《血小板检查》PPT课件.ppt

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1、血小板检查,检验系临检教研室 陈丽华,目的要求,掌握：血小板计数的原理、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义。重点:血小板计数难点:血小板形态,一、概述,（一）血小板的生成,造血多能干细胞,TPO调控,分化,原巨核细胞,促进巨核细胞祖细胞增殖、分化、成熟与释放plt 进入血液,Plt 2/3在循环血，其余贮存于脾。,（二）血小板的破坏,血小板的平均寿命为714天，具有止血功能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细胞破坏，主要在脾破坏。脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞留现象即“脾池化”，脾池中的血小板和循环池中的血小板可以互换。,（三）血小板检测

2、常用项目,1、血小板计数（PLT）:手工单项或血液分析仪多项检测2、血小板平均体积（MPV）3、血小板分布宽度(PDW)4、血小板比积(PCT),血液分析仪测,二、血小板计数（手工法）,（一）原理,将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数，计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏RBC,固定Pt并防止聚集。,（二）器材光学显微镜；血球计数板、Hb吸管、试管、采血针等。（三）试剂：下列试剂任选一种1.草酸铵稀释液：草酸铵1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸馏水加至100mL.首选试剂。2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤

3、冰箱保存。,（四）操作,1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL。2.取末梢血20L加入试管中，迅速摇匀。室温放置10分钟。3.充池，静置1015分钟。4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共5个中方格内的plt数。,（五）计算,血小板数/L=5个中方格内血小板数（N）51020106/L=5个中方格内血小板总数109/L（六）结果报告 PLT:109/L,（七）注意事项,1.全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防菌，以免计数时误认。2.针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。3.同时做多项检查时，优先采plt计数之血。4.充池前应充分摇匀，充池后需静置10分钟以上待plt全部下沉后再计数。1h

4、内完成。,（八）方法学平价,1.草酸铵法对RBC破坏力强，使视野清晰，plt形态清楚，是全国临床检验操作规程推荐方法。由于Plt体积小，易粘附、聚集及破坏等，结果不甚理想。2.复方尿素法优点是plt胀大易辨认，但不能完全溶解RBC，且尿素易分解，试剂保存时间短。,3.血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物，故计数误差大。当直方图出现变化时，应用显微镜计数法校准之。,4.流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色标记血小板，根据荧光强度和散射光强度，用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小板计数参考

5、方法。,5.相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立体感增强，有助于识别血小板，还可照相后核对计数结果，作为手工法血小板计数的参考方法。（九）参考值：（100300）109/L,（十）质量保证,原则是：避免血小板被激活、破坏，避免杂物污染。1.检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适，储存时间适当；2.检测中：手工法计数要定期检查稀释液质量，仪器法要质控合格；,3.检测后：（1）用同一份标本制备学血涂片染色精简观察血小板数量、大小、分布情况，并注意有无异常增多的红、白细胞碎片。（2）用参考方法核对。（3）同一份标本2次计数误差要10%。,（十一）临床意义,生理变化：新生儿婴儿，出生后3个月达成人水平。晨

6、间午后，春季冬季，毛细血管静脉运动、饱餐后上升，休息后恢复。月经期低，经期后上升。妊娠中晚期，分娩后12天,病理变化,1.plt减少：生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等破坏过多：ITP、脾亢、SLE等；消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜分布异常：脾肿大、血液被稀释等；先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征,2.plt增多：原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红细胞增多症等；反应性：急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等；其他：外科手术后、脾切除等。,三、plt平均体积（MPV）的临床意义,MPV参考值：6.813.6fL分析MPV临床意义需结合plt数量变化。1.鉴别plt减

7、少症的原因plt，而MPV，骨髓自身正常，外周血plt破坏。plt，而MPV,骨髓抑制损伤而造成plt,2.血小板增高性疾病plt，而MPV:脾切除，慢粒等；plt，而MPV：严重感染。3.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高,4.MPV可作为判断骨髓功能恢复的较早指标：骨髓功能衰退时，MPV、PLT同时，抑制越重，MPV越。当骨髓功能恢复时，MPV 先于PLT，是功能恢复的第一指标。,5.作为出血程度的监护指标:有出血倾向者MPV显著低于无出血倾向者，即使严重的PLT 者，如MPV6.4fL，出血发生率也低。,四、血小板分布宽度(PDW)和血小板比积(PCT）,1 PDW：是血液分析仪对血小

8、板分布情况进行数据处理得到的血小板体积的变异系数。2 PCT：是血小板计数值和MPV经过计算得到的，其值的大小与PLT和MPV值有关。PCT=PLTMPV,3、参考值：PDW：15.5%18.1%PCT:成人：0.108%0.282%115岁儿童：0.221%0.406%4、临床意义：暂未用于临床，须与其他参数联合应用,五、血小板形态检查,形态检查内容,血小板大小：有无巨大血小板或小型血小板；形态：胞质的颜色，颗粒有无、分布、粗细，空泡；PLT分布。,(一)正常形态,1.53m，呈圆形、椭圆形、逗点形或不规则形；胞质呈淡蓝或粉红，中心有若干细小紫红色颗粒，无细胞核，血片上35成群。,血小板（血

9、涂片）,(二)异常形态,1、大小异常（1）大血小板：直径47m，巨型血小板直径7.5m。见于ITP、巨大血小板综合征、脾切除等。（2）小血小板：直径1.5m，主要见于缺铁贫、再障等。,巨大血小板,2.形态异常,（1）幼稚形：颗粒少。（2）老年形:边缘不规则，颗粒粗，呈离心分布，有空泡。（3）病理幼稚形：体积大，胞质淡蓝，几乎无颗粒。,（4）病理刺激形：体积增大，形态不一，胞质呈淡蓝/紫红，颗粒多而大小一致。（5）退化形：大小、形态不一，有大空泡，无颗粒或颗粒聚集。正常人异常plt10%才有意义。,（6）血小板卫星现象：血小板粘附、围绕于中性粒细胞（或偶尔粘附于单核细胞）的现象。偶见于EDTA抗凝血血涂片中，导致血液分析仪PLT减少。（7）血小板“粘附”红细胞：,3.分布异常,（1）plt单个散在，不聚集：见于血小板无力症、再障、ITP等。（2）plt过度聚集：见于原发性plt增多症，骨髓纤维化等。,