入细菌的培养基后会引起细胞的溶解。而这种存在于鼻粘液中的能杀死细菌的重要物质被认为是一种酶,Fleming命名其为溶菌酶(Lysozyme)。,
2、起初,Fleming对这种有杀死细菌活性的物质的实验不过是出于一种兴趣。但在目睹了一战中大量的士兵死于外伤感染之后,Fleming开始试图倾其毕生来寻找一种能够有效杀死细菌,同时又能对人类保持相对的无毒性的药剂。不象Fleming在1928年发现的青霉素(penicillin),溶菌酶不能证明有临床价值。但是在酶机制的研究学习方面,溶菌酶扮演了一个很重要的角色。,在1965年,David Phillips和他在牛津的同事以0.2nm分辨率的X射线晶体(X-ray crystallography)结构分析法阐明了溶菌酶的三维结构(tertiary structure)。,溶菌酶是从鸡蛋清中提炼的
3、,蛋清里的溶菌酶可以保护胚胎在发育过程中免受细菌的感染。溶菌酶溶解细菌是通过水解细菌细胞壁多糖(the polysaccharide of the bacterial cell wall)的糖苷键(glycosidic bonds)。,而敏感细菌革兰氏阳性细菌(gram-positive bacteria)的细胞壁多糖是N-乙酰氨基葡糖(N-acetylglucosamine,NAG)-N-乙酰氨基葡糖乳酸(N-acetylmuramic acid,NAM)的共聚物,其中的NAG及NAM通过-1,4糖苷键而交替排列。,溶菌酶相对分子质量为14.6X103,由129个氨基酸组成的单肽链蛋白质,含
4、有4对二硫键。溶菌酶分子近椭圆形,大小为。它的构象比较复杂,螺旋仅占25%,在分子的一些区域有伸展着的片层构象。,溶菌酶是一种葡糖苷酶,能催化水解NAM的C1和NAG的C4之间的糖苷键,但不能水解NAG C1和NAM C4之间的(1-4)糖苷键。几丁质是甲壳类动物甲壳中所含的多糖,仅由NAG残基通过(1-4)糖苷键连接而成,几丁质也是溶菌酶的底物。,溶菌酶的内部几乎全部是非极性的(nonpolar)。疏水的相互作用在溶菌酶的折叠构象中起重要作用。在溶菌酶分子的表面,有一个比较深的裂缝,其大小恰好能容纳多糖底物的6个单糖,这是溶菌酶的活性部位。,底物与酶结合后,酶催化哪一个键水解呢?,用大小不同
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