血细胞检验.ppt
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1、临床检验手册,汝南县人民医院检验科王亚2011.06.20,检验医学(Laboratory medicine)既是一门古老的学科,又是一门新兴学科,同时也是涉及基础和临床专业最多的一门边缘学科。检验医学的主要作用是为临床疾病的诊断、疗效观察、病程监测、预后判断和预防提供实验室的客观依据和各种信息、故其作用和地位十分重要。随着基础医学和其他科学技术、特别是分子医学、电子学、生物信息和计算机学科的相应渗透和迅速发展,诸多新理论、新技术和新仪器都率先在检验医学中应用,使其内容不断拓宽和深化,面貌日新月异,成为发展最快的学科之一。其在临床医学中发挥的作用也越来越为重要。,第一章 检验前病人准备和标本采
2、集病人准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。由于病人受到各种内在和外界的影响,可使检验结果产生或大或小的误差,为此检验前病人须作适当准备,可减少随机分析误差。,一、病人准备病人准备除了特殊检验有专门规定外,一般要求病人处于安静状态,生活饮食处于日常状态,目前已公认无能无力、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果,现分述如下:,1.运动:肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类,短暂性影响为血浆脂肪酸含量,可因运动而暂时减少,而后渐渐增加而恢复。丙氨酸可因运动暂时增加达180%,而乳酸则可增加至300%。受到持续性影响主要是一些肌肉有关酶,如肌酸激酶、醛缩酶、乳酸脱氢酶等
3、,据称一场60min的手球训练赛后11h,肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%,长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平,因此采血前宜安静,不作过大的活动。,2.食物:进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐后24h采血,多数人碱性磷酸酶含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更明显。一般认为高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量,高比例不饱和脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍;含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。故在做相应
4、检验时,应对食物有一定的控制。,3.过度空腹:一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食,至次日晨采血,空腹约1214h。但过度空腹,若达24h以上,某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%;血糖可因空腹过长而减少为低血糖;血脂空腹过度,甘油三酯、甘油、游离脂肪酸反有增加,而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好,近年国外有人主张胆固醇单项检验,不必空腹抽血。,4.饮酒:饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、己醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高,平均红细胞体积增加,谷氨酰转肽酶(GGT)亦较不饮酒的人为高,甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。,5.吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋
5、白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多;血液学方面亦有变化,白细胞数增加,嗜酸粒细胞减少,中性粒细胞及单核细胞增多,血红蛋白偏高,平均红细胞体积偏高。Dalferes认为吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。,6.药物:药物对检验的影响非常复杂,15000多种药物对检验有干扰作用。众所周知,抗结核药、抗生素、抗白血病制剂、磺胺类药物,对肝功能有大小不一的影响,甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应,故在采样检查之前,暂停各种药物是为上策,如不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。,7.体位:体位影响血液循环,由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改
6、变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆白蛋白可因此而浓度增大,总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加;血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。由于体位的因素,不要让病人自己到检验科来采血做血常规,或复查红、白细胞计数,以免体位引入的误差。,8.其他:病人准备还应考虑病人的生物钟规律,因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久,也是一种误差因素,如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%。血气和PH值测定的血液以动脉血为原则,且不可漏气。细菌培养的样品
7、要采用无菌技术,防止污染。,二、标本采集标本采集是直接关系检验结果的基本功,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备,也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本采集要点分述如下:,1.血液标本:分普通管、抗凝管两大类;抗凝管又根据抗凝剂不同分为草酸钾管、草酸钠管、枸橼酸钠管、乙二胺四乙酸二钾盐或二钠盐(EDTA-K2或EDTA-Na2)管、肝素管等。1)草酸钾:与钙离子结合成草酸钙,2)使血液抗凝,3)常用量为12g/L血液。4)草酸钾氟化钠混合抗凝剂:专供葡萄糖测定用,5)氟化钠1g,6)草酸钾3g混合,7)混合每4mg可使血液1ml抗凝。,8)枸橼酸钠:用于血沉及血凝检查。血沉(魏氏
8、法)用109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠0.4ml,9)与血液1.6ml混和;血凝多用38g/L,10)亦可用32g/L,以抗凝剂与血液1:9混和。11)肝素:是一种粘多糖体,12)可抑制凝血酶原转化为凝血酶,13)使纤维蛋白原不14)能转化为纤维蛋白,15)以15+-2.5IU抗凝1ml血。可用于生化和血液学检验标16)本,,17)但不18)可用于筛选弥散性血管内凝血的血浆鱼精蛋白副凝试验(3P)和凝血酶试验。因肝素可与鱼精蛋白作用,19)发生沉淀使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现严重干扰。20)乙二胺四乙酸(EDTA):能与钙离子络合而21)抗凝,22)通常血常规中用其钾盐E
9、DTA-K2,或EDTA-K3。,2.尿液标本:根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿,计时尿(2h 3h 12h 24h等),午后尿、餐后尿等。晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后采集第1次排尿,可用于常规检验。随时尿不受时间的约束,多为门诊病人的留尿方法。空腹尿为进餐后4h左右排尿,收集下1次的尿液供检验,主要用于了解葡萄糖代谢情况。计时尿不论几小时,均应于计时开始进排空尿液,然后于规定时间内排尿,计时尿多用于肾功能和有形成成分排出率的评估,亦用计算淀粉酶或肌酐的排出率。24h尿多用于化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。尿液原则上不用防腐剂为好,如需12h或24h 尿,首选以冷
10、藏为妥,次为根据检验申请加用合适的防腐剂。,3.粪便标本:采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定温度,且立即送检,立即检查。如检查虫体或绦虫头节,应全部粪便送检,如检查蛲虫则不必送送验粪样,而应于晨起排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本不应污染容器外表,且不太满,30g容器装510g为妥。,如大便上有粘液或是血液,应采集此处标本,以提高阳性率,30min内送检,放置过久易导致细胞的破坏,特别是阿米巴等原虫。,4.脑脊液、浆膜腔液、关节液:均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,相互配合并及时检验。5.骨髓:采集由临床医师穿刺,为使涂片满意,必要时本科协助作骨髓涂片。
11、,6.胃及十二指肠液:一般均在门诊室或病房采集后送检,收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(BAO)、最大胃酸分泌(MAO)等;十二指肠液分甲、乙、丙管,甲管来自总胆管为橙黄色,乙管来自胆囊为黄绿色,丙管来自胆道为柠檬色,细菌培养应从乙管取样接种培养。,7.痰液标本:采早晨第1口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血药浓度最低时采样。,8.阴道分泌物:由妇产科医师采样后送检,如成批送检应在37加温数分钟后检查,否则影响滴虫动力,容易漏检。9.精液和前列腺液:采集精液应在35天内勿排
12、精,且于排精后30min内保温送达检验科,容器以广口小玻璃瓶为好,不可贮于避孕套或塑料瓶内。收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,收到标本后应立即检查。10.其他标本:根据具体检验项目而定。,第二章 临床检验,一、临检标本采集要求(1)血常规标(2)本采集方法1.采血前,2.仔细核对血常规试管上的标3.签与化验单上的姓名4.、床号、住院号是否相符。5.检查血常规试管底部是否有抗凝剂。6.静脉血一般用肘静脉,7.也可选用颈静脉或股静脉,8.采血处应避免有皮肤红肿、溃疡等现象。9.取1ml血,10.缓缓注入血常规试管中,11.或加血至标12.记线处,13.盖上盖子,14.立即颠倒
13、混匀不15.少于5次,16.避免剧烈振荡,17.以免产生气泡。一小时内送检。,18.禁止在输液侧肢体采血或在输液后立即于该侧采血。19.实行一人、一针、一管、一带、一垫,20.防止交叉感染。21.若要进行比较性测定,22.应尽量在同23.一时间采血,24.不同25.时间的细胞数可能有较大的变化。26.由于血小板极易凝集,27.采血者应首先采集常规血,28.其次为出凝血、血沉,29.最后才是生化免疫。注:网织红细胞(RET)、C反应蛋白(CRP)、糖化血红蛋白(HAlb)可与血常规共用一管,(3)出凝血、血沉标(4)本采集方法1.采血前,2.仔细核对试管上的标3.签与化验单上的姓名4.、床号、住
14、院号是否相符。5.检查试管底部是否有抗凝剂。6.尽量空腹采血,7.采血要顺利。8.缓缓向出凝血、血沉管中加血至刻度处,9.务必要准确,10.立即加盖,11.颠倒充分混匀5、6次。及时送检,(5)其他常规血液项目标(6)本采集方法1.血中微丝蚴:在夜间10时至凌晨2时之间,2.取末梢血23滴于干净玻片上,3.制成厚涂片,4.立即送检。5.红斑狼疮细胞(LE):请到门诊处抽血。6.疟原虫:最好在全身开始寒战初期,7.将血滴涂成薄涂片,8.立即送检。9.肺炎支原体、衣原体抗体:采血约2ml置洁净玻璃管内,10.2小时内送检。,(7)尿液标(8)本采集方法1.尿常规(URT):取晨起第一次小便中段尿,
15、2.或第二次小便中段尿约20l置洁净器皿内,30min内送检。如急诊可取随机尿。3.尿淀粉酶(UAMY):晨尿或随机尿约10ml,4.30min内送检。5.尿本6.周蛋白(Bence-Jones):取晨尿20ml,7.30min内送检。8.乳糜试验:随机尿20ml,9.30min内送检。10.妊娠试验(尿hCG):晨尿中段或随机尿中段约10ml,11.立即送检。12.尿三杯试验:采集标13.本时应连续排尿,14.中间不15.应有间断,16.各杯不17.少于10ml,18.立即送检。,二、临检项目的临床意义,一 血常规白细胞计数(WBC)临床意义:生理性增多:初生儿、运动、疼痛、情绪变化、应激、
16、妊娠、分娩 病理增高见于:急性感染:急性化脓性感染所引起的急性全身性感染局部炎症,以及一些细胞感染。组织损伤:手术后急性心肌梗塞。恶性肿瘤及白白病:急性、慢性粒细胞性白血病,尤以慢性白血病增高最多。各种恶性肿瘤的晚期,如肝癌、胃癌等。其它:骨髓纤维化、真性红细胞增多症、尿毒症、酸中毒、某些药物中毒、烧伤等。减少见于:某些感染:细菌感染(如伤感、副伤寒);病毒感染(如流感、风疹、麻疹)。,某些血液病:再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、恶性网状细胞增多症。脾功能亢进:各种原因所致的脾肿大,如肝硬班替氏综合症。理化因素:放射性物质、X线、某些抗癌药、解热镇痛药等,可造成白细胞减少。少于0.5109/
17、L提示患者受感染的危险极大,应采取适当的预防措施,并仔细监测。少于3109/L可认为白细胞减少,应了解白细胞分类,并作进一步检查;多于12109/L可视为增多,白细胞分类对确定增多原因有一定价值,应寻找感染的来源。30109/L或更多者有白血病可能,应作白细胞分类及骨髓检查。参考值:成人:410 109/L婴儿(两周岁内):1112109/L新生儿:1520109/L,白细胞分类中性粒细胞:增高见于:急性感染和化脓性感染:如肺炎、败血症、脓肿等。组织损伤:大手术后、心肌梗塞、肺梗塞等。恶性肿瘤:急、慢性白血病、淋巴瘤等。各种中毒:尿毒症、糖尿病酸中毒等。减少见于:某些传染病:流感、伤寒、付伤寒
18、、麻疹。某些血液病:再障、粒细胞缺乏症、白细胞减少症。化疗或放疗后,抗癌药物,X线及镭照射。其它:脾功能亢进,自身免疫性疾病,高度恶病质。嗜酸粒细胞:增多见于:变态反应性疾病:支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、血管神经性水肿、过敏紫癜。寄生虫病:蛔虫病、钩虫病、血吸虫病。某些皮肤病:湿疹、牛皮癣、剥脱性皮炎等。某些血液病:慢粒、恶性淋巴瘤、嗜酸性粒细胞性白血症、多发性骨髓瘤、何杰金氏病等。减少见于:应用糖皮质激素、促肾上腺皮质激素。伤寒、副伤寒等病患者。嗜碱性粒细胞:,增多见于:慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病。某些转移癌及骨髓纤维化。淋巴细胞:增多见于:某些病毒或细胞所致的传染病:传染性淋巴
19、细胞增多症、传染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。减少见于:应用肾上腺皮质激素、接触放射线。细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。单核细胞:单核细胞具有游走性和吞噬作用,除吞噬细胞和异物外,又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆 菌及麻风杆菌。增多见于:某些感染:伤寒、结核、疟疾、黑热病、亚急性细菌性心内膜炎。某些血液病:单核细胞性白血病、淋巴瘤、骨髓异常增殖综合症、恶性组织细胞病。,参考值:中性细胞:4070%淋巴细胞:2040%单核细胞:310%嗜酸细胞:0.55%嗜碱细胞:01%红细胞计数(RBC)临床意义:红细胞增多见于:(1)严重呕吐、腹泻
20、、大面积烧伤及晚期消化道肿瘤患者。多为脱水血浓缩使血液中的有形成分相对地增多所致。(2)心肺疾病:先天性心脏病、慢性肺脏疾患及慢性一氧化碳中毒等。因缺氧必须借助大量红细胞来维持供氧需要。(3)干细胞疾患:真性红细胞增多症。红细胞减少见于:(1)急性或慢性失血。(2)红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。(3)缺乏造血因素、造血障碍和造血组织损伤。(4)各种原因的血管内或血管外溶血。参考值:3.551012/L,血红蛋白(Hgb)临床意义:贫血、白血病、产后、手术后、大量失血、钩虫病等减少。缺铁性贫血时尤为明显。肺气肿、肺心病、先天性心脏病、严重呕吐、腹泻、出汗过多、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及
21、真性红细胞增多症等时增高(长期居住高原者生理性增高)。Hb低于45g/L者应予输血治疗(充血性心力衰竭者除外);低于105g/L者应寻找贫血原因;高于180g/L者应作进一步检查。高于230g/L者,应紧急采取治疗措施。参考值:男:120160 g/L女:110150 g/L新生儿:170200 g/L,红细胞比积(Hct)临床意义:红细胞比积增加:大量脱水、血液丢失及真性红细胞增多症,均由于血液浓缩而使红细胞比积增高。红细胞比积减少:见于各种贫血。低于0.14者必须给予输血治疗(有充血性心力衰竭者不宜);低于0.33者应进一步检查,寻找贫血原因。男性高于0.56、女性高于0.53同时结合血红
22、蛋白增高应考虑血浆容量问题。达到或高于0.70者为紧急静脉放血的指征。参考值:0.350.45,平均红细胞体积(MCV)临床意义:正常红细胞性贫血时正常,大细胞性贫血时增大,小细胞性贫血时减小。体积减小常见于严重缺铁性贫血,遗传性球型细胞增多症;体积增大常见于急性溶血性贫血及巨红细胞性贫血。参考值:80100 fL,红细胞平均血红蛋白含量(MCH)临床意义:增加见于大细胞性贫血,减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素性贫血。参考值:2734 pg,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)临床意义:大细胞性贫血时MCHC正常或减小,单纯小细胞性贫血时MCHC正常,小细胞低色素性贫血时MCHC减小。参考
23、值:320360 g/L各型贫血时三种红细胞平均值的改变,贫血类型 MCV MCH MCHC 大细胞性贫血 正常 正常 正常 恶性贫血,及营养性巨幼细胞性贫血等 正常细胞性贫血 正常 正常 正常 急性失血、溶血性贫血、造血组织病等 单纯小细胞性贫血 正常 正常 正常 感染、中毒、慢性炎症、尿毒症等 小细胞低色素性贫血 正常 正常 正常 慢性失血性贫血、缺铁性贫血,红细胞分布宽度(RDW)临床意义:RDW与MCV结合可将贫血分为小细胞均一性与不均一性贫血,正常细胞均一性与不均一性贫血,及大细胞均一性与不均一性贫血。在治疗过程中大细胞性或小细胞性贫血的这一指标会有动态变化。参考值:11.515.5
24、%,血小板计数(Plt)临床意义:增多见于:(1)原发性血小板增多症、慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症、溶血性贫血、淋巴瘤。(2)手术后、急性失血后、创伤、骨折。(3)某些恶性肿瘤、感染、缺氧。减少见于:(1)原发性血小板减少性紫癜、白血病、再生障碍性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、巨幼细胞性贫血等。(2)脾功能亢进、放射病、癌的骨髓转移。(3)某些传染病或感染:如败血症、结核、伤寒。(4)某些药物过敏:氯霉素、抗癌药等。参考值:100300109/L,血小板平均体积(MPV)临床意义:原发性血小板减少性紫癜、妊娠后期伴浮肿和蛋白尿者,以及急性失血(外伤)或大手术后的巨大血小板综合征(Ber
25、mard Soulier综合征)时MPV增大;非免疫性血小板破坏、再障、湿疹和血小板减少反复感染综合征(Wiskolt-Aldrich综合征)、骨髓移植恢复期、先兆子痫及慢性粒细胞性白血病时MPV减少。参考值:7.512.5 fL,血小板分布宽度(PDW)临床意义:巨幼红细胞贫血、急性粒细胞白血病、骨髓异常增生综合症(MDS)、原发性血小板减少性紫癜等时都可引起PDW增大。参考值:15.517.5%,二 纤溶系统纤维蛋白原(FIB)升高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎,尿毒症,骨髓病,休克,外科术后及轻度肝炎等。减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。,凝
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