《培菌员岗位培训》PPT课件.ppt

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1、培菌员岗位培训,培训目的,目录,丙烯腈水合酶生产菌生长规律,延迟期,丙烯腈水合酶生产菌生长规律,细胞个数,生长速率,培养时间（hr）,延迟期,对数期,丙烯腈水合酶生产菌生长规律,细胞个数,生长速率,培养时间（hr）,延迟期,对数期,稳定期,丙烯腈水合酶生产菌生长规律,细胞个数,生长速率,培养时间（hr）,延迟期,对数期,稳定期,丙烯腈水合酶生产菌生长规律,生长规律在发酵培养应用,生物量,酶活性,发酵培养周期,在丙烯腈水合酶的发酵培养周期内，对数期生物量迅速增加，在后续生长阶段趋于稳定；水合酶在稳定期内大量积累，检测酶活性迅速上升并达到最大值。,发酵培养应避免衰亡期的出现，作为以丙烯晴水合酶为最

2、终产物的发酵培养过程，在稳定期检测培养基内合成水合酶的营养物质消耗殆尽，菌体酶活趋于稳定时为最佳发酵培养终止点。,菌种筛选意义,自然分离筛选原理,变异后性状劣于母代,保留母代基本遗传性状,变异后性状优于母代,自然分离筛选原理,对正变菌种再次传代培养，通过对二代的检测将遗传稳定性好的菌种挑选出来,对筛选对象进行自然传代培养，并通过检测手段将子代中出现的正变菌种挑选出来,出发菌种,性状检测,传代培养,传代培养,对象分离,单菌株,一代菌种,二代菌种,性状检测,保藏备用,稀释倍数106108,试管斜面固体培养281 120hr,试管斜面固体培养281 120hr,确保菌种优良性状,确保菌种遗传稳定,自

3、然分离筛选流程,纯种培养的意义,在菌种纯种培养过程中所用的玻璃器皿、接种工具、用品必须包扎好后，经高压蒸汽灭菌后方可使用（灭菌条件0.11MP、30min）。,培养基必须经高压蒸汽灭菌，并检测无杂菌后方可使用（灭菌条件0.11MP、20min）。,无菌操作室经紫外线照射、喷洒药物灭菌，定期无菌检测达标后，方可进行接种操作。,所有接种操作必须在无菌操作台内、高温火焰保护下的无菌区域内，严格按照无菌操作规定进行。,纯种培养基本要点,操作无菌注意事项,添加标题,操作过程中严禁用手触摸无菌器皿内表面及开口处。,添加标题,接种前后，玻璃器皿用酒精棉擦拭，瓶口及瓶塞必须经火焰灭菌。,操作前必须穿戴无菌衣、

4、无菌口罩、无菌鞋；75%酒精洁净双手。,移种操作在酒精火焰无菌区域内进行（外焰周围1cm、顶端3cm）。,本章小结,思考题,相关概念,工业生产上笼统地把一切依靠微生物的生命活动而实现的工业生产均称为“发酵”。我厂发酵生产就是利用能合成催化丙烯腈水合反应的水合酶的特种细菌细胞（称为丙烯腈水合酶生产菌），控制其在适宜条件下繁殖增长，并在细胞内大量生成、积累水合酶的工业生产过程。,什么是发酵？,相关概念,优质菌种,相关概念,从培养器中取一部分细胞，移至新的培养器中再次进行培养的过程。,是指生物在传代过程中表现出的亲代与子代的相似现象。,是指生物在传代过程中表现出亲代与子代之间的差别。,相关概念,只在单一种类存在的状态下所进行的生物培养。,在微生物纯种培养过程中出现的与培养菌种不同的其他菌种,称为杂菌。,在发酵培养过程中由于控制不当使培养体系内引入杂菌的现象。,纯种培养,染菌,杂菌,纯种培养设施,无菌室,无菌操作台,酒精火焰,