《肠道杆菌》PPT课件.ppt
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1、肠道杆菌,分布:是一大群寄居在人类和动物肠道中、生 物学性状近似的革兰氏阴性杆菌,可随人和动物排泄物广泛分布于土壤、水和腐物中。种类:肠杆菌科、种类众多,30个菌属、120多 个菌种。致病:正常菌群-条件致病菌-致病菌、引起多 器官、多组织的病变。,肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属,埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属
2、 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌欧文菌族本 欧文菌属 草原居民欧文菌,菌族 菌属(菌种数)代表种,共同特性,一、形态与结构:G 杆菌、中等大小、无芽胞;大多有菌毛(粘附于肠道粘膜上皮细胞表面);多数有鞭毛(志贺菌-无鞭毛)。二、培养特性:兼性厌氧菌或需氧菌;营养要求不高。三、生化反应:活泼;能分解多种糖类和蛋白质,产生各不相同的代谢产物;可用各种生化反应检测其产物,以鉴别不同的细菌。,乳糖发酵试验,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,不发酵乳糖,发酵乳糖,生化反应对乳糖的分解可初步鉴别 肠道致病菌(志贺菌、沙门菌):-非致病菌(大肠杆
3、菌):+变形杆菌例外。重要的试验分离肠杆菌科的培养基:EMB-伊红美兰平板、MAC麦康凯平板、SS琼脂平板定科试验:革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。定属和定种试验:KIA、MIU、IMViC等,再结合血清学试验。,EMB平板:弱选择性培养基,有利肠杆菌科生长,肠道致 病菌无色菌落、非致病菌紫黑色等有色菌落。MAC平板:中选择性培养基,有利肠杆菌科生长,肠道致 病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。SS琼脂平板:强选择性培养基,有利志贺菌属、沙门菌属 生长,致病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。触酶试验:细菌分泌过氧化氢酶。氧化酶试验:细菌含有细胞色素氧化酶。硝酸盐还原试验:还原
4、硝酸盐成为亚硝酸盐的能力。,KIA:低层黄色,发酵葡萄糖;斜面黄色,发酵乳糖;黄色-产酸-A;红色-产碱-K;黑色-H2S。MIU:接种线模糊,有鞭毛;培养基变红色,产生尿素酶;加吲哚试剂,变红色,反应阳性。IMViC:吲哚试验、甲基红试验、VP试验、枸橼 酸盐利用试验的合称。,4、抗原构造复杂,鞭毛抗原(H),菌体抗原(O),K或Vi抗原,抗原结构:O抗原、H抗原、表面抗原O抗原细胞壁结构的脂多糖,包含类属抗原和特异性抗原,最外端的特异性多糖赋予其高度的特异性。耐热,100 不被破坏。是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌O157,霍乱弧菌O139。IgM型抗体,凝聚反应S-R变异
5、,H抗原:即细菌的鞭毛蛋白;不耐热,60 30分钟即被破坏;其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型。IgG型抗体表面抗原包绕O抗原的多糖抗原,如K抗原、Vi抗原等;不耐热,60 30分钟即被破坏;可阻断O抗原与相应抗体的结合。,5、抵抗力,不强,6、易变异,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,变异 肠杆菌易出现变异菌株,在诊断、治疗方面有重要意义。变异方式:表型变异、基因型变异(自发突变、可通过转导、接合或溶原性转换等转移遗传信息)。变异性状:S-R变异、H-O变异、耐药性、毒力、生化反应特 性改变等。,检验方法标本采集-肠外标本:依据感染
6、部位而定。肠道标本多采自新鲜粪便,最好带脓血或粘液。分离培养-肠外标本:无菌标本用血平板分离培养、有菌标本用MAC、EMB分离培养。肠道标本用强选择性SS平板分离培养。细菌鉴定:革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。KIA、MIU、IMViC等血清学试验等。,第一节 埃希菌属(Escherichia),大肠埃希菌(E.coli)是典型代表。分布:婴儿出生后数小时即进入肠道,并终生伴随,是人 体肠道正常菌群的重要构成菌。A:分解代谢产物,抑制痢疾杆菌等致病菌的生长 B:合成 ViB、ViK等,供人体吸收利用。C:天然抗原,致病:正常菌群-肠道外感染 特殊菌株-肠道内感染应用:
7、环境卫生、食品卫生的检测指标-饮水 3个大肠菌群数/升、瓶装汽水 5个大肠菌群数/100ml。分子生物学、基因工程-实验材料和研究对象。,一、生物学性状G 小杆菌,有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。发酵多种糖类,产酸并产气,大部分菌株迅速发酵乳糖,但引起肠内感染的菌株(致病性大肠杆菌)不发酵或缓慢发酵乳糖;在肠道鉴别培养基上呈现有色菌落;IMViC,脲酶试验阴性、硫化氢试验阴性。三种抗原,血清型表示式-O:K:H O111:K58:H2,大肠埃希菌(乳糖发酵试验和吲哚试验),二、致病性肠道外感染-机会性感染以化脓感染最为常见:泌尿系统感染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。在婴儿、老年人:败
8、血症、脑膜炎。肠道内感染-腹泻肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli ETEC)肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive E.coli EIEC)肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic E.coli EPEC)肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli EHEC)肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregative E.coli EAggEC),引起腹泻的大肠埃希菌,菌株,作用,部位,疾病与症状,致病机制,ETEC6、8、15、25、27、78、148、159,小肠,旅行者腹泻,,婴幼儿腹泻,,水样便,恶心,呕吐,腹,痛,低热,
9、LT,和(或),ST,肠毒素,大,量分泌液体和电解质,EIEC28ac、29、112ac124、136、143。,大肠,水样便,少量血便,,腹痛,,发热,质粒介导侵袭和破坏结肠粘,膜上皮细胞,EPEC2、55、86、111、114、119、125-128、142、158,小肠,婴儿腹泻,,水样便,恶心,,呕吐,发热,粘附和破坏上皮细胞,EHEC157、26、111,大肠,水样便,大量出血,剧烈,腹痛,低热或无,可并发,HUS,、血小板减少性紫癜,SLT,-,I,或,SLT,-,II,,中断蛋白质,合成,EAggEC42、44、3、86,小肠,婴儿,持续性,腹泻,,呕吐,,脱水,低热,集聚性粘附
10、上皮细胞,阻止,液体吸收,1.肠产毒性大肠杆菌(ETEC)ETEC 粘 定居因子(colonization factor)附 又称粘附素(adhesin)是细菌的特殊菌毛 CFA/CFA(colonization factor antigen,)小肠粘膜以免被肠蠕动、肠分泌液所清除 释 放 肠毒素 由细菌的质粒DNA编码 不耐热肠毒素(heat labile enterotoxin,LT)6530分钟失去活性 耐热肠毒素(heat stable enterotoxin,ST)100加热20分钟仍不被破坏,不耐热肠毒素(LT)B亚单位 受体:肠粘膜上皮细胞膜 表面的GM1神经节苷脂 A亚单位(毒
11、性活性部分)穿越细胞膜 活化 腺苷环化酶 ATP cAMP 水、电解质紊乱 腹泻,临床症状:轻度腹泻/严重的霍乱样症状是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌,耐热肠毒素(ST)鸟苷环化酶 GTP cGMP水、电解质紊乱 腹泻,2、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)无外毒素-肠毒素,但有强的侵袭力(类似痢疾杆菌)定位于结肠 侵入肠粘膜上皮细胞,生长繁殖,产生内毒素。破坏细胞形成炎症和溃疡,引起腹泻,呈脓血便,有里急后重,临床症状酷似志贺菌感染,主要侵犯较大儿童、成人。,3、肠致病性大肠杆菌(EPEC)是婴儿腹泻的主要病原菌;不产生肠毒素;也无侵袭力;但能粘附小肠粘膜上皮细胞,在小肠黏膜表面大量繁殖,破坏微绒
12、毛,导致刷状缘破坏,绒毛萎缩,上皮细胞结构、功能受损,干扰细胞的再吸收,造成严重腹泻,严重者可致死;最近报导,可产生类志贺毒素。,4、肠出血性大肠杆菌(EHEC)亦称为Vero毒素大肠埃希菌主要血清型:O157:H7主要毒力因子:菌毛质粒编码,介导细菌与肠粘膜细胞结合。志贺样毒素(Shiga-like toxin,SLT)噬菌体编码 细胞毒素主要临床症状:出血性结肠炎、伴以剧烈腹痛、血便。轻重不一。10%小于十岁患儿,有严重并发症,死亡率高,5、肠集聚性大肠埃希菌,质粒编码粘附素、使细菌吸附在肠粘膜细胞表面。分泌肠毒素、导致肠液大量分泌。婴儿水样腹泻。,三、微生物学检查法1、临床细菌学检查 标
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