《mRNA到蛋白质》PPT课件.ppt

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1、第四章 生物信息的传递（下）从mRNA到蛋白质,本章节主要内容,一、遗传密码二、蛋白质的生物合成三、蛋白质前体的加工四、蛋白质跨膜转运机制五、蛋白质的一级结构六、蛋白质的空间结构七、蛋白质的变性与复性（蛋白质的折叠机制）,丝氨酸,酪氨酸,一、遗传密码,（一）三联子密码定义 mRNA链上每三个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核甘酸就称为密码子或三联子密码(triplet coden)。,mRNA 5 GCU AGU ACA AAA CCU 3,（二）三联子密码破译,核甘酸序列,氨基酸序列,至1966年，20种氨基酸对应的61个密码子和三个终止密码子全部被查清。,遗传密码的破译，即确

2、定代表每种氨基酸的具体密码。,（三）遗传密码的性质,1、简并性,由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并（degeneracy），对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子（synonymous codon）。,减少了变异对生物的影响,编码某一氨基酸的密码子越多，该氨基酸在蛋白质中出现的频率就越高。Arg精氨酸例外,2、普遍性与特殊性,蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。,线粒体与核DNA密码子使用情况的比较,3、连续性,编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码间既无间断也无交叉。,基因损伤引起mRNA阅读框架内的

3、碱基发生插入或缺失，可能导致框移突变(frameshift mutation)。,从mRNA 5端起始密码子AUG到3端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame,ORF)。,4、摆动性,在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，这种现象称为密码子的摆动性。,U,摆动配对,密码子、反密码子配对的摆动现象,二、蛋白质的生物合成,1氨基酸的活化,原核生物中，起始氨基酸是：起始AA-tRNA是：真核生物中，起始氨基酸是：起始AA-tRNA是：,甲酰甲硫氨酸fMet

4、-tRNAfMet甲硫氨酸Met-tRNAMet,第一步反应,氨基酸 ATP-E 氨基酰-AMP-E AMP PPi,目 录,第二步反应,氨基酰-AMP-E tRNA 氨基酰-tRNA AMP E,tRNA与酶结合的模型,tRNA,氨基酰-tRNA合成酶,ATP,2肽链的起始：原核30S小亚基先与mRNA结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合；真核40S小亚基先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合。均需要ATP供能，Mg2+；起始位点是AUG。,起始因子：原核生物有三种起始因子IF-1：促进IF-2及IF-3的活性。IF-2：使

5、fMet-tRNAfMet有选择地与30S结合。IF-3:促进mRNA与30S结合及保持30S亚基稳定性的作用。,真核生物的起始因子大概有10种eIF-4(CBP)：帽子结合蛋白，识别帽子结构。eIF-1、eIF-2、eIF-3：与40S小亚基结合,3肽链的延伸和终止：合成的方向是N端到C端。终止密码子UAGUAAUGA。释放因子（RF）促成终止。原核生物释放因子：RF1，RF2，RF3。真核生物释放因子eRF。,三、蛋白质前体的加工,N端fMet或Met的切除二硫键的形成特定氨基酸的修饰切除新生肽链中非功能片段多聚体构成的蛋白质还要经过聚合过程。,四、蛋白质跨膜转运机制,1、信号假设：在蛋白

6、质合成过程中N端有1536个氨基酸残基的肽段-信号肽，他能引导蛋白质的肽链到达并通过内质网。然后被内质网中的信号肽酶切除，成熟蛋白质N端并无信号肽。,2、信号识别颗粒：在胞液中有一种信号识别颗粒（SRP），含有300个核苷酸的7S小分子RNA（小胞浆scRNA）及6种蛋白质的核糖核蛋白，在信号肽出现后，能识别并结合信号肽及核糖体，使翻译暂停，并与膜上的SRP受体蛋白（停靠蛋白）结合，引导肽链跨膜转运。,伴侣蛋白,经过跨膜转运进入内质网的肽链，在折叠过程中是在蛋白伴侣（chaperones)或称分子伴侣（molecular chaperones)辅助下完成的，起到介导各种功能域乃至整个蛋白质分子

7、的折叠。辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。,五、蛋白质的一级结构,1、蛋白质一级结构的测定 分离出某蛋白质的mRNA，逆转录生成cDNA,测定此cDNA的碱基序列。先测定出该蛋白质氨基末端约25个氨基酸残基的序列，制成DNA探针，探测出互补DNA，经PCR扩增再测定其碱基序列。,2、蛋白质家族来自同一祖先蛋白质，随着进化而分化为不同功能特征的同源蛋白质。氨基酸组成相同大于50%的属于同一家族蛋白质，小于50%称为超家族蛋白质。,六、蛋白质的空间结构,蛋白质的生物学活性和理化性质主要决定于空间结构（构象）是指蛋白质的二级、三级和四级结构。,1、蛋白质的二级结构,（1）螺旋：含螺旋丰富的蛋白质结构紧

8、密而稳定少变，故蛋白质的功能区常不在螺旋区而在其邻近。,（2）折叠：富含折叠的蛋白质的稳定性较差而易变，常与蛋白质的生物功能有关。,（3）转角：肽链走向的多次逆转，主要是通过-转角来实现的，可使肽链出现1800回折。,2、蛋白质的三级结构,（1）超二级结构：-螺旋与-折叠组成的特殊结构模块，此种确定的折叠类型称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。,、常见的三种类型,右手交叉连接 左手交叉连接,常见的标准折叠单位,（2）模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域，称之为模体（motif）。,Helix-Turn-

9、Helix motif,Helix-loop-helix motif,Zinc Finger motif,Leucine zipper dimer bound to DNA,Families of DNA binding proteins,蛋白质结合位点,3、蛋白质的四级结构,多数蛋白质是由多个亚基结合而完成其功能的，既可以是结构相同的亚基，也可以是不同结构的亚基聚合。,亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法 例如：合成一个6000氨基酸的蛋白质需要18000个bp,如果这个蛋白质是由六个相同的亚基装配而成的，仅3000个bp就够了。,蛋白质多亚基形式有以下优点,多亚基形式可以减少蛋白质合成过

10、程中随机的错误对蛋白质活性的影响。6000个氨基酸的蛋白质中插错了一个氨基酸，这个蛋白质可能尚失功能，如果此蛋白质是由六个亚基组成，每个亚基含1000个氨基酸，六个亚基之一有错，对他功能影响就要小得多。,多亚基蛋白质的活性能够非常有效地和非常迅速地被打开和被关闭。蛋白质通过亚基的解离阻止活性，通过聚合而恢复活性。这对蛋白质活性的调节上是十分方便和必要的。,七、蛋白质的变性与复性,变性：不涉及肽链一级结构断裂而各种次级键被破坏，导致蛋白质构象的变化。复性：重新恢复其天然构象的过程。,蛋白质折叠机制：根据蛋白质的复性过程，可以对其折叠机制有所了解。首先成核理论：Us Ii In N 成核 充实 重

11、排 天然蛋白质,成核：先形成螺旋及折叠片段,使变性蛋白质从无活性状态（Us）转变成部分折叠，产生二级结构但仍无活性的状态（Ii）。充实：从Ii进一步折叠，并具有活性，但仍存在着不正确异构体等的状态（In）。最后重排：产生天然蛋白质构象（N）。,本 章 习 题一、名词解释1、SD序列（Shino-Dalgarno sequence）2、简并密码子（degenerate codon）3、摆动（wobble）4、分子伴侣（chaperone）5、无义突变（nonsense mutation）6、中性突变（neurtal mutation）7、移码突变（frame shift mutation）8、回

12、复突变（reverse mutation）9、错义突变（missense mutation）10、模体（motif）,二、填空题1、原核生物起始tRNA是（），真核生物起始tRNA是（）。2、与mRNA密码子ACG相对应的反密码子是（）。,甲酰甲硫氨酰tRNA,甲硫氨酰tRNA,CGU,3、tRNA的反密码子为UGC，它识别的密码子为（）。4、一种氨基酸最多可以有（）个密码子，只有一个密码子的氨基酸是（）。,GCA,6,色氨酸,5、蛋白质合成，起始密码子是（），起始tRNA上的反密码子是（）。6、DNA的合成方向（），RNA的转录方向（），蛋白质合成方向()。,AUG,CAU,53,53,N端

13、C端,7、肽链合成的终止因子又称为（），能识别并结合到（）上。,释放因子,终止密码子,三、选择题1、蛋白质生物合成时（）。A原核30S小亚基先与fMet-tRNAfMet结合,再与mRNA结合B真核40S小亚基先与mRNA结合，再与Met-tRNAMet结合CtRNA与核糖体的大亚基结合,再与小亚基结合D真核40S小亚基先与Met-tRNAMet结合,再与mRNA结合2、反密码子IGC可以识别的密码子是（）。AGCG BGCA CACG DICG,D,B,3、有关蛋白质合成，下列哪条描述是错误的（）。A基本原料是20种氨基酸 B模板是mRNA C合成的方向是从羧基端到氨基端 D是一个多因子参加

14、的耗能过程4、参与原核生物肽链的起始因子是（）。AIF1 BRF1 CEF-Tu DRF25、真核生物识别帽子结构的起始因子是()AeRF BeIF1 CEF-Tu D eIF-4,C,A,D,6tRNA分子上结合氨基酸的序列是（）ACAA-3 BCCA-3 CAAC-3 DACA-3,B,7、Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指:（）A.在mRNA的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序B.在DNA上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序C.16srRNA3端富含嘧啶的互补顺序D.启动基因的顺序特征,A,8、“同工tRNA”是：()(A)识别同义mRNA密码子(具有第三碱基简并性)的多个tRNA(B)识别相同密码子的多个tRNA(C)代表相同氨基酸的多个tRNA(D)由相同的氨酰tRNA合成酶识别的多个tRNA,C,9、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)。（）（A）第个(B)第二个(C)第三个(D)第一个与第二个,A,四、问答题1、简述遗传密码子的基本特点？2、简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的异同？3、简述蛋白质翻译后的加工过程？4、简述蛋白质跨膜运输的机制？5、蛋白质多亚基形式有那些优点？,